2016—2018年廣州地區兒童非傷寒沙門菌感染的臨床流行病學特征*

劉瑜華, 張又祥, 胡家奇

廣州市第一人民醫院兒科(廣東廣州 510030)

急性腹瀉病是威脅兒童健康的主要疾病之一，據統計，全世界每年有超過28億人次發病，5歲以下兒童死于腹瀉病者超過70萬[1]。引起兒童腹瀉的病原繁多，腸道病原菌以及它們的產物是引起急性腹瀉的主要原因，其中，非傷寒沙門菌(Nontyphoidal Salmonella，NTS)感染是引起兒童急性腹瀉的重要原因。NTS感染引起的疾病主要是NTS感染性急性胃腸炎，全世界每年感染患者超過9 380萬例，每年有15.5萬人死于NTS感染。NTS感染性急性胃腸炎中，腸炎沙門菌和鼠傷寒沙門菌是最常見的分離亞種。我國近幾年嬰幼兒細菌性腹瀉病原菌主要為NTS，檢出率3.2%～11.6%[2-3]。NTS感染主要通過糞-口途徑感染，是食源性疾病的重要病原菌。本研究通過了解廣州地區兒童NTS感染的流行病學特征及臨床特點，旨在為本地區兒童NTS感染的預防和治療提供借鑒。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2016年1月1日至2018年12月31日因“嘔吐、腹瀉等消化道癥狀”就診于廣州市第一人民醫院兒科(院本部以及南沙中心醫院分院)門診或住院接受診療并留取大便細菌培養的兒童，共2 658例。其中，男1 466例，女1 192例；年齡4 d～18歲，中位年齡1歲10個月。3—5月(春季)共479例；6—8月(夏季)共879例；9—11月(秋季)共858例；12—2月(冬季)共442例。

納入標準：有腹瀉(24 h內解稀爛或水樣大便次數大于3次)或伴嘔吐等消化道癥狀，且留取大便標本進行細菌培養者。

排除標準：(1)未留取大便標本進行細菌培養。(2)年齡>18歲。

1.2 材料 試劑見表1。

表1 試劑和儀器

1.3 方法

1.3.1 腸道細菌分離鑒定(大便標本培養) 細菌培養：因有嘔吐、腹瀉等消化道癥狀患兒初次就診我院，留取糞便標本或直腸拭子送至我院微生物實驗室，挑取糞便中的膿性血、黏液或直腸拭子直接接種于XLD平板，35℃培養18～24 h后檢查平板，檢查培養基上是否存在中心為黑色的紅色菌落(疑似沙門菌),如果有,則進行初步生化鑒定。

1.3.2 初步生化鑒定 從平板分別挑取單個可疑菌落，接種三糖鐵斜面，同時分純。肉湯轉種麥康凱和沙門顯色平板。初篩生化符合以下標準者考慮為沙門菌：氧化礙試驗(-),葡萄糖(+),乳糖(-),TS為K/A,動力(+)、賴氨酸脫酶(+)、硝酸鹽還原試驗(+),H2S試驗(+), IMVIC(+/-)、氧化酶試驗(-)、脲酶試驗(-)。根據生化鑒定結果,從SS瓊脂平板上挑取純菌落,用微生物鑒定儀或傳統生化反應進行細菌鑒定。

1.3.3 血清型鑒定 對于確定沙門菌培養陽性者進一步使用生化編碼系統鑒定(法國生物梅里埃公司)，使用沙門菌血清型鑒定平板和沙門菌分型血清進行血清分型鑒定。所有試劑均按照說明書要求保存并在有效期內使用。

1.4 統計學方法 采用WPS EXCEL辦公軟件或SPSS 16.0統計軟件對患兒的流行病學資料、人口學信息、大便培養結果進行資料匯總、制圖及統計分析，組間差異采用方差分析或2檢驗，計量資料采用均數±標準差表示，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 大便細菌培養總體陽性分離率及各血清型分布 2016—2018年共收集2 658例大便標本進行大便細菌培養，共有258例糞便細菌培養沙門菌陽性，3年間陽性分離率差異無統計學意義(P>0.05)；傷寒沙門菌感染散發出現，主要以NTS感染為主。見表2。

表2 2016—2018年各年陽性分離率及各血清分型分布 例(%)

2016—2018年男女患病數為：男1 466例，女1 192例，男性大便分離陽性率為10.2%，女性大便分離陽性率為9.1%，差異無統計學意義(2=1.083，P=0.298)。

2.2 NTS感染的年齡分布特點 2016—2018年各年齡組沙門菌陽性率為2.5%～14.7%，各年齡組陽性率有統計學意義(2=7.52，P=0.000)，以1～2歲年齡段陽性率最高。見表3。

表3 2016—2018年各年齡組沙門菌陽性率

大便沙門菌培養陽性多為嬰幼兒，隨年齡增長，陽性率呈遞減趨勢，3歲以下嬰幼兒占比達89.5%。見表4。

表4 沙門菌陽性患兒各年齡組占比 例(%)

2.3 NTS感染的季節分布特點 2016—2018年1—12月份各月份間發病率差異有統計學意義(F=5.719，P=0.000)。

經統計分析，2016—2018年，1～12月份大便沙門菌分離陽性率波動于0.79%～14.45%，其中1、2、3、12月份共4個月陽性率較低(0.79%～2.1%)，且該4個月月度之間的陽性率差異無統計學意義(P>0.05)；4—11月陽性率較高(9.51%～14.45%)，但4—11月各月份間陽性率差異無統計學意義(P>0.05)；而1、2、3、12月與4—11月各組間陽性率差異有統計學意義(P<0.05)，2016年—2018年3年間4—11月份沙門菌分離陽性率較其他月份明顯升高，且差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 2016—2018年1-12月NTS陽性率

3 討論

2016年1月至2018年12月廣州市第一人民醫院兒科(含南沙中心醫院分院)共收集2 658份大便標本進行細菌培養，沙門菌培養陽性258例。其中，傷寒沙門菌感染4例(占比0.2%)，且均為2016年發生，提示廣州地區傷寒病例發病率極低，且以散發出現。本研究發現，在沙門菌感染患兒中，以NTS感染急性胃腸炎為主，258例糞便沙門菌培養陽性中，共發現254例為NTS感染，其中鼠傷寒沙門菌8例(占比3.1%)，其余246例為非鼠傷寒NTS，鼠傷寒沙門菌分離率較2014年報道的上海地區29.7%和2016年報道的河南地區20.1%明顯降低[4-5]。此外，2018年廣東省中山市報道NTS感染也以鼠傷寒血清型占比較高，但未列出詳細占比[6]。本研究發現NTS感染中，鼠傷寒血清型占比較低，與其他地區存在較大差異，需要進一步探討。

NTS感染的血清型往往與食物密切相關，雞蛋和雞肉被認為是腸炎型NTS的主要宿主，在生菜、生肉、冰淇淋、海鮮中，阿哥拉和德比郡血清型沙門菌被發現的比例明顯高于其他血清型[7-8]。故當出現爆發性沙門菌感染時，應當對食物進行溯源調查以明確感染是否與食品污染相關。了解各地區優勢流行NTS感染的血清型，對于當地NTS感染的預防與食品衛生監控具有重要意義。

在2016—2018年我院的糞便細菌培養沙門菌陽性的258例患兒中，男性患兒151例，男性分離率10.2%，女性患兒107例，女性分離率9.1%，差異無統計學意義(P>0.05)，說明性別與感染率沒有相關性。各年齡組沙門菌分離率中，1～2歲分離率最高達14.6%，可能與1～2歲齡兒童活動范圍擴大，接觸不衛生環境問題增多，兒童腸道免疫功能未發育成熟，機體抵抗力低下，飲食結構和衛生習慣等有關[9]。自1～2歲年齡組后，沙門菌分離率呈下降趨勢，提示隨著年齡增長，兒童飲食衛生習慣不斷進步，機體免疫功能漸發育完善，NTS感染風險也逐步降低。針對NTS感染的發病年齡特點，應當加強嬰幼兒的衛生管理，以減少NTS感染的發病率。沙門菌陽性患兒各年齡組占比中，<3歲的患兒占89.5%，而3歲以上的患兒僅占10.5%，提示NTS感染好發于3歲以下嬰幼兒，嬰幼兒是NTS感染的高危群體。在廣州地區，幼兒園的入托年齡是>3歲，少部分是2～3歲。本研究提示，NTS感染可能與家庭衛生管理相關性更強。

2016—2018年，各月份沙門菌分離陽性率在0.79%～14.45%之間，其中，1、2、3、12月份分離陽性率較低，4—11月份分離陽性率高于其他月份，且差異有統計學意義(P<0.01)，提示NTS感染高發季節通常在春、夏、秋兩季(4—11月份)，占全年發病例數的80%以上。這可能與夏秋季節氣溫高、濕度大，適合沙門菌生長繁殖，飲食結構不同有關，與中國其他地區以及北美各國的季節分布相似[4,7,10-11]。而在非洲岡比亞地區，兒童NTS高發感染的月份是在瘧疾高發的12月份和1月份[12-13]。提示NTS感染的高發季節與環境變化，氣溫變化以及當地流行疾病有關。

NTS感染的預防是公共衛生管理的重要課題。針對NTS感染特征，應當提升全民衛生意識。從個人、家庭、學校或幼兒托管中心等兒童聚集場所以及公共場所等4個方面加強管理。針對NTS感染以3歲以下嬰幼兒為主，應當著手加強家庭衛生管理，避免交叉感染，飯前、便后洗手，進食衛生食品；在高發季節，做好預防工作，避免爆發性感染出現。

NTS感染性胃腸炎大多數為自限性疾病，沒有證據表明抗生素治療有臨床效益，且不恰當的抗生素使用可能會帶來不良影響及增加耐藥性[14-15]，但對于新生兒、使用免疫抑制劑等有浸潤性感染風險的兒童，建議使用抗生素治療，目前推薦使用三代頭孢菌素[16]。此外，各地區應當了解當地流行優勢血清型，制定有效可靠的抗生素治療方案，避免抗生素濫用，減少耐藥菌的發生。

越來越多的研究表明，NTS感染是兒童胃腸道感染的重要病原菌，持續監測當地的NTS感染的臨床流行病學特征，評估NTS感染的潛在風險和經濟負擔，對制定合理有效的預防和診治具有重要的意義。