CLIA在乙型肝炎患者病毒血清學(xué)標(biāo)志物檢驗(yàn)中的效果和符合率評(píng)價(jià)

陳國(guó)華

（泰州市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 泰州 225321）

0 引言

近年來(lái)隨著人們生活方式的改變，以及飲食方式的調(diào)整，也提高了一些傳染疾病的發(fā)病率，乙型肝炎就是其中較為常見(jiàn)的一種。乙肝病毒易傳染，具有一定的進(jìn)展性，會(huì)逐漸惡化至肝硬化等疾病降低患者生命質(zhì)量。做好患者病毒標(biāo)志物檢測(cè)可幫助醫(yī)師準(zhǔn)確了解患者病毒感染、攜帶情況，及時(shí)制定治療對(duì)策[1-2]?；诖?，本文將探討CLIA在乙型肝炎患者病毒血清學(xué)標(biāo)志物檢驗(yàn)中的效果和符合率。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選擇2019年3月至2020年10月在我院接受治療的150名乙型肝炎患者為研究對(duì)象，分為常規(guī)組75例，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），研究組75例，采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）。常規(guī)組男44例，女31例，年齡29～61歲，平均（45.66±3.17）歲，研究組男44例，女31例，年齡29～61歲，平均（45.66±3.17）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均符合《乙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》（WS299-2008）中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且病例資料比較完整；②患者近期內(nèi)未接受過(guò)抗病毒治療；③意識(shí)清醒了解研究?jī)?nèi)容，并愿意參與配合，已在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下簽寫(xiě)知情協(xié)議。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者患有其他嚴(yán)重的臟器系統(tǒng)疾病或合并其他甲型、丙型、丁型、戊型肝炎病毒；②女性患者在妊娠期或哺乳期。

1.2 方法。統(tǒng)一對(duì)選取的150例乙型肝炎感染患者進(jìn)行健康宣教，向其說(shuō)明檢測(cè)方法與配合注意事項(xiàng)。接下來(lái)進(jìn)行肘部靜脈血樣采集，取患者晨起空腹?fàn)顟B(tài)的靜脈血3～5 mL，室溫放置1～2 h，待樣本充分凝集后使用醫(yī)用離心機(jī)以3000 r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行分離，離心時(shí)間15 min，將分離出的上清液血清吸出置于一次性血清樣品保存管內(nèi)于-20℃醫(yī)用冰箱中冰凍保存待用。先使用上?？迫A生物酶聯(lián)免疫吸附法的檢測(cè)試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，嚴(yán)格按照試劑盒所提供的說(shuō)明書(shū)，根據(jù)sop操作程序，對(duì)乙肝5項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢驗(yàn)，使用酶標(biāo)免疫分析儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，型號(hào)：RT-6100）讀取OD值，判斷陰性陽(yáng)性，并將檢驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果自動(dòng)傳輸入東軟lis系統(tǒng)里保存。再應(yīng)用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（北京科美生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，型號(hào)：lica800）根據(jù)sop操作程序?qū)颊哐鍢颖具M(jìn)行CLIA法檢測(cè)，檢測(cè)試劑為其配套試劑，檢測(cè)乙肝5項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物，并將檢驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果自動(dòng)傳輸入東軟lis系統(tǒng)里保存。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 各項(xiàng)指標(biāo)的檢出率：通過(guò)臨床觀察，分析兩組患者在HBsAb（乙型肝炎表面抗體）、HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBeAg（乙型肝炎e抗原）、HBcAb（乙型肝炎核心抗體）、HBeAb（乙型肝炎e抗體）5項(xiàng)方面的檢出率。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：HBsAb（乙型肝炎表面抗體）超過(guò)10.0 mIU/mL為陽(yáng)性，HBsAg（乙型肝炎表面抗原）超過(guò)0.05 IU/mL為陽(yáng)性，HBeAg（乙型肝炎e抗原）超過(guò)0.7 PEI/mL為陽(yáng)性、HBcAb（肝炎核心抗體）超過(guò)5.3 PEI/mL為陽(yáng)性、HBeAb（乙型肝炎 e 抗體）超過(guò)3 PEI/mL為陽(yáng)性。

1.3.2 低水平乙型肝炎表面抗原的檢查結(jié)果；通過(guò)臨床觀察統(tǒng)計(jì)兩組在低水平乙型肝炎表面抗原方面的檢查敏感度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（±s）表示，χ2，t檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的判定標(biāo)準(zhǔn)為P≤0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組指標(biāo)檢出率比較。兩組在HBsAb、HBcAb方面檢出無(wú)明顯差異，但研究組在HBsAg、HBeAg、HBeAb的檢出方面要明顯優(yōu)于常規(guī)組，P≤0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者檢測(cè)質(zhì)量比較[n（%）]

2.2 兩組HBsAg檢查結(jié)果比較。研究組在0.02～0.06（ng/ mL）檢出方面明顯優(yōu)于常規(guī)組，檢查敏感度更高，P≤0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2 兩組HBsAg檢查低水平比較（±s）

表2 兩組HBsAg檢查低水平比較（±s）

組別 例數(shù) 0.02～0.06（ng/mL）0.051～1.00（ng/mL）0.021～0.05（ng/mL）1.01～3.00（ng/mL）常規(guī)組 75 10（13.33） 22（29.33） 12（16.00） 8（10.67）研究組 75 20（26.67） 28（37.33） 12（16.00） 8（10.67）χ2 - 4.16 1.08 - -P - 0.04 0.30 - -

3 討論

乙型肝炎是一項(xiàng)較受全世界關(guān)注的健康難題，具有轉(zhuǎn)播感染率高，患病人群多的特點(diǎn)，是現(xiàn)階段健康危害性較高的一種傳染疾病[3]。就近年來(lái)的研究數(shù)據(jù)表明乙肝病毒患者中超過(guò)70%的患者均為慢性感染患者，該類(lèi)患者疾病具有可持續(xù)發(fā)展性，若不及時(shí)進(jìn)行控制干預(yù)，會(huì)進(jìn)一步提高疾病危害程度，演化至肝硬化甚至肝癌疾病，提高患者病死風(fēng)險(xiǎn)。乙肝病毒的傳播與患者自身免疫力低下、家族傳播等均有關(guān)系，及時(shí)了解患者患病情況，改善肝臟組織學(xué)，對(duì)提高患者疾病抵抗力，徹底清除體內(nèi)病毒有積極意義，因此臨床上比較重視患者病毒血清學(xué)標(biāo)志物檢驗(yàn)[4]。近年來(lái)，隨現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用也變得更加廣泛[5]。在以往的臨床診斷過(guò)程中，常采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行診斷，該方法雖然具有一定的靈敏度與特異性，但在假陽(yáng)性與假陰性的檢出方面還是存在些許不足，會(huì)對(duì)醫(yī)師評(píng)估病情產(chǎn)生不良影響。采用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，不但有助于簡(jiǎn)化操作流程，其還可以直觀的反應(yīng)患者病情變化，具有定量檢測(cè)優(yōu)勢(shì)。

在本次研究中，對(duì)150例患者依次采用酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光免疫分析法進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)后者的檢查符合率更高，單獨(dú)觀察兩種檢測(cè)方法在HBsAg水平的檢出方面，發(fā)現(xiàn)HBsAg水平處于0.02～0.06（ng/mL）階段時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢出率更高，說(shuō)明其檢查敏感度更高。化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法的使用原理與光輻射反應(yīng)有關(guān)，被分為發(fā)光物免疫測(cè)定、發(fā)光輔助因子免疫測(cè)定、發(fā)光酶免疫測(cè)定三種，這三種技術(shù)都是通過(guò)采用發(fā)光物質(zhì)對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記，來(lái)計(jì)算需檢測(cè)物質(zhì)的濃度水平。與酶聯(lián)免疫法相比化學(xué)發(fā)光免疫分析法具有以下優(yōu)勢(shì)。首先是檢查質(zhì)量?jī)?yōu)勢(shì)，在檢測(cè)過(guò)程中，化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)會(huì)借助一些催化劑提高發(fā)光性能，釋放更多的光信號(hào)，屬于一種免疫標(biāo)志檢測(cè)技術(shù)，所以在HBsAg、HBeAb等血清標(biāo)志物檢出方面較為敏感。第二在利用該技術(shù)進(jìn)行檢查時(shí)不會(huì)受到變異抗體的干擾，其檢查結(jié)果的穩(wěn)定性也比較高。第三在本次研究中我科室使用的科美全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀lica800，是利用光激化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，其反應(yīng)體系為均相反應(yīng)，具有反應(yīng)充分、反應(yīng)時(shí)間短、反應(yīng)體系溫度均一性好的優(yōu)點(diǎn)，此方法具有很高的精密度；由于在均相中反應(yīng)，免清洗加上其獨(dú)特的檢測(cè)原理“結(jié)合則發(fā)光”，因此檢測(cè)過(guò)程無(wú)須進(jìn)行洗滌分離，從而減少了因清洗造成檢測(cè)過(guò)程中的隨機(jī)誤差和交叉污染，最大限度地提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和分析精密度。

綜上所述，在乙型肝炎患者病毒血清學(xué)標(biāo)志物檢驗(yàn)中，采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法對(duì)提高檢查符合率有積極影響。