固相萃取/高效液相色譜法水中萘酚的測(cè)定研究

王巧利，岳云龍，肖 紅，劉秀平

(1.河南省許昌環(huán)境監(jiān)測(cè)中心，河南 許昌 461099；2.河南潔宇檢測(cè)技術(shù)有限公司，河南 許昌 461000)

1 引言

萘酚屬于等多環(huán)芳烴類物質(zhì)，有1-萘酚和2-萘酚兩種同分異構(gòu)體，是醫(yī)藥、農(nóng)藥、燃料、化妝品生產(chǎn)合成等行業(yè)的重要中間體，有毒，對(duì)皮膚、黏膜由強(qiáng)烈的刺激作用，易經(jīng)皮膚吸收[1]。由于萘酚的化學(xué)性質(zhì)與萘酚相似，2019年環(huán)境行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[2]發(fā)布以前，萘酚都?xì)w于揮發(fā)酚一類，測(cè)定方法是揮發(fā)酚的方法。萘酚的測(cè)定方法主要有紫外光譜法[3]、熒光光譜法[4～7]、高效液相色譜法、高效液相色譜質(zhì)譜法[8]、電化學(xué)分析法和聯(lián)用技術(shù)[9]，本文采取固相萃取前處理方法，利用高效液相色譜儀分離了2-萘酚和1-萘酚，并取得了很好的效果。

2 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

2.1 儀器

安捷倫1260液相色譜儀，具有四元梯度泵和熒光檢測(cè)器(FLD)；液相色譜柱XDB-C18250 mm×4.6 mm×5 μm；GC-24型氮吹儀，北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司，Sepaths◎UP系列全自動(dòng)固相萃取儀，萊伯泰科中國(guó)有限公司；超聲波清洗機(jī)，鄭州聲源儀器有限公司；TD5A型離心機(jī)，常州市萬(wàn)豐儀器制造有限公司，渦旋混勻器SK-1，上海康華生化儀器制造廠

2.2 試劑

甲醇、乙腈均為液相色譜純，實(shí)驗(yàn)用水為超純水，實(shí)驗(yàn)用試劑及純水使用前均用0.22 μm濾膜過(guò)濾除泡。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

2-萘酚購(gòu)自北京振翔科技有限公司/24249；1-萘酚購(gòu)自Dr.EhrenstorferGmbh/C15430500。

分別稱取2-萘酚0.1003 g和1-萘酚0.1001 g于燒杯中，加入100 mg抗壞血酸，并用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL棕色容量瓶中，甲醇稀釋并定容，混勻作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1000 mg/L；實(shí)驗(yàn)室過(guò)程中用逐級(jí)稀釋法配制成標(biāo)準(zhǔn)中間液10.0 mg/L，標(biāo)準(zhǔn)使用液1.0 mg/L，再用逐級(jí)稀釋法配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。

3 結(jié)果與討論

3.1 液相色譜條件

柱溫35 ℃，流動(dòng)相乙腈：甲醇溶液(W=0.2%)=47∶53(體積比)，柱流速1.0 mL/min，熒光檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)228 nm，熒光檢測(cè)器發(fā)射波長(zhǎng)425 nm，進(jìn)樣量10 μL。

3.2 樣品前處理

渾濁水樣用渦旋混合器混勻，超聲3 min，離心機(jī)4000 r/min離心3 min，取上層清液通過(guò)自動(dòng)固相萃取儀。較清潔水樣直接通過(guò)自動(dòng)固相萃取儀。

固相萃取條件：甲醇和水依次通過(guò)C18固相萃取膜，進(jìn)行膜活化，(1+1)甲醇和水為淋洗液，最后用甲醇洗脫，收集于固相萃取瓶中，氮吹至近干，定容待測(cè)。離心殘?jiān)? mL甲醇超聲提取，0.22 μm濾膜過(guò)濾，氮吹，定容待測(cè)。

3.3 固相萃取條件的選擇

體積為1 L的樣品在相同萃取試劑、萃取程序條件下，分別用填料均為C18的萃取膜和萃取小柱進(jìn)行萃取，結(jié)果顯示膜萃取的樣品，用時(shí)短，試劑用量少，故在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用膜萃取法萃取樣品。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用逐級(jí)稀釋的方法將2-萘酚標(biāo)準(zhǔn)溶液和1-萘酚標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成濃度為2.0 μg/L、10.0 μg/L、100.0 μg/L、250.0 μg/L、500.0 μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣10 μL，得到其色譜圖，詳見(jiàn)圖1。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為橫坐標(biāo)，以最小二乘法繪制校準(zhǔn)曲線。

圖1 2-萘酚和1-萘酚色譜

3.5 線性、相關(guān)性和檢出限

目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)序列濃度通過(guò)高效液相色譜儀分離得到不同濃度的響應(yīng)值，通過(guò)線性方程擬合得到其標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)。并以低濃度樣品作為試樣，重復(fù)測(cè)定7次，根據(jù)技術(shù)導(dǎo)則[10]中推薦方法計(jì)算方法的檢出限。具體結(jié)果詳見(jiàn)表1。

表1 2-萘酚和1-萘酚的線性、相關(guān)系數(shù)及檢出限

結(jié)果表明，2-萘酚和1-萘酚在2.0～500 μg/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均達(dá)到0.9995以上，兩種化合物的檢出限均為1.2 μg/L。

3.6 方法的精密度和加標(biāo)回收

對(duì)濃度分別為2.0、25.0和200 μg/L，體積為1 L的試樣進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，每份樣品測(cè)定7次，測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表2。

表2 2-萘酚和1-萘酚的加標(biāo)、平行分析結(jié)果

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，在相應(yīng)的線性范圍內(nèi)，此方法對(duì)低、中、高濃度的樣品均有良好的精密度和較高的準(zhǔn)確性。

4 結(jié)論

本文中2-萘酚和1-萘酚在2～500 μg/L范圍內(nèi)具有很好的線性，低、中、高濃度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.3、3.7、6.7和2.3、4.2、7.7，回收率范圍分別為：94.3%～113%和91.7%～115%。此方法具有簡(jiǎn)單、快捷、精密性好、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)，且采用全自動(dòng)固相萃取-膜萃取的方法進(jìn)行前處理，既節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，也減少了有機(jī)試劑的使用，且保護(hù)了實(shí)驗(yàn)室人員的身體健康和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。