干、濕化學法部分生化項目檢測結果比較分析

嚴欣亮

（江陰市第三人民醫院，江蘇 江陰214400）

我院檢驗科生化室配有一臺mindry BS-2000全自動生化分析儀，檢驗科門急診部配有一臺美國強生公司的VITROS-350型全自動干化學分析儀，兩臺生化分析儀檢測同一份標本所得結果有時會出現明顯不同，給臨床醫生帶來困惑，給診斷、評估病情、解釋結果帶來一定困難。現用科學的方法對兩臺生化儀進行比較分析，深入了解兩種分析方法的特點和各自的優缺點，為我院實驗室用兩種方法檢測結果的可比性提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 儀器mindry BS-2000全自動生化分析儀；強生VITROS-350全自動干化學分析儀。

1.2 試劑mindry BS-2000全自動生化分析儀所有試劑均為深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司提供的配套試劑；強生VITROS-350全自動干化學分析儀試劑由強生公司生產的用于該儀器的原裝干片試劑。

1.3 樣本 隨機抽取我院住院或門診患者無脂血、無溶血正常值和異常值新鮮血清40份，標本濃度范圍盡量覆蓋當日最高濃度和最低濃度；1例新鮮配置混合血清15mL（混合后檢測TP 70.5g/L，BUN 5.6mmol/L，ALT 45U/L）；4例生化質控血清（批號1227UN及909UE）各測兩次。

1.4 方法

1.4.1 實驗前準備：校準將要對比的兩個系統，按照兩臺儀器檢測方法要求分別完成質控，保證兩臺儀器均在良好的質量控制狀態。

1.4.2 干化學法：強生VITROS-350用原裝校準液進行校準。（強生公司提供校準液）

1.4.3 濕化學法：mindry BS-2000生化分析儀使用“江蘇朗道生物技術有限公司”校正液校正（批號CAL2351）；

1.4.4 質控品選用“江蘇朗道生物技術有限公司”提供的干粉質控品，用雙蒸餾水復溶后使用。40份患者血清標本及4例生化質控血清樣本分別在兩臺生化分析 儀 上 測 定ALT、AST、GGT、ALP、LDH、CK、BUN、Glu、UA、CREA、TP、ALB、TB等13個項目，所有測試在2小時內完畢。

1.5 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件分析，對13對26個數據進行正態性檢驗，即K-S檢驗，符合正態性分布的數據再進行方差齊性檢驗，呈正態性分布，且方差齊的各組數據采用配對t檢驗，非正態分布或方差不齊的各組數據采用秩和檢驗，開展直線相關與回歸分析。

2 結果

2.1 兩臺儀器當月質控結果CV%均控制在5%以內，可見兩儀器性能良好，測試結果穩定、可靠，精密度好。

2.2 重復性實驗 取新采集的新鮮血液配置的混合血清，用兩臺儀器分別測20次，分別計算平均值、標準差及批內CV%，批內CV%均小于國家規定的CV%[1-2]。結果表明，使用試劑穩定，儀器狀態良好，結果重復性好。

2.3 對兩臺生化分析儀的兩組檢測結果分別進行正態性檢驗，即K-S檢驗，其中TP、GLU、UA、ALB、ALP兩組數據分別P>0.05，數據呈正態分布。對這五組數據進行方差齊性分析P>0.05，說明方差齊。因此，用參數檢驗中的配對樣本t檢驗。見表1

表1 成對樣本t檢驗

2.4 BUN、TB、CREA、LDH、ALT、AST、GGT、CK正態性分析的P<0.05，數據不呈正態分布，可用非參數檢驗中的秩和檢驗。經檢驗，GLU、ALB、ALP、TB的P>0.05，差異無統計學意義；CREA、LDH、ALT、AST、GGT、CK、BUN、TP、UA各項的P<0.05，差異有統計學意義。見表2

表2 成組設計兩樣本比較的秩和檢驗

2.5 對兩臺儀器的分析結果進行線性檢驗線性回歸分析，所測項目的r（相關系數）都大于0.94，相關性檢驗P<0.01；結果顯示兩臺儀器分析結果的相關性和線性都良好。見表3

表3 干化學與濕化學法測定結果回歸方程及線性評價（n=44，±s）

表3 干化學與濕化學法測定結果回歸方程及線性評價（n=44，±s）

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3 討論

濕化學法和干化學法血清標本生化項目測定的形式不同，一個在液體試劑環境，一個是干片狀態，濕化學法的濃度測定基于光的朗伯-比爾定律，而干化學法測定的原理是入射光通過基質被吸收后，檢測反射光的強度來計算出被測物質的濃度[3]。

濕化學分析是最常用的方法，經多年發展、完善，已形成一套完整成熟的全自動分析方法，而干化學分析法是近幾年隨著POCT的發展而出現的一種新的分析方法，其采用比較獨特的多涂層膜技術，選擇性的阻留或去除干擾物質，能掩蓋待測物質的有色物質，為其提供反應背景。能將反應原理的各種物理反應、化學反應在各個分層中進行，使其一層反應完成后所得產物又可進入另一層中進行反應，使各層可給出一種特定的環境用以控制反應序列和反應時間[4]。從而引導反應序列。儀器吸樣部分有壓力感受系統，樣品凝固或者過少都能被感受到，杜絕了結果錯誤；其檢測所用的干片、吸頭等都是一次性用品；沒有管道系統，也沒有比色杯。因此，不需要蒸餾水沖洗，完全避免了樣品間、試劑間的干擾；所需樣品極少，分析速度快，可同時檢測多個生化項目，干化學法已成為急診生化檢測的又一新手段[5-6]。

干化學、濕化學兩種分析方法測定的部分生化項目中TB、BUN、CREA、ALT、AST、ALP、GGT的測定結果存在差異，經過相關回歸分析，發現兩種方法所測結果的相關性良好（r>0.93），可見，兩種分析方法的差異屬于系統誤差，其產生的原因主要是試劑加入方式不同及分析原理不同所引起。誤差屬于系統誤差，濕化學法又比較成熟，在實際工作中，應該以濕化學法分析作為參考標準。方法用相同的校準品每周同時進行校準，干化學法利用線性方程=a+bx，設定a和b就可獲得一致的結果。值得一提的是LDH，兩種儀器的測定結果差異較大，干化學法測定LDH采用丙酮酸和NADH在LDH作用下生成乳酸和NAD+與濕化學法相反。但相關性良好（r=0.9876），同樣的可以利用線性方程=a+bx，設定a和b值，也可獲得一致的結果。因此，要定期對不同分析儀進行校準，并比對檢測結果，保證每臺儀器測定結果的準確性和可靠性，為臨床提供有參考價值的數據。