大腸桿菌致腦膜炎小鼠模型的構(gòu)建及腦脊液采集方法的改建

鐘昊然，王培莉，黃藍(lán)田，孟 霞，李建基，朱國強(qiáng)，崔璐瑩，董俊升，王 亨*

(1.揚(yáng)州大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院 江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 揚(yáng)州 225009；2.教育部農(nóng)業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品安全國際合作聯(lián)合實驗室，江蘇 揚(yáng)州 225009)

大腸桿菌引發(fā)的腦膜炎是一種臨床上人和動物都頗受關(guān)注的感染性疾病，主要由大腸桿菌隨血液進(jìn)入腦部而引發(fā)腦膜與腦實質(zhì)部位的炎癥反應(yīng)，并導(dǎo)致相關(guān)損傷[1]。臨床上多聯(lián)合運(yùn)用腦脊液檢查、影像學(xué)、病原學(xué)檢查和血液學(xué)檢查等進(jìn)行鑒別診斷[2]。由于各類型腦膜炎缺乏特異性的臨床表現(xiàn)，不易鑒別診斷，故建立腦膜炎模型和收集樣本方法，對提高診出率具有重要意義[3]。本試驗所用的大腸桿菌TW-XM菌株已被證實能引起雛鴨、雛雞的腦膜炎[4-5]。

腦脊液(cerebrospinal fluid,CSF)檢查是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)疾病的重要檢查方法。腦脊液的性狀和成分變化可反映疾病的類型和程度，所以當(dāng)CNS受損時，常進(jìn)行腦脊液的輔助檢查。但由于小鼠的腦室及蛛網(wǎng)膜下腔狹小，血管豐富，導(dǎo)致小鼠腦脊液采集過程復(fù)雜，失敗率較高[6]。本研究通過腹腔注射大腸桿菌構(gòu)建了大腸桿菌致小鼠腦膜炎模型，并改良了傳統(tǒng)小鼠腦脊液的采集方法，為腦脊液收集和進(jìn)行腦膜炎疾病診療提供相應(yīng)的思路和方法，同時也為腦膜炎致病機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物SPF級雄性(institute of cancer research，ICR)小鼠20只，4周齡，體質(zhì)量20～30 g，購于揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心，每天12 h光照，12 h黑暗循環(huán)。飼養(yǎng)過程中給予全價飼料，自由飲水。……