新生兒化膿性腦膜炎神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥與血清 NSE、S-100B、NT-proCNP水平的關(guān)系研究

侯秋英 應(yīng)勤來 張梅娟 滕懿群

新生兒化膿性腦膜炎指出生后28 d內(nèi)細(xì)菌感染引起的腦膜炎癥，由于新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟，血腦屏障通透性大，細(xì)菌容易透過血腦屏障進(jìn)入顱內(nèi)，因此，發(fā)病率較高[1]。不同國家和地區(qū)新生兒化膿性腦膜炎的病原菌分布和種類有明顯差異[2-3]。本病治療時(shí)間長，大多數(shù)病原菌難以清除，約15%～18%的患兒可發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，其中約10%～20%可出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥（包括行為異常、學(xué)習(xí)困難，嚴(yán)重者可出現(xiàn)聽力喪失、智力低下、癲癇等）[4]。因此，早期診斷和治療新生兒化膿性腦膜炎對改善患兒預(yù)后具有重要意義，但目前尚缺乏有效的方法。血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、S100 鈣結(jié)合蛋白 B（S100 calcium binding protein B，S-100B）、C 型利鈉肽（C-type natriuretic peptide，NT-proCNP）是神經(jīng)膠質(zhì)和神經(jīng)元損傷的外周血標(biāo)志物[5]。國內(nèi)尚未見3者聯(lián)合應(yīng)用預(yù)測新生兒化膿性腦膜炎神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥發(fā)生的報(bào)道。本研究通過探討新生兒化膿性腦膜炎神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥與血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平的關(guān)系，為早期識(shí)別和治療神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥提供依據(jù)。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2017年1月至2019年12月嘉興市第二醫(yī)院和浙江省臺(tái)州醫(yī)院NICU收治的新生兒化膿性腦膜炎患兒168例（其中嘉興市第二醫(yī)院96例、浙江省臺(tái)州醫(yī)院72例）。新生兒化膿性腦膜炎參照《實(shí)用新生兒學(xué)》的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，即具備感染和化腦的臨床表現(xiàn)，腦脊液常規(guī)、生化檢查結(jié)果符合化腦的診斷標(biāo)準(zhǔn)或腦脊液中培養(yǎng)出細(xì)菌[6]。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)的出生后28 d內(nèi)新生兒（足月兒、校正胎齡早產(chǎn)兒）。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有新生兒缺氧缺血性腦病、顱內(nèi)出血、腦脊膜膨出、膽紅素腦病、凝血功能異常或遺傳代謝性疾病者。根據(jù)有無神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，將患兒分為有并發(fā)癥組29例和無并發(fā)癥組139例。有并發(fā)癥組男15例，女14例；胎齡36+6（34+2，39+6）周；出生體重3 030（2 580，3 920）g；神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥：聽力損害12例，腦積水6例，硬膜下積液4例，顱內(nèi)出血和腦室管膜炎各2例，腦軟化和腦梗死各1例。無并發(fā)癥組男71例，女68例；胎齡37+6（34+6，39+4）周；出生體重 3 280（2 660，3 980）g。兩組患兒性別、胎齡、出生體重等比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。本研究經(jīng)嘉興市第二醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過，所有患兒家屬均簽署知情同意書。

1.2 血清 NSE、S-100B、NT-proCNP水平檢測 采用ELISA法。所有患兒入院時(shí)抽取靜脈血3 ml，置試管常溫下3 000 r/min離心20 min，取上清液-70℃凍存待測。采用美國雅培LB960化學(xué)發(fā)光分析儀檢測血清NSE水平，采用美國Cygnus公司S-100A12試劑盒檢測血清S-100B水平，采用BIOMEDICA公司48T試劑盒檢測血清NT-proCNP水平。上述操作均嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)說明書進(jìn)行。

1.3 腦脊液細(xì)菌培養(yǎng) 經(jīng)家屬知情同意后行腰椎穿刺術(shù)，無菌試管留取1.5 ml腦脊液，均送實(shí)驗(yàn)室作細(xì)菌培養(yǎng)。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平比較 有并發(fā)癥組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平均明顯高于無并發(fā)癥組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 兩組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平比較

2.2 血清NSE、S-100B、NT-proCNP預(yù)測新生兒化膿性腦膜炎發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥的效能 ROC曲線顯示，血清NSE的AUC為0.715，靈敏度為0.817，特異度為0.746；S-100B 的AUC 為0.693，靈敏度為 0.654，特異度為0.887；NT-proCNP的AUC為0.796，靈敏度為0.827，特異度為0.916。當(dāng)NSE、S-100B及NT-proCNP 3者聯(lián)合評(píng)估時(shí)，AUC為0.896，靈敏度為0.870，特異度為0.903。3者聯(lián)合檢測較血清NSE、S-100B、NT-proCNP單獨(dú)檢測更有意義（均P＜0.01），見圖1-2。

圖1 血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、S100鈣結(jié)合蛋白B（S-100B）、C型利鈉肽（NT-proCNP）預(yù)測新生兒化膿性腦膜炎患兒發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥的ROC曲線

圖2 血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、S-100鈣結(jié)合蛋白B（S-100B）、C型利鈉肽（NT-proCNP）3者聯(lián)合預(yù)測新生兒化膿性腦膜炎發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥的ROC曲線

2.3 新生兒化膿性腦膜炎患兒腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)陽性病原菌分布 168例患兒腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)陽性39例（23.21%），其中革蘭陽性菌占53.85%（21/39），以B族溶血鏈球菌最多；革蘭陰性菌占46.15%（18/39），以大腸埃希菌最多，見表2。

表2 39例新生兒化膿性腦膜炎患兒腦脊液培養(yǎng)陽性病原菌分布

3 討論

新生兒化膿性腦膜炎是新生兒時(shí)期常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，多為血流感染，也有鄰近組織感染細(xì)菌直接侵入腦膜引起。目前，新生兒化膿性腦膜炎確診的重要方法是腦脊液常規(guī)生化檢查，金標(biāo)準(zhǔn)仍是腦脊液的病原學(xué)檢查，但存在常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)陽性率低、耗時(shí)長等問題[7]。在積極治療的同時(shí)，行腦脊液聚合酶鏈反應(yīng)及病原菌DNA檢測可以提高病原陽性檢出率[8]。新生兒化膿性腦膜炎由于臨床表現(xiàn)缺乏特異性，早期診斷困難，常并發(fā)聽力損害、腦積水、硬膜下積液等并發(fā)癥，其致病菌以B族溶血鏈球菌、大腸埃希菌為主[6]，與本研究相一致。

新生兒化膿性腦膜炎早期表現(xiàn)不典型，顱內(nèi)高壓癥狀不明顯，又缺乏神經(jīng)系統(tǒng)陽性體征，容易延誤診治，病情嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致死亡，即使幸存也可能會(huì)有后遺癥，嚴(yán)重影響兒童的生活和健康[9]。隨著醫(yī)學(xué)影像學(xué)技術(shù)的提高，通過CT和MRI檢查可發(fā)現(xiàn)并發(fā)癥[10]。Zhang等[11]報(bào)道MRI增強(qiáng)FLAIR序列掃描對新生兒化膿性腦膜炎的早期診斷率較高，但有放射性輻射、對比劑及鎮(zhèn)靜劑使用等局限性。因此，積極尋找有意義的血清生物學(xué)標(biāo)志物顯得尤為重要。

NSE是胞質(zhì)內(nèi)糖酵解酶烯醇化酶的神經(jīng)元型，對神經(jīng)元和神經(jīng)外胚層細(xì)胞有特異性[12]。S-100B是螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)家族的一種酸性鈣結(jié)合蛋白[13]，主要存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及特定的神經(jīng)元亞群中，是腦損傷的常用非特異性標(biāo)志物[14]。已有報(bào)道證實(shí)，急性細(xì)菌性腦膜炎患者腦代謝受損程度與NSE水平有關(guān)，其水平持續(xù)升高，表明腦組織持續(xù)受損惡化[15]。在結(jié)核性腦膜炎患兒，S-100B和NSE在第1周的初始濃度和最高濃度與不良預(yù)后相關(guān)，早期檢測對其診斷具有重要價(jià)值[16-17]。NT-proCNP作為利鈉肽的活性形式之一，主要由血管內(nèi)皮產(chǎn)生，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟中有表達(dá)[18]。NT-proCNP與炎癥性疾病有關(guān)，是膿毒癥的潛在標(biāo)志物，當(dāng)并發(fā)顱內(nèi)感染和中毒性腦病時(shí)其明顯升高；而且在膿毒癥早期，血漿NT-proCNP的高峰濃度可能有助于預(yù)測神經(jīng)系統(tǒng)陽性癥狀及神經(jīng)功能障礙的發(fā)生[5]。本研究發(fā)現(xiàn)有并發(fā)癥組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平均高于無并發(fā)癥組，與上述研究結(jié)果相一致，且3者聯(lián)合檢測更有意義。

綜上所述，血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平與新生兒化膿性腦膜炎的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥發(fā)生有關(guān)。在積極治療新生兒化膿性腦膜炎的同時(shí)，建議及時(shí)檢測血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平，有助于早期識(shí)別發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥的可能，從而改善預(yù)后。