外周血中NF-κB和PTX3與急性冠脈綜合征并發室性心律失常的相關性

景昊然，賈 棟，沈景霞，曹 陽

(哈爾濱醫科大學附屬第一醫院 1.心內科七病房;2.心內科導管室;3.心臟超聲室;4.心內科一病房，黑龍江 哈爾濱150001)

有研究[1]發現，作為炎癥反應調節因子之一的核因子-κB(NF-κB)在心血管疾病的發病機制中具有重要作用。此外，吳塵樂[2]研究顯示，血清五聚素3(PTX3)與動脈粥樣硬化斑塊不穩定相關，可作為全身炎癥反應的標記物之一。本研究通過觀察外周血NF-κB、PTX3在急性冠脈綜合征(ACS)并發室性心律失常患者發病過程中的變化，判斷其與該病的關系，為早期診斷治療提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年3月至2020年3月哈爾濱醫科大學附屬第一醫院收治的ACS患者136例，根據心電監護結果將其分為單純ACS組(對照組，92例)和ACS并發室性心律失常組(研究組，44例)。研究組納入標準：(1)年齡48-81歲；(2)均符合美國心臟病學會/美國心臟學會(ACC/AHA)指南[3-4]中關于ACS的相關診斷標準；(3)經臨床表現、心電圖、冠狀動脈造影及相關實驗室檢查確診為ACS并發室性心律失常，室性早搏總數≥1000次/24 h；(4)入組前2周內未服用抗心律失常藥物；(5)發病距入院時間均≤24 h；(6)患者及家屬同意參與本研究，并簽署知情同意書。排除標準：(1)具有室性心律失常病史者；(2)診斷為由心肌炎、心臟瓣膜病、心衰等心血管疾病引起的胸痛者；(3)合并肝、腎、肺、甲狀腺功能異常者；(4)患有惡性腫瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病、神經系統疾病者；(5)短期內服用過抗炎藥、激素或免疫抑制劑者；(6)精神異常者；(7)主動放棄治療或轉院者。同期以性別、年齡等為匹配條件招募30例健康志愿者作為健康組，其中男17例，女13例；年齡50-75歲，平均(63.36±10.37)歲。本研究經醫院倫理委員會審核批準。

1.2 方法

1.2.1治療方法 參照美國心臟病學會/美國心臟學會(ACC/AHA)指南給予患者心電監護、止痛、鎮靜、吸氧等基礎治療，符合溶栓條件患者給予溶栓治療、靜脈滴注硝酸酯類藥物、抗凝劑、抗血小板聚集制劑、鈣通道阻滯劑、血管緊張素轉化酶抑制劑治療等，并給予調脂、穩定斑塊、穩定心功能等治療，根據患者具體臨床特點，行冠脈造影及血運重建治療。

1.2.2外周血NF-κB、PTX3檢測 抽取健康志愿者及患者入院后2 h的肘靜脈血5 ml，經枸櫞酸鈉抗凝處理，以1:6加入紅細胞裂解液，室溫靜置25 min，3 000 r/min離心5 min，棄上清(收集用于其他指標檢測)，PBS溶液沖洗，抽提出核蛋白，使用酶聯免疫吸附測定法(ELISA)測定外周血NF-κB活化量。使用ELISA法檢測血清PTX3水平。研究所用試劑盒均購于華美生物工程有限公司，所有操作均嚴格按照試劑盒使用說明書進行。

1.2.3收集可能影響ACS患者并發室性心律失常的相關資料 ①一般臨床資料：性別、年齡、體質指數(BMI)、既往病史(高血壓、高血脂、糖尿病、卒中史)、個人史(吸煙史、飲酒史)、疾病類型、Killip分級、Grace評分、ST段抬高、心率(HR)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、左心房內徑(LA)、左室階段性運動異常、冠脈病變數目、治療方案[經皮冠狀動脈介入治療(PCI)、冠狀動脈旁路移植術(CABG)]。②入院當天實驗室相關指標檢查結果：白細胞計數(WBC)、谷氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、腦利鈉肽前體(pro-BNP)、肌酸激酶(CK)、心肌肌鈣蛋白(cTnI)、C反應蛋白(CRP)。

2 結果

2.1 3組外周血NF-κB、PTX3水平比較與健康組比較，研究組、對照組NF-κB、PTX3水平均更高(P<0.05)；與對照組比較，研究組NF-κB、PTX3水平均更高(P<0.05),見表1。

表1 3組外周血NF-κB、PTX3水平比較

2.2 影響ACS并發室性心律失常的單因素分析研究組LA、左室階段性運動異常占比、pro-BNP、CK、cTnI、CRP均大于對照組(P<0.05)；兩組性別、年齡、BMI、既往病史、個人史、疾病類型、Killip分級、入院時Grace評分、ST段抬高、HR、SBP、DBP、冠脈病變數目、治療方案、WBC、ALT、AST、TG、TC、HDL-C、LDL-C等比較，差異均無統計學意義(P>0.05),見表2。

表2 影響ACS并發室性心律失常的單因素分析

2.3 影響ACS并發室性心律失常的Logistis多元回歸分析將ACS并發室性心律失常作為因變量，將單因素分析有差異指標NF-κB、PTX3、LA、左室階段性運動異常、pro-BNP、CK、cTnI、CRP作為自變量，將發生ACS并發室性心律失常記為1，否則記為0。經Logistic回歸分析，NF-κB、PTX3、LA、cTnI均是影響ACS并發室性心律失常的相關因素(P<0.05),見表3。

表3 影響ACS并發室性心律失常的多因素Logistic回歸分析

2.4 外周血NF-κB、PTX3水平與影響ACS并發室性心律失常的相關因素的關系NF-κB與PTX3、LA、cTnI均呈正相關性(r=0.426、0.431、0.442，P均<0.05)；PTX3與LA、cTnI均呈正相關性(r=0.485、0.477，P均<0.05)。見表4。

表4 外周血NF-κB、PTX3水平與影響ACS并發室性心律失常的相關因素的關系

2.5 外周血NF-κB、PTX3水平對ACS并發室性心律失常的診斷價值外周血NF-κB、PTX3診斷ACS并發室性心律失常的最佳截斷點分別為65.00 pg/mL、1546.56 pg/mL，ROC曲線下面積(AUC)分別為0.820(95%CI：0.745-0.881)、0.826(95%CI：0.752-0.886)，靈敏度分別為81.82%、84.09%，特異度分別為77.17%、75.00%，準確度分別為78.68%、77.94%；二者聯合診斷的AUC為0.848(95%CI：0.776-0.904)，敏感度、特異度和準確度分別為93.18%、73.91%、80.15%。見圖1、表5。

表5 外周血NF-κB、PTX3水平對ACS并發室性心律失常的診斷價值

圖1 血清外周血NF-κB、PTX3診斷ACS并發室性心律失常的ROC曲線

3 討論

ACS發病機制為冠狀動脈粥樣硬化不穩定斑塊破裂或糜爛造成血小板逐漸黏附并集聚于受損處，使冠脈管腔完全或不完全閉塞，導致血流動力學改變，從而誘發心肌急性缺血或壞死[5]。在ACS發病期間可出現不同程度的充血性心力衰竭的癥狀，同時合并產生心律失常，其發生率可達90%，導致患者出現心源性猝死[4]。因此，需對ACS合并室性心律失常患者給予高度關注和重視，盡早發現影響ACS 室性心律失常的相關因素，以給予有效的診斷與治療，從而改善患者預后。

血管損傷和炎癥反應均參與ACS的發生發展，故某些炎癥標記物活性可以反應疾病的嚴重程度。本研究結果顯示，研究組外周血NF-κB、PTX3水平高于健康組和對照組，提示ACS并發室性心律失常患者外周血NF-κB、PTX3水平呈異常高表達，在今后的診斷與治療中需重點關注。NF-κB是一種核轉錄因子，存在于淋巴細胞中，一旦被激活就會誘導細胞黏附分子、趨化因子、組織因子等炎癥免疫基因的轉錄，反之這些產物又會進一步刺激NF-κB表達，共同形成一個復雜的炎癥反應網絡，產生聯級放大作用，加重疾病進展[6-7]。Jin等[8]研究發現，NF-κB1基因rs28362491多態性與ACS的發病風險及嚴重程度具有密切關系。本研究ACS并發室性心律失常患者外周血中NF-κB活性表達水平明顯升高，可能是循環的白細胞與激活的斑塊接觸后被活化，也可能是因為局部NF-κB的激活促使腫瘤壞死因子、白介素等炎癥介質從斑塊中釋放，反過來激活外周血白細胞NF-κB，使其活性表達水平升高。孫策等[9]研究顯示，經解毒活血方治療后，非ST段抬高型ACS患者外周血NF-κB表達均顯著下降，從側面反映出NF-κB參與ACS的發生發展。

PTX3是一種由五個相同的亞單位組成的長五聚體，與CRP同屬五聚蛋白家族，平時以備用形式儲存在中性粒細胞的特殊顆粒中，在炎癥細胞因子刺激下由巨噬細胞、內皮細胞、樹突狀細胞等細胞產生，主要作用于局部的血管炎性反應，可直接反映血管的炎癥狀態[10-11]。Tojo等[12]評估了人死后血漿PTX3作為致命ACS標志物的法醫學效用，結果顯示冠脈血栓組尸體血漿PTX3濃度顯著高于對照組，認為血漿PTX3可能是預測致命ACS發作后立即死亡的有用標志物。本研究ACS并發室性心律失常患者血清PTX3水平明顯升高，可能是因為PTX3主要產生于冠狀動脈粥樣硬化不穩定斑塊的活化過程。一項前瞻性研究[13]表明PTX3可作為入院時診斷ACS的有用指標。

ACS患者并發室性心律失常與多種因素有關。本研究單因素分析發現，研究組與對照組在LA、左室階段性運動異常占比、pro-BNP、CK、cTnI、CRP等方面均存在明顯差異，進一步Logistic回歸分析顯示NF-κB、PTX3、LA、cTnI均是ACS并發室性心律失常的影響因素，且Pearson相關性顯示，外周血NF-κB、PTX3均與LA、cTnI呈正相關，說明二者均參與ACS并發室性心律失常的發病過程。此外，ROC曲線顯示，外周血NF-κB、PTX3聯合檢測對于ACS并發室性心律失常的診斷價值優于二者單獨診斷，再次表明外周血NF-κB、PTX3與ACS并發室性心律失常具有密切關系。NF-κB的激活有可能是冠狀動脈斑塊破裂的啟動過程，作為一種炎癥和免疫穩態的主要調節因子，NF-κB可通過介導泡沫細胞產生、促進血管炎癥反應、促進血管平滑肌細胞的增殖和遷移等多種途徑共同促進ACS并發室性心律失常的發病[14]。炎癥反應刺激內皮細胞分泌PTX3，其可能通過促進細胞凋亡、上調內皮組織因子表達等促使血栓形成，并通過抑制促纖維細胞生長因子使斑塊纖維帽變薄，上述途徑共同作用促進ACS并發室性心律失常形成和發展[15]。

綜上所述，外周血NF-κB、PTX3表達水平在ACS并發室性心律失常患者中呈現異常高表達，二者均是ACS并發室性心律失常的影響因素，聯合診斷顯示出良好價值。