乙肝病毒血清學(xué)檢驗采用化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的比較

于萍

煙臺市芝罘區(qū)疾病預(yù)防控制中心，山東煙臺 264001

乙肝是臨床中比較常見的一種感染性疾病，主要以腹脹、惡心、乏力、厭食、肝區(qū)疼痛等癥狀為臨床表現(xiàn)，潛伏期時間約為1～6個月[1]。相關(guān)文獻(xiàn)報道顯示，乙肝病毒感染和很多疾病的發(fā)生與發(fā)展都有著十分緊密的聯(lián)系，且隨著病情的不斷發(fā)展，使得部分患者會出現(xiàn)肝功能異常、脾大等癥狀，對患者生命安全有著極大的威脅[2]。乙肝病毒傳染性非常強，加之傳播途徑比較多，使得盡早診斷對疾病治療及預(yù)后有著十分積極的意義。現(xiàn)階段，化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）與酶聯(lián)免疫法（ELISA）是進(jìn)行乙肝病毒血清學(xué)檢驗的常用方法，前者作為一種新型免疫檢驗方法，能夠?qū)崿F(xiàn)定量分析，準(zhǔn)確性非常高[3]；后者作為一種常用檢驗方法，具有適眾廣、成本低等特點，在基層醫(yī)療單位中得到了廣泛應(yīng)用，但定量分析不足，尤其是血清標(biāo)本濃度過大時，非常容易出現(xiàn)假陰性情況[4]。基于此，該文現(xiàn)選取2020年1月—2021年1月在該院進(jìn)行血清學(xué)檢驗的疑似乙肝患者90例進(jìn)行研究，比較分析ECLIA與ELISA檢驗的臨床價值。現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

研究對象選取在該院進(jìn)行血清學(xué)檢驗確診的乙肝患者90例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①意識清晰，可正常溝通；②伴有與乙肝患者接觸史；③簽訂知情同意書，經(jīng)倫理委員會批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有精神異常或者認(rèn)知障礙；②合并惡性腫瘤；③伴有其他類型病毒感染；④合并嚴(yán)重心、腎功能異常；⑤伴有其他類型肝炎或者肝病；⑥妊娠期或者哺乳期女性；⑦中途退出研究，臨床資料不完整。90例患者年齡最小為22歲，最大為70歲，平均為（45.28±5.76）歲；女性42例，男性48例；初中及以下10例，高中及中專42例，大專及以上38例。

1.2 方法

采集患者清晨空腹靜脈血5 mL，采用離心處理，轉(zhuǎn)速3 000 r/min，時間10 min，分離上層清液，儲存于零下20℃待測。

1.2.1 ECLIA檢驗將待測血清樣本放入含有乙肝病毒核心抗原的聚苯乙烯試管中，利用100μl過氧化酶予以標(biāo)記，置于37℃環(huán)境中，時間為2 h，之后利用磷酸緩沖鹽溶液予以沖洗，3 min/次，沖洗3次，再之后加入100μl過氧化氫+100μl魯米洛，最后利用全自動化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測。

1.2.2 ELISA檢驗將ELISA試劑與微孔反應(yīng)條置于室溫環(huán)境中，時間為30 min，之后將待測血清樣本加入微孔反應(yīng)條中，利用封片予以封鎖，置于37℃水浴箱中，時間為60 min，然后取出，將微孔反應(yīng)條上液體除去，反復(fù)洗滌5次，再之后向微孔反應(yīng)條中加入試劑，利用封片進(jìn)行封鎖，置于37℃水浴箱中，時間為30 min，然后取出，將微孔反應(yīng)條上液體除去，反復(fù)洗滌5次，再之后向微孔反應(yīng)條中加入終止液，最后利用全自動樣本前處理系統(tǒng)檢測儀器進(jìn)行檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

對兩種方法檢驗乙肝e抗原（HbeAg）、乙肝表面抗原（HbsAg）、乙肝e抗體（HbeAb）、乙肝表面抗體（HbsAb）、乙肝核心抗體（HbcAb）水平的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計比較，同時對比兩種檢驗方法HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb的陽性率。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：HbeAg≥0.05 NCU/mL，HbsAg≥10.0 mU/mL，HbeAb≥2.0 NCU/mL，HbsAb≥0.2 ng/mL，HbcAb≥1.5 NCU/mL。

1.4 統(tǒng)計方法

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb水平比較

在HbeAg、HbsAg、HbeAb水平方面，ECLIA檢驗與ELISA檢驗比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HbsAb、HbcAb水平對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、Hbc Ab水平比較（±s）

表1 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、Hbc Ab水平比較（±s）

檢驗方法HbeAg（NCU/mL）HbsAg（mU/mL）HbeAb（NCU/mL）HbsAb（ng/mL）HbcAb（NCU/mL）ECLIA（n=90）ELISA（n=90）t值P值0.10±0.02 0.08±0.02 6.708＜0.001 11.56±1.42 10.29±1.33 6.193＜0.001 2.98±0.34 2.24±0.30 15.483＜0.001 0.31±0.06 0.30±0.05 1.215 0.226 1.68±0.21 1.65±0.20 0.981 0.328

2.2 兩 種 方 法 檢 驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb陽性率比較

ECLIA檢驗與ELISA檢驗的HbeAg、HbsAg、HbeAb陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HbsAb、HbcAb陽性率對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb陽性率比較[n（%）]

3 討論

乙肝是一種傳染性非常強的疾病，隨著病情的不斷加重，會進(jìn)展為肝硬化、肝癌等嚴(yán)重病變，對患者身心健康及生活質(zhì)量有著極大的影響，所以，盡早診斷對臨床治療方案的制定有著非常積極的作用[5-6]。ECLIA檢驗就是利用全自動化學(xué)發(fā)光儀及相應(yīng)配套試劑進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測，極大的實現(xiàn)了檢驗工作的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化，且檢驗靈敏度較高，在一定程度上減少了操作誤差[7-8]；同時還可以進(jìn)行定性、定量分析，檢驗精準(zhǔn)度比較高，極大的減少了假陰性情況的發(fā)生，提高了檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性[9-11]。ELISA檢驗具有價格便宜、操作簡單等優(yōu)勢，在大批量樣本檢驗中得到了廣泛應(yīng)用，但定量分析不足，只能予以定性分析，加之不同廠家生產(chǎn)的抗體、抗原試劑差異比較大，操作時非常容易受到有關(guān)因素的影響，使得感染情況比較多，易出現(xiàn)假陽性、假陰性等不準(zhǔn)確的結(jié)果，在一定程度上降低了檢驗靈敏度，無法動態(tài)診斷乙肝病毒感染情況[12-14]。該研究結(jié)果顯示：在HbeAg、HbsAg、HbeAb水平方面，ECLIA檢驗與ELISA檢驗比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），HbsAb、HbcAb水平對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。此結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)的研究報道十分相似，由此可以說明，ECLIA檢驗具有定性、定量分析的雙重優(yōu)勢，是現(xiàn)今臨床診斷工作中比較先進(jìn)的一種檢驗方法，臨床應(yīng)用價值非常高。除此之外，該研究表明：ECLIA檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb的陽性率分別為98.46%、96.92%、92.31%，顯著高于ELISA檢驗的87.69%、84.62%、78.46%（P＜0.05）。此結(jié)果與李吉明等[15]文獻(xiàn)報道十分接近，數(shù)據(jù)如下：ECLIA檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb的陽性率分別為95.92%、97.96%、97.96%，ELISA檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb的陽性率分別為83.67%、85.71%、81.63%，ECLIA檢驗顯著高于ELISA檢驗（P＜0.05）。由此可以看出，在乙肝病毒血清學(xué)檢驗中，ECLIA的檢驗準(zhǔn)確性更高。究其原因可能為[16-18]：在ECLIA檢驗中，不僅可以提高陽性檢出率，還可以避免游離抗體對陽性檢出率的影響。當(dāng)然，該研究尚具有一定的局限性，比如，研究對象選取數(shù)量比較少、研究時段選取范圍比較短等，使得研究結(jié)果無法完全闡述ECLIA與ELISA檢驗的臨床價值，所以，在以后臨床研究中，應(yīng)適當(dāng)增加研究對象數(shù)量，擴大研究時段范圍，以此為乙肝病毒血清學(xué)檢驗提供參考依據(jù)，提高ECLIA與ELISA檢驗應(yīng)用的合理性與科學(xué)性。

綜上所述，ECLIA與ELISA在乙肝病毒血清學(xué)檢驗中的應(yīng)用效果相當(dāng)，均具有較高的診斷準(zhǔn)確性，可根據(jù)患者的實際情況，選擇恰當(dāng)?shù)臋z驗方法，以此為患者的臨床治療提供參考依據(jù)。