氣相色譜-質譜法測定茶葉中6種農藥殘留

劉偉悅，劉夢瑤

北京張一元金橋茶葉有限公司（北京 101102）

茶葉源于中國，最早被作為祭品使用。春秋后期，茶葉被人們作為菜食，在西漢中后期發展為藥用以及宮廷高級飲料，西晉以后成為普及民間的普通飲料。茶葉中含有兒茶素、茶多酚、氨基酸、礦物質等成分，有安神明目、解毒消暑、消食醒酒、增強免疫力等功效，被譽為“世界三大飲料之一”。

為提高茶葉產量，農藥在茶葉病蟲防治中得到了廣泛使用，由此帶來的農藥殘留可能危害消費者健康。隨著生活水平日益提高，人們對茶葉的質量和安全性有了更高要求[1]。陳紅平等[2]研究發現，農藥在茶湯中的浸出率取決于農藥的理化性質（內因）和沖泡方法（外因）。一般認為農藥殘留的種類和含量在國家標準允許范圍內，不會對人體產生明顯的健康危害或潛在的危害，這個標準是通過嚴格的安全風險評估后確定的，同時也會根據相關情況的發展變化不斷修訂標準，最新版國家強制性標準GB 2763—2019《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》[3]中涉及茶葉中農藥最大殘留限量達到65種。國內外農藥殘留的檢測方法主要有氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質譜法、氣相色譜-串聯質譜法、液相色譜-串聯質譜法等[4-7]。其中，液相色譜-質譜聯用法和氣相色譜-質譜聯用法利用被測樣品離子質荷比，定性定量更加準確，檢測靈敏度更高，對于茶葉類復雜基質中農藥殘留檢測有其獨特的技術優勢。

試驗建立適用于檢測茶葉中農藥殘留的氣相色譜-質譜聯用法，該方法簡單快速、分離度好、重現性好、精密度高，可滿足同時檢測茶葉中西瑪津[8-11]、莠去津、氟蟲脲、百菌清[12-16]、毒死蜱和喹硫磷6種農藥殘留的要求。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

丙酮中西瑪津、莠去津、氟蟲脲、毒死蜱、喹硫磷，正己烷中百菌清溶液標準樣品（質量濃度均為100 μg/mL），內標正己烷中環氧七氯（質量濃度為100 μg/mL）（農業部環境保護科研監測所）；乙腈，甲苯、正己烷（均為色譜純，賽默飛世爾科技（中國）有限公司）；無水硫酸鈉（分析純，北京化工廠，經550 ℃灼燒4 h，儲存于干燥器中，冷卻后備用）；Cleanert TPT固相萃取柱（Agela公司）；0.22 μm尼龍微孔過濾膜（津騰公司）。

1.2 儀器與設備

7890B-5975C氣相色譜-質譜儀（美國安捷倫公司）；CM-12水浴氮吹儀（北京成萌偉業科技有限公司）；RE-2000B旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）；QL-901渦旋混合器（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）；HP-5MS色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；SE202F電子分析天平（奧豪斯）；TDL-40B臺式低速離心機（飛鴿牌）；HY-5A型回旋式振蕩器（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 待測液制備[17]

稱取5 g（精確至0.01 g）粉碎均勻的試樣，用體積20.0 mL的乙腈振蕩提取1 h，在4000 r/min下離心5 min。分取4 mL上清液，過Cleanert TPT固相萃取柱（萃取柱中加入約2 cm高無水硫酸鈉，用10 mL乙腈-甲苯（3+1）洗脫液預洗，棄去流出液）凈化，用20 mL乙腈+甲苯（3+1）洗脫，收集的洗脫液水浴40 ℃旋蒸至近干，用正己烷定容1 mL，加40 μL環氧七氯（35 μg/mL）內標，過0.22 μm微孔過濾膜，混勻，用于氣相色譜-質譜測定，以基質標準溶液工作曲線定量。

1.3.2 標準曲線的繪制

混合標準儲備液的配制：用移液槍取農藥標準溶液，加入10.0 mL容量瓶中，用正己烷稀釋并定容。各農藥標準溶液的取用體積見表1。

表1 混合標準儲備液質量濃度

基質空白溶液的制備：同待測液的制備方法，用未檢出待測農藥的普洱生茶樣品制作基質空白溶液，洗脫液旋蒸至近干。用正己烷標液定容，過0.22 μm濾膜，所得溶液為基質空白溶液。

基質混合標準溶液的配制：將1 mL混合標準溶液氮吹至近干，用基質空白定容至1 mL。配制6點標準曲線，分別移取20，40，60，80，100和200 μL上述混合標準溶液，用基質空白溶液定容至1 mL，加40 μL環氧七氯（35 μg/mL）內標，混勻，待上機。基質標準曲線質量濃度見表2。

表2 基質標準曲線質量濃度 單位：μg/L

1.3.3 氣相色譜-質譜條件

氣相色譜進樣口溫度260 ℃；柱溫40 ℃保持1 min，30 ℃/min升溫至250 ℃，保持1 min；3 ℃/min升溫至280 ℃，保持2 min；30 ℃/min升溫至310 ℃，保持3 min；壓力為9.1 Psi，載氣采用高純氦氣He（≥9.999%），HP-5色譜柱，柱流速為1.2 mL/min，不分流進樣，進樣量1 μL。

質譜采用EI離子源，電離能量70 eV；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；傳輸線溫度280 ℃；溶劑延遲時間6.5 min。采用選擇離子掃（SIM）方式定性定量。化合物英文名稱、保留時間及質譜參數見表3。

表3 保留時間和質譜特征離子

2 結果與分析

2.1 標準曲線與線性范圍

氣質聯用儀經調諧通過后，即可進樣分析。以所測化合物與環氧七氯響應值比為縱坐標，濃度比為橫坐標，以3倍信噪比（S/N）計算方法檢出限，以10倍信噪比（S/N）計算方法定量限[18-21]，茶葉中6種農藥線性回歸方程、相關系數、檢出限和限值見表4。

表4 茶葉中6種農藥線性回歸方程、相關系數、檢出限和限值

2.2 加標回收和精密度

選擇普洱生茶空白樣品進行加標處理，處理方法同待測液的制備方法，按照所建立的方法處理、測定，每個加標量重復6次，驗證試驗方法的精密度。空白樣品中6種農藥加標回收結果見表5。從表5可以看出，6種農藥的加標回收率在75.4%～114.6%，表明方法準確度高；精密度在0.3%～7.8%，表明方法重現性好。

表5 農藥加標回收率及精密度

2.3 3種茶葉樣品加標回收率分析

對綠茶、紅茶、茉莉花茶3種茶葉進行6種農殘加標試驗，制備均勻樣品，采用試驗方法提取、凈化、上機測試，添加水平及回收率見表6。從表6可以看出，3種茶葉中6種農藥的回收率在70.5%～108.0%，表明方法可用于茶葉中6種農藥殘留的同時檢測。

表6 3種茶葉加標回收

2.4 樣品測定

隨機抽取綠茶、紅茶、黑茶、烏龍茶、茉莉花茶5種茶樣共187批次，采用建立的檢測方法對該批樣品進行檢測。結果表明，西瑪津、莠去津、百菌清、氟蟲脲、喹硫磷均未檢出，而毒死蜱的檢出率較高。共有152批次樣品中檢出毒死蜱，各種茶類抽檢批次，檢出毒死蜱批次和毒死蜱最高檢出含量見表7。由表7可知，烏龍茶和茉莉花茶毒死蜱檢出率最高，但含量均低于GB 2763—2019《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》規定的茶葉農藥殘留限值。

表7 茶葉樣品中毒死蜱檢出情況

3 結論

建立氣相色譜-質譜聯用法，可同時測定茶葉中西瑪津、莠去津、氟蟲脲、百菌清、毒死蜱、喹硫磷的殘留量，且方法線性相關性好、準確度高、精密度好。試驗結果一方面可為茶葉產品標準的完善提供數據，另一方面可為監管部門對茶葉產品的風險監測提供方法參考。