血漿促酰基化蛋白與肥胖型非酒精性脂肪性肝病的相關(guān)性

李小祥 顧小丹 許衛(wèi)東

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一種慢性肝臟疾病，是以異常肝脂肪堆積、炎癥和肝細(xì)胞功能障礙為特征的肝臟疾病[1]。NAFLD在成年人中發(fā)病率可達(dá)20%～33%，而肥胖人群中的發(fā)病率超過75%。促酰基化蛋白(ASP)來源于脂肪細(xì)胞，最初是從血漿中分離出來的小分子蛋白質(zhì)[2-3]。ASP可促進脂肪酸酯化和甘油三脂(TG)的合成，ASP代謝途徑功能失調(diào)可導(dǎo)致嚴(yán)重脂肪及糖代謝紊亂，與肥胖癥、糖尿病、脂肪肝等疾病的發(fā)生密切相關(guān)[4-5]。該研究旨在探究肥胖型NAFLD患者人群的ASP水平及其與糖脂代謝之間的聯(lián)系。

資料與方法

一、研究對象

選擇2017年12月至2019年12月如東縣人民醫(yī)院收治的72例肥胖型NAFLD患者為研究組，其中男性44例(61%)，女性28例(39%)；年齡29～60歲，平均47.22歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①本研究的所有的肥胖型NAFLD患者均來自2017年12月至2019年12月期間在本院治療的患者(n=72)。NAFLD患者根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會于2010年發(fā)布的《非酒精性脂肪性肝病診療指南(修訂版)》進行診斷。其中明確要求沒有飲酒史或男性飲酒量<20 g/d,女性飲酒量<10 g/d。排除其他會導(dǎo)致脂肪性肝病的特定疾病。NAFLD患者的肝臟超聲學(xué)表現(xiàn)為彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪病變；②本研究不存在醫(yī)學(xué)倫理學(xué)問題，所有患者均簽署知情同意書，并積極配合本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重精神疾病的患者；②患有嚴(yán)重心血管疾病、腎臟器質(zhì)性病變的患者；③惡性腫瘤患者；④處于妊娠或哺乳期的患者。同時，隨機選擇72例于同期在本院診斷為非肥胖型NAFLD患者作為對照組，其中男性40例(55.56%)，女性32例(44.44%)；年齡30～57歲，平均年齡48.23歲，且非肥胖型NAFLD患者均知情并同意參與此研究。兩組研究對象的基本資料比較，均無顯著性差異(P>0.05)。此外，本研究還隨機選取了同期60個在本醫(yī)院體檢合格的健康人，其中男性32例(54%)，女性28例(46%)，平均年齡為46.67歲，且健康參與者均知情并同意參與此研究。在本研究中，非肥胖定義為BMI<28 kg/m2，肥胖[6]定義為BMI≥28 kg/m2。此外，依據(jù)世界衛(wèi)生組織定義的亞洲人中心肥胖的標(biāo)準(zhǔn)，腰臀比被用來作為中心肥胖的標(biāo)準(zhǔn)(男性腰臀比≥0.9；女性腰臀比≥0.8)。本研究中分別收集了對照組、非肥胖型NAFLD患者和肥胖型NAFLD患者的基本信息，包括年齡、性別、運動情況、高血糖、腰圍等指標(biāo)，并比較了三組之間的差異性。

二、研究方法

(一)基本情況調(diào)查 通過問卷調(diào)查的方式，記錄和整理所有參與者的基本情況，包括每周的運動次數(shù)和飲酒情況，其中運動次數(shù)定義為三類：每周不運動(無)；每周1～2/次(中等)；每周≥3 次(大量)。

(二)體測 所有參與者均進行身高、體質(zhì)量、腰圍以及血壓的測量，并計算體質(zhì)指數(shù)和腰臀比。體質(zhì)指數(shù)(BMI)=體質(zhì)量(kg)÷ 高(m)2；腰臀比=腰圍(cm)/臀圍(cm)。血壓分別測量兩次，取兩次讀數(shù)的平均值。

(三)觀察指標(biāo) 所有患者空腹8 h后，于清晨各采集兩管5 mL靜脈血(一管用于分離血漿，另一管用于分離血清)，離心后將上清液轉(zhuǎn)移至EP管中用液氮速凍，然后轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱冷凍保存，備用。采用全自動生化分析儀(Cobas 8000，羅氏，瑞士)進行生化指標(biāo)的測定：空腹血糖(FPG)以及空腹胰島素(FINS)含量，并計算胰島素抵抗(IR)指數(shù)。胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=FPG(mmol/L)× FINS(mU/L)/22.5。用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒測定肝功能指標(biāo)：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)；血脂分析指標(biāo)包括甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、脂肪變、載脂蛋白A、載脂蛋白B、ASP含量。

三、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、三組研究對象的臨床特征比較

如表1所示，與對照組相比，非肥胖型NAFLD組和肥胖型NAFLD組年齡、性別、運動次數(shù)以及飲酒情況均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，但肥胖型NAFLD組BMI指標(biāo)顯著性大于其他兩組(P<0.01)。肥胖型NAFLD組的腰圍和腰臀比顯著性高于其他兩組，且ALT、TG含量、HOMA-IR和脂肪變指標(biāo)顯著性大于其他兩組(P<0.01)。另外，兩組NAFLD患者高血壓、糖尿病以及高脂血癥的比例顯著高于對照組(P<0.01)，且肥胖型NAFLD顯著性高于非肥胖型NAFLD(P<0.01)。再者，非肥胖型NAFLD患者血清中的ALT、TG、HOMA-IR以及CAP均顯著性高于其他兩組(P<0.01)。

二、三組研究對象血脂指標(biāo)比較

如表2所示，非肥胖型NAFLD組和肥胖型NAFLD組患者載脂蛋白A、載脂蛋白B、TC以及血漿中的血漿ASP含量均顯著性高于對照組(P<0.01)，且肥胖型NAFLD組患者載脂蛋白A、載脂蛋白B、TC以及血漿中的血漿ASP含量均顯著性高于非肥胖型NAFLD組(P<0.01)。

三、血脂指標(biāo)與BMI的相關(guān)性

如表2所示，經(jīng)過Pearson相關(guān)性分析，肥胖型NAFLD患者血漿中的血漿ASP含量與BMI呈正相關(guān)(R=0.531 0)，載脂蛋白A(R=0.437 8)、載脂蛋白B(R=0.568 9)、TC(R=0.382 3)也與BMI分別呈正相關(guān)。

表1 三組研究對象的臨床及生化特征()

表2 三組研究對象的血脂指標(biāo)()(mmol/L)

討 論

NAFLD患者高血壓、糖尿病和高脂血癥的比例顯著高于對照組，說明NAFLD容易誘發(fā)脂質(zhì)代謝障礙。NAFLD中肝脂肪變性是由于肝臟甘油三酯或脂肪酸清除率增加或減少所致[7]。脂肪組織作為內(nèi)分泌器官，產(chǎn)生大量的補體系統(tǒng)因子。補體成分3(C3)是參與代謝紊亂的重要蛋白，其通過炎癥反應(yīng)或直接刺激脂質(zhì)儲存的C3亞導(dǎo)管ASP來實現(xiàn)。ASP通過激活替代補體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生，從而調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝[8]。先前研究發(fā)現(xiàn)，補體C3在普通人群中作為NAFLD的生物標(biāo)志物[9-11]，在中國人群中研究發(fā)現(xiàn)NAFLD患者血清補體C3水平較高且與NAFLD的患病率和嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[12]。此外，在北印度肥胖婦女人群中調(diào)查發(fā)現(xiàn)，高水平的ASP可作為代謝綜合征女性肥胖的潛在標(biāo)志[13-14]。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，在肥胖型NAFLD患者的血漿中ASP含量高于非肥胖型NAFLD患者。有研究發(fā)現(xiàn)，ASP敲除的小鼠不能產(chǎn)生ASP，脂肪組織庫明顯減少，對飲食誘導(dǎo)的肥胖和胰島素抵抗有抵抗力[15]。ASP通路的功能障礙，通過減少脂肪細(xì)胞捕獲的脂肪酸的比例，將增加脂肪酸流向肝臟的流量，最終導(dǎo)致高甘油三酯血癥。

ALT是衡量肝功能狀況的重要指標(biāo)，它是機體發(fā)生病毒性肝炎以及脂肪肝等肝臟疾病的一個標(biāo)志[16-17]。本研究中，相比較對照組，肥胖型NAFLD的血清中的ALT含量顯著增加，可能由于肥胖加劇了肝臟的損傷。TG、HOMA-IR、CAP、載脂蛋白A、載脂蛋白B以及總膽固醇(TC)均可反映機體的脂質(zhì)代謝狀況。本研究結(jié)果表明，肥胖型NAFLD患者血清中的TG、HOMA-IR、CAP、載脂蛋白A、載脂蛋白B以及TC均顯著性高于非肥胖型NAFLD，且證明載脂蛋白A、載脂蛋白B以及TC與BMI呈正相關(guān)，這說明肥胖型NAFLD對脂代謝的影響效果比非肥胖型NAFLD更顯著。

在本研究中，肥胖型NAFLD患者的血糖、胰島素水平和胰島素抵抗值升高，說明肥胖型NAFLD患者存在胰島素抵抗。本研究結(jié)果提示，高水平ASP與肥胖密切相關(guān)。先前有文獻報道，NAFLD患者血漿ASP水平與血脂的關(guān)系沒有相關(guān)性[18-19]；另外，有研究表明血漿ASP與BMI呈正相關(guān)，且在肥胖兒童患者中，血漿ASP水平顯著大于健康兒童[20]；血漿ASP水平與BMI、胰島素和脂質(zhì)(apoB、甘油三酯和非酯化脂肪酸)相關(guān)[21-22]。本研究結(jié)果表明，NAFLD患者血漿中的ASP含量與BMI呈正相關(guān)。Mishra等[13-14]研究發(fā)現(xiàn)，肥胖婦女血漿ASP含量與胰島素、TG、葡萄糖呈正相關(guān)，這和本研究的結(jié)果相一致。

綜上所述，血漿ASP水平與肥胖型NAFLD相關(guān)，血漿ASP可以作為判斷肥胖型非酒精性脂肪性肝病的指標(biāo)之一，借助脂代謝指標(biāo)更有利于全面診斷肥胖型NAFLD。