分離膠真空采血管采集的血清標(biāo)本放置不同時間對生化檢驗結(jié)果的影響分析

程德芹，王寶玉（通訊作者）

（1 盱眙縣人民醫(yī)院輸血科 江蘇 盱眙 211700）

（2 盱眙縣人民醫(yī)院檢驗科 江蘇 盱眙 211700）

目前在臨床檢驗實(shí)際工作中，自動化技術(shù)越來越普遍，特別是生化自動化檢驗在臨床檢驗工作中已經(jīng)得到了很大發(fā)展，臨床檢驗的質(zhì)量和效率得到不斷提升，但是分析前標(biāo)本的處理和分析后標(biāo)本儲存的質(zhì)量控制一直沒得到關(guān)注。血液標(biāo)本采集、處理以及儲存時間對結(jié)果是否有干擾等問題對保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性非常重要，在患者的臨床診治過程中具有非常重要的價值和意義。分離膠真空采血管因為具有快速促凝和快速分離血清的作用，最近幾年來被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗血液樣本采集中。使用真空采血管分離出來的血清樣本不需要吸出到樣本管中就可以直接檢測，這是由于血細(xì)胞代謝和破壞作用被屏障，降低了對檢驗結(jié)果的影響[1]。分析由美國貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的生化免疫流水線，生化標(biāo)本全部采用分離膠真空管采集血液，標(biāo)本在流水線上自動掃描檢測項目、自動離心、自動加樣檢測，檢測后可自動加蓋進(jìn)入流水線冰箱保存（保存溫度2 ～8 ℃左右）[2]，臨床應(yīng)用價值高。本文通過對分離膠真空采血管在長時間保存樣本時樣本的穩(wěn)定性進(jìn)行了分析，討論分離膠真空采血管在臨床檢驗自動化流水線中應(yīng)用效果。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年2 月我院接受健康體檢的50 人，其中男性23 人，女性27 人，年齡29 ～77 歲，平均年齡為53 歲。應(yīng)用分離膠真空采血管采集血液，在采集12 h 之前，囑咐體檢者禁食，并且保證空腹。研究人員于清晨抽取體檢人員空腹靜脈血5 mL，將其放置在溫室，輕晃后放置15 min，然后將標(biāo)本直接放入生化免疫流水線上，儀器自動離心（時間10 min，3 000 r/min）、拔蓋、檢測相關(guān)生化指標(biāo)，以上所有標(biāo)本均排除脂血、黃疸和溶血等情況，所有體檢人員均符合要求。

1.2 分離膠真空采血管

使用德國進(jìn)口的Greiner 非可替真空采血管，規(guī)格是13 mm×100 mm，采血容量為5 mL。

1.3 儀器設(shè)備

美國貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的生化免疫流水線，型號為AU5821 全自動生化分析儀；試劑為原裝配套試劑。各項檢測指標(biāo)都在同一的生化分析上進(jìn)行檢測，檢測試劑也為同一批號。

1.4 方法

檢測人員嚴(yán)格按照儀器標(biāo)準(zhǔn)化操作流程對血清樣本進(jìn)行生化指標(biāo)檢測，分別檢測和記錄0 h、24 h、48 h、72 h、96 h 的鉀離子（K+）、甘油三酯（TG）、血清尿素氮（BUN）、血糖（GLU）、總蛋白（TP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）幾項生化檢測指標(biāo)水平，與0 h 檢測的水平進(jìn)行比較。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，各項生化指標(biāo)前后變化以（± s）表示，采用t檢驗；以P＜0.05表示差異顯著。

2.結(jié)果

50 份血液樣本在2 ～8 ℃保存5 d，每隔24 h 對標(biāo)本的各項生化指標(biāo)進(jìn)行檢測1 次，檢測結(jié)果表明：

（1）在48 h 內(nèi)，K+、TG、BUN、GLU、TP、ALT、AST幾項生化指標(biāo)檢測結(jié)果與0 h 基本接近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（2）超過48 h 之后，血清K+生化檢測指標(biāo)水平有所變化，和0 h對比有顯著差異（P＜0.05）：各項生化檢測指標(biāo)在96 h 內(nèi)（0 h、24 h、48 h、72 h、96 h 5 個時間段）的水平變化情況，見表1。

表1 標(biāo)本儲存后各時間段生化指標(biāo)檢測結(jié)果（ ± s）

表1 標(biāo)本儲存后各時間段生化指標(biāo)檢測結(jié)果（ ± s）

注：表中t 值、P 值為0 h 與96 h 的對比結(jié)果。

生化指標(biāo) 0 h 24 h 48 h 72 h K+ 4.11±0.33 4.22±0.34 4.25±0.32 4.28±0.37 TG 1.57±0.97 1.57±0.98 1.57±0.97 1.58±0.97 BUN 5.37±1.68 5.36±1.15 5.31±1.17 5.38±1.17 GLU 6.00±1.55 6.00±1.56 6.00±1.55 6.04±1.54 TP 70.78±4.72 71.09±4.51 70.86±4.51 70.90±4.61 ALT 21.1±9.87 21.2±9.43 21.54±9.62 21.02±9.76 AST 23.88±6.00 24.2±5.96 23.94±6.00 23.86±5.99生化指標(biāo) 96 h t（0 h 與96 h 比） P K+ 4.44±0.32 5.076 0.000 TG 1.58±0.97 0.051 0.959 BUN 5.41±1.16 0.138 0.890 GLU 6.01±1.53 0.032 0.974 TP 70.81±4.41 0.032 0.973 ALT 21.6±9.40 0.259 0.795 AST 24.20±5.87 0.269 0.788

3.討論

在臨床檢驗工作中，血液標(biāo)本采集是其中很重要的一個環(huán)節(jié)，應(yīng)用普通的采血試管采血，檢驗的結(jié)果很容易出現(xiàn)誤差，在醫(yī)學(xué)檢驗中不能快速得到準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。隨著近幾年我國醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)自動化水平的不斷發(fā)展，臨床檢驗項目的測定速度也得到了迅速提升，由此對標(biāo)本分析前和分析后的質(zhì)量控制也提出了更高的要求。現(xiàn)在很多的臨床檢驗項目都采用血清標(biāo)本進(jìn)行檢測，血液標(biāo)本的自然收縮時間很長，需要在37 ℃左右才能夠快速分離出血清，如果分離不徹底則導(dǎo)致血清內(nèi)懸浮有蛋白凝塊或凝絲等情況，容易引起全自動分析儀吸樣不準(zhǔn)確甚至堵塞吸樣針等情況，嚴(yán)重影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，降低了標(biāo)本檢測速度，從而導(dǎo)致標(biāo)本實(shí)驗室內(nèi)周轉(zhuǎn)時間延長[3]。

分離膠真空采血管屬于一種觸變性粘性膠體，呈惰性，具有很好的氣密性和透明度[4]。惰性分離膠血清管在離心后，分離膠在血清和血細(xì)胞之間形成穩(wěn)定的分界層，避免細(xì)胞內(nèi)成分釋放到血清內(nèi)，影響檢測結(jié)果，讓生化檢測結(jié)果變得更加的準(zhǔn)確，并且保持血清長時間穩(wěn)定，為標(biāo)本在儲存過程中需要復(fù)查結(jié)果提供了更加準(zhǔn)確的保障。除此之外，分離膠真空采血管內(nèi)壁涂有促凝劑，能夠促進(jìn)血液凝固，并且不需要將其放置于水浴箱內(nèi)促其凝固，在溫室放置10 ～15 min 血液樣本就可凝固，最后離心分離出血清。分離膠真空采血管內(nèi)壁經(jīng)硅化處理，光滑、潔凈，有效避免掛壁和溶血現(xiàn)象。還可以加快血清的快速分離，減少分離時間。

相關(guān)文獻(xiàn)資料報導(dǎo)結(jié)果表明[5]，分離膠真空采血管與普通的促凝干燥管分離出來的血清其檢測結(jié)果沒有太大差異。研究人員把血液標(biāo)本放入分離膠真空采血管中，在2 ～8 ℃下保存血液樣本7 d 內(nèi)，觀察各項生化指標(biāo)的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)鉀離子的濃度在標(biāo)本保存期間的各個時間段都呈上升趨勢，逐漸升高，這與本次結(jié)果一致，其原因可能是分離膠雖然已經(jīng)將血球和血清隔離開來，但是也只能起到一定的隔離作用，而血細(xì)胞中的鉀離子仍然在釋放，并在達(dá)到一定濃度后慢慢的穿過分離層進(jìn)入到血清中，使得鉀離子水平上升[6-7]。應(yīng)用分離膠采血管保存標(biāo)本時，除鉀離子有明顯變化外，其他大部分生化指標(biāo)在5 d 內(nèi)都保持著很好的穩(wěn)定性，沒有太過明顯的變化趨勢。

綜上所述，在醫(yī)學(xué)檢驗自動化流水線檢測時應(yīng)用分離膠真空采血管儲存標(biāo)本具有快速分離血清、傳輸安全、分離效果好，除K+外，標(biāo)本長時間保存4 ～5 天對結(jié)果影響小、檢測結(jié)果穩(wěn)定，可滿足臨床檢驗自動化流水線對標(biāo)本快速分離和標(biāo)本成分穩(wěn)定的要求。