乙肝病毒血清學檢驗采用化學發光法與酶聯免疫法的比較

于萍

煙臺市芝罘區疾病預防控制中心，山東煙臺 264001

乙肝是臨床中比較常見的一種感染性疾病，主要以腹脹、惡心、乏力、厭食、肝區疼痛等癥狀為臨床表現，潛伏期時間約為1～6個月[1]。相關文獻報道顯示，乙肝病毒感染和很多疾病的發生與發展都有著十分緊密的聯系，且隨著病情的不斷發展，使得部分患者會出現肝功能異常、脾大等癥狀，對患者生命安全有著極大的威脅[2]。乙肝病毒傳染性非常強，加之傳播途徑比較多，使得盡早診斷對疾病治療及預后有著十分積極的意義。現階段，化學發光法（ECLIA）與酶聯免疫法（ELISA）是進行乙肝病毒血清學檢驗的常用方法，前者作為一種新型免疫檢驗方法，能夠實現定量分析，準確性非常高[3]；后者作為一種常用檢驗方法，具有適眾廣、成本低等特點，在基層醫療單位中得到了廣泛應用，但定量分析不足，尤其是血清標本濃度過大時，非常容易出現假陰性情況[4]。基于此，該文現選取2020年1月—2021年1月在該院進行血清學檢驗的疑似乙肝患者90例進行研究，比較分析ECLIA與ELISA檢驗的臨床價值?，F報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

研究對象選取在該院進行血清學檢驗確診的乙肝患者90例。納入標準：①意識清晰，可正常溝通；②伴有與乙肝患者接觸史；③簽訂知情同意書，經倫理委員會批準。排除標準：①伴有精神異常或者認知障礙；②合并惡性腫瘤；③伴有其他類型病毒感染；④合并嚴重心、腎功能異常；⑤伴有其他類型肝炎或者肝??；⑥妊娠期或者哺乳期女性；⑦中途退出研究，臨床資料不完整。90例患者年齡最小為22歲，最大為70歲，平均為（45.28±5.76）歲；女性42例，男性48例；初中及以下10例，高中及中專42例，大專及以上38例。

1.2 方法

采集患者清晨空腹靜脈血5 mL，采用離心處理，轉速3 000 r/min，時間10 min，分離上層清液，儲存于零下20℃待測。

1.2.1 ECLIA檢驗將待測血清樣本放入含有乙肝病毒核心抗原的聚苯乙烯試管中，利用100μl過氧化酶予以標記，置于37℃環境中，時間為2 h，之后利用磷酸緩沖鹽溶液予以沖洗，3 min/次，沖洗3次，再之后加入100μl過氧化氫+100μl魯米洛，最后利用全自動化學發光儀進行檢測。

1.2.2 ELISA檢驗將ELISA試劑與微孔反應條置于室溫環境中，時間為30 min，之后將待測血清樣本加入微孔反應條中，利用封片予以封鎖，置于37℃水浴箱中，時間為60 min，然后取出，將微孔反應條上液體除去，反復洗滌5次，再之后向微孔反應條中加入試劑，利用封片進行封鎖，置于37℃水浴箱中，時間為30 min，然后取出，將微孔反應條上液體除去，反復洗滌5次，再之后向微孔反應條中加入終止液，最后利用全自動樣本前處理系統檢測儀器進行檢測。

1.3 觀察指標

對兩種方法檢驗乙肝e抗原（HbeAg）、乙肝表面抗原（HbsAg）、乙肝e抗體（HbeAb）、乙肝表面抗體（HbsAb）、乙肝核心抗體（HbcAb）水平的結果進行統計比較，同時對比兩種檢驗方法HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb的陽性率。陽性判定標準：HbeAg≥0.05 NCU/mL，HbsAg≥10.0 mU/mL，HbeAb≥2.0 NCU/mL，HbsAb≥0.2 ng/mL，HbcAb≥1.5 NCU/mL。

1.4 統計方法

2 結果

2.1 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb水平比較

在HbeAg、HbsAg、HbeAb水平方面，ECLIA檢驗與ELISA檢驗比較，差異有統計學意義（P＜0.05），HbsAb、HbcAb水平對比，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、Hbc Ab水平比較（±s）

表1 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、Hbc Ab水平比較（±s）

檢驗方法HbeAg（NCU/mL）HbsAg（mU/mL）HbeAb（NCU/mL）HbsAb（ng/mL）HbcAb（NCU/mL）ECLIA（n=90）ELISA（n=90）t值P值0.10±0.02 0.08±0.02 6.708＜0.001 11.56±1.42 10.29±1.33 6.193＜0.001 2.98±0.34 2.24±0.30 15.483＜0.001 0.31±0.06 0.30±0.05 1.215 0.226 1.68±0.21 1.65±0.20 0.981 0.328

2.2 兩 種 方 法 檢 驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb陽性率比較

ECLIA檢驗與ELISA檢驗的HbeAg、HbsAg、HbeAb陽性率比較，差異有統計學意義（P＜0.05），HbsAb、HbcAb陽性率對比，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 兩種方法檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb、HbsAb、HbcAb陽性率比較[n（%）]

3 討論

乙肝是一種傳染性非常強的疾病，隨著病情的不斷加重，會進展為肝硬化、肝癌等嚴重病變，對患者身心健康及生活質量有著極大的影響，所以，盡早診斷對臨床治療方案的制定有著非常積極的作用[5-6]。ECLIA檢驗就是利用全自動化學發光儀及相應配套試劑進行相關指標檢測，極大的實現了檢驗工作的標準化、自動化，且檢驗靈敏度較高，在一定程度上減少了操作誤差[7-8]；同時還可以進行定性、定量分析，檢驗精準度比較高，極大的減少了假陰性情況的發生，提高了檢驗結果準確性[9-11]。ELISA檢驗具有價格便宜、操作簡單等優勢，在大批量樣本檢驗中得到了廣泛應用，但定量分析不足，只能予以定性分析，加之不同廠家生產的抗體、抗原試劑差異比較大，操作時非常容易受到有關因素的影響，使得感染情況比較多，易出現假陽性、假陰性等不準確的結果，在一定程度上降低了檢驗靈敏度，無法動態診斷乙肝病毒感染情況[12-14]。該研究結果顯示：在HbeAg、HbsAg、HbeAb水平方面，ECLIA檢驗與ELISA檢驗比較，差異有統計學意義（P＜0.05），HbsAb、HbcAb水平對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。此結果與相關文獻的研究報道十分相似，由此可以說明，ECLIA檢驗具有定性、定量分析的雙重優勢，是現今臨床診斷工作中比較先進的一種檢驗方法，臨床應用價值非常高。除此之外，該研究表明：ECLIA檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb的陽性率分別為98.46%、96.92%、92.31%，顯著高于ELISA檢驗的87.69%、84.62%、78.46%（P＜0.05）。此結果與李吉明等[15]文獻報道十分接近，數據如下：ECLIA檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb的陽性率分別為95.92%、97.96%、97.96%，ELISA檢驗HbeAg、HbsAg、HbeAb的陽性率分別為83.67%、85.71%、81.63%，ECLIA檢驗顯著高于ELISA檢驗（P＜0.05）。由此可以看出，在乙肝病毒血清學檢驗中，ECLIA的檢驗準確性更高。究其原因可能為[16-18]：在ECLIA檢驗中，不僅可以提高陽性檢出率，還可以避免游離抗體對陽性檢出率的影響。當然，該研究尚具有一定的局限性，比如，研究對象選取數量比較少、研究時段選取范圍比較短等，使得研究結果無法完全闡述ECLIA與ELISA檢驗的臨床價值，所以，在以后臨床研究中，應適當增加研究對象數量，擴大研究時段范圍，以此為乙肝病毒血清學檢驗提供參考依據，提高ECLIA與ELISA檢驗應用的合理性與科學性。

綜上所述，ECLIA與ELISA在乙肝病毒血清學檢驗中的應用效果相當，均具有較高的診斷準確性，可根據患者的實際情況，選擇恰當的檢驗方法，以此為患者的臨床治療提供參考依據。