3 種不同的免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的可靠性

陳林利，盧林科，覃濤，宋芳

貴州航天醫(yī)院檢驗(yàn)科 （貴州遵義 563000）

人類免疫缺陷病毒是造成人類免疫系統(tǒng)缺陷的一種逆轉(zhuǎn)錄病毒。獲得性免疫缺陷綜合征（即艾滋病）是感染人類免疫缺陷病毒而導(dǎo)致的一種病癥，嚴(yán)重威脅人類的生命健康。近年來(lái)，隨著社會(huì)的發(fā)展及醫(yī)療科技的進(jìn)步，醫(yī)療部門(mén)逐步加大了對(duì)艾滋病的診察力度，一定程度上減緩了艾滋病人數(shù)的增長(zhǎng)速度，但患病人數(shù)總體仍呈不斷上升的趨勢(shì)[1]。人類免疫缺陷病毒能夠破壞人體的免疫功能，降低其抗病能力，致使機(jī)體感染并引起多種并發(fā)癥，且病死率較高，目前，臨床暫未發(fā)現(xiàn)根治艾滋病的藥物或方法，因此，及時(shí)有效地防控顯得尤為重要[2]。臨床檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的方式較多，如雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、金免疫層析法及化學(xué)發(fā)光法等。基于此，本研究探討3種不同的免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的可靠性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年10月至2019年10月我院檢驗(yàn)科的50份血清樣本。

1.2 方法

所有樣本均使用雙抗原夾心ELISA、金免疫層析法及化學(xué)發(fā)光法3種免疫檢驗(yàn)方法予以檢測(cè)。

雙抗原夾心ELISA 法：檢測(cè)儀器為瑞士HAMILTON 公司生產(chǎn)的FAME24/20全自動(dòng)酶免分析儀，檢測(cè)試劑為北京萬(wàn)泰生物科技有限公司提供，檢測(cè)操作嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)要求執(zhí)行，檢測(cè)結(jié)果≥Cut off 值判斷為陽(yáng)性，檢測(cè)結(jié)果

金免疫層析法：將免疫金標(biāo)試紙的測(cè)試端浸入待檢樣本中，10 s 后，觀察試紙的變化，試紙呈現(xiàn)兩條紅線，表明結(jié)果為陽(yáng)性，試紙呈現(xiàn)1條紅線，表明結(jié)果為陰性，且陰性樣本至少應(yīng)觀察0.5 h，若未出現(xiàn)異常，方可確定結(jié)果。

化學(xué)發(fā)光法：使用希森美康株式會(huì)社生產(chǎn)的試劑盒（200測(cè)試/盒）進(jìn)行檢測(cè)，并嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)開(kāi)展試驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果>1 S/CO 即判定為陽(yáng)性，≤1 S/CO 即判定為陰性[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

以免疫印跡法的檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，比較3種不同的免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

雙抗原夾心ELISA 檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均高于金免疫層析法與化學(xué)發(fā)光法，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1～4。

表1 雙抗原夾心ELISA 的檢測(cè)結(jié)果（份）

表2 金免疫層析法的檢測(cè)結(jié)果（份）

表4 3種方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度比較（%）

3 討論

人類免疫缺陷病毒是引起艾滋病的RNA 病毒，其主要侵犯人體的CD4T 細(xì)胞、CD4單核細(xì)胞及B 淋巴細(xì)胞。艾滋病是嚴(yán)重威脅人類健康的一種疾病，且暫無(wú)有效的治療措施，病死率較高[4]。人類免疫缺陷病毒會(huì)侵害人體的免疫系統(tǒng)，致使機(jī)體出現(xiàn)嚴(yán)重感染甚至腫瘤[5]。艾滋病可經(jīng)血液、性生活及母嬰傳播，早診斷、早治療對(duì)預(yù)防該疾病的傳播具有十分重要的作用，因此，尋求一種準(zhǔn)確度高的檢測(cè)方法尤為重要[5]。

臨床診斷艾滋病的主要手段包括雙抗原夾心ELISA、金免疫層析法及化學(xué)發(fā)光法等，各種檢測(cè)方式均各有優(yōu)缺點(diǎn)。ELISA 試劑及免疫金標(biāo)試紙分別是通過(guò)試劑反應(yīng)及試紙顏色變化來(lái)判定檢測(cè)結(jié)果，試驗(yàn)過(guò)程中，操作人員、空氣及操作儀器等均需滿足檢測(cè)的要求，以避免外界因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響[6]。本研究結(jié)果顯示，雙抗原夾心ELISA 檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均高于金免疫層析法與化學(xué)發(fā)光法，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。分析原因可能為，金免疫層析法的優(yōu)勢(shì)在于快速、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可單份檢測(cè)，且穩(wěn)定性較高、無(wú)需借助儀器，5～30 min 即可得到診斷結(jié)果，但該方法的靈敏度欠佳，且難以實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)；化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的主要依據(jù)是檢測(cè)體系中待測(cè)物質(zhì)濃度和化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在一定條件下所呈現(xiàn)的定量關(guān)系，其具有快速、自動(dòng)化程度高、操作簡(jiǎn)便、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，能夠檢出較低濃度的物質(zhì)，因此，在疾病的早期診斷中具有重要的作用，但存在選擇性差及化學(xué)發(fā)光發(fā)射強(qiáng)度受環(huán)境影響較大的缺點(diǎn)，在檢測(cè)中需嚴(yán)格控制外界因素[7]；雙抗原夾心ELISA 的反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似，通過(guò)使用特異性抗原制備酶結(jié)合物并用于樣本檢測(cè)，無(wú)需進(jìn)行樣本稀釋便可直接測(cè)定，靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均較高[8]，且雙抗原夾心ELISA 操作簡(jiǎn)便，利于檢測(cè)大批量標(biāo)本或適用于全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)中，有助于進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化及規(guī)范化[9]。

綜上所述，與金免疫層析法及化學(xué)發(fā)光法比較，雙抗原夾心ELISA 檢測(cè)人類免疫缺陷病毒的可靠性較高。