基于實驗室信息系統(tǒng)建立長春地區(qū)血清膽紅素參考區(qū)間*

王藝婷，朱學(xué)彤，邢東洋，徐攀洋，夏 薇，許建成△

1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院檢驗科，吉林長春 130021；2.北華大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林吉林 132013

膽紅素是肝功能檢測的重要指標(biāo)，對消化系統(tǒng)及血液系統(tǒng)疾病的診治具有重要意義。設(shè)置排除標(biāo)準(zhǔn)，通過選擇適宜的研究個體而獲得參考區(qū)間(直接法)是參考區(qū)間建立的常規(guī)方法[1]，但使用直接法建立參考區(qū)間的過程復(fù)雜、耗時費(fèi)力、難以推廣[2]。衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 404.4-2018指出，參考區(qū)間可能由于地域、年齡、性別、生活習(xí)慣等因素導(dǎo)致其適用性受到影響[3]。本研究利用實驗室信息系統(tǒng)(LIS)中存儲的總膽紅素(TBIL)和直接膽紅素(DBIL)檢測數(shù)據(jù)，用統(tǒng)計模型建立參考區(qū)間(間接法)，并與我國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 404.4-2018所建立的參考區(qū)間比較，以期為膽紅素參考區(qū)間的建立提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2019年10月至2020年10月吉林大學(xué)第一醫(yī)院LIS中存儲的體檢中心20～<80歲健康體檢者數(shù)據(jù)，排除異常(脂血、溶血、黃疸)及重復(fù)數(shù)據(jù)后共納入29 864例健康體檢者數(shù)據(jù)，其中男13 710例，女16 154例。

1.2儀器與試劑 使用日立7600-210全自動生化分析儀進(jìn)行檢測，試劑及標(biāo)準(zhǔn)品均購自上海科華生物工程股份有限公司，室內(nèi)質(zhì)控品購自美國伯樂公司。儀器每年由廠家校準(zhǔn)1次，精密度、分析測量范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率等性能均符合ISO15189要求。

1.3方法 TBIL和DBIL的檢測方法為2，4-二氯苯胺重氮法。研究對象采血前3 d飲食及行動正常，空腹8～12 h后于次日上午7：30-9：30采集肘前靜脈血4 mL至帶分離膠的干燥試管中，常溫送至檢驗科，于采血后2 h內(nèi)離心并上機(jī)檢測。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS23.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，Minitab17軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換。采用Kolmogorov-Smirnov檢驗判斷計量資料正態(tài)性，若計量資料呈非正態(tài)分布則進(jìn)行BOX-COX轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)經(jīng)P-P圖檢驗如呈近似正態(tài)分布，則用Turkey法剔除離群值；呈偏態(tài)分布的計量資料以M(P25，P75)表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)。以P95為參考區(qū)間上限，并計算其90%CI。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1數(shù)據(jù)正態(tài)性轉(zhuǎn)換及離群值剔除 Kolmogorov-Smirnov檢驗結(jié)果顯示，血清TBIL、DBIL均不符合正態(tài)分布，BOX-COX轉(zhuǎn)換后呈近似正態(tài)分布，轉(zhuǎn)換過程中待定參數(shù)通過極大似然法求得。BOX-COX轉(zhuǎn)換及Turkey法剔除剔除離群值前后數(shù)據(jù)見表1。

表1 BOX-COX轉(zhuǎn)換及Turkey法剔除離群值前后數(shù)據(jù)分布(μmol/L)

2.2不同性別及年齡段間TBIL、DBIL水平比較 同年齡段不同性別間TBIL、DBIL水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(TBIL水平比較時6個年齡段對應(yīng)的Z值分別為-11.1、-23.5、-23.1、-21.6、-14.3、-7.2，P<0.05；DBIL水平比較時6個年齡段對應(yīng)的Z值分別為-11.4、-19.1、-25.6、-33.0、-25.1、-11.8，P<0.05)。同性別不同年齡段間比較，男性20～<30歲與30～<40歲人群，50～<60、60～<70歲與70～<80歲人群TBIL水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，故建立男性TBIL水平參考區(qū)間時對數(shù)據(jù)進(jìn)行合并，建立20～<40、40～<50、50～<80歲3個年齡段的參考區(qū)間即可。女性20～<30歲與30～<40歲人群，50～<60、60～<70歲與70～<80歲人群TBIL水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，故建立女性TBIL水平參考區(qū)間時進(jìn)行數(shù)據(jù)合并，建立20～<40、40～<50、50～<80歲3個年齡段的參考區(qū)間即可。男性30～<40歲與40～<50歲人群，60～<70歲與70～<80歲人群DBIL水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，故建立參考區(qū)間時進(jìn)行合并，建立20～<30、30～<50、50～<60、60～<80歲4個年齡段的參考區(qū)間即可。女性50～<60歲與60～<70歲人群DBIL水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，故建立參考區(qū)間時進(jìn)行合并，建立20～<30、30～<40、40～<50、50～<70、70～<80歲5個年齡段的參考區(qū)間即可，見表2。Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，男性、女性TBIL水平均與年齡呈正相關(guān)(r=0.084、0.099，均P<0.001)；男性DBIL水平與年齡呈正相關(guān)(r=0.055，P<0.001)，女性DBIL水平與年齡呈負(fù)相關(guān)(r=-0.140，P<0.001)。

表2 長春地區(qū)20～<80歲健康成人不同性別及年齡段間TBIL、DBIL水平比較[M(P25,P75),μmol/L]

2.3參考區(qū)間的建立與驗證 長春市20～<80歲健康成人血清TBIL、DBIL參考區(qū)間分布及90%CI見表3。本研究中女性30～<80歲DBIL參考區(qū)間與我國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 404.4-2018[3]中羅氏配套系統(tǒng)檢測得出的參考區(qū)間的相對偏差(4個年齡段的相對偏差：53.8%、73.9%、81.8%、63.6%)高于RCV(50.9%)。女性TBIL參考區(qū)間與遂寧地區(qū)[4]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(3個年齡段的相對偏差：31.4%、30.9%、32.3%)略高于RCV(30.2%)。本研究中TBIL參考區(qū)間與俄羅斯[5]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(3個年齡段的相對偏差：男1.1%、3.4%、5.7%，女7.8%、7.0%、8.9%)，與上海地區(qū)[6]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(3個年齡段的相對偏差：男21.4%、23.3%、25.1%，女24.5%、23.9%、25.4%)均低于RCV(30.2%)。男性DBIL參考區(qū)間與俄羅斯[5]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(4個年齡段的相對偏差：6.6%、-6.6%、10.9%)，與我國上海地區(qū)[6]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(4個年齡段的相對偏差：16.4%、11.5%、4.5%、6.1%)低于RCV(50.9%)；女性DBIL參考區(qū)間與俄羅斯[5]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(4個年齡段的相對偏差：16.4%、11.5%、4.5%、6.1%)，與我國上海地區(qū)[6]相關(guān)研究建立的參考區(qū)間的相對偏差(5個年齡段的相對偏差：7.3%、1.9%、10.9%、15.9%、4.1%)低于RCV(50.9%)。見表4。

表3 長春地區(qū)20～<80歲健康成人血清TBIL、DBIL參考區(qū)間 (μmol/L)

表4 其他相關(guān)研究建立的TBIL、DBIL參考區(qū)間

續(xù)表4 其他相關(guān)研究建立的TBIL、DBIL參考區(qū)間

3 討 論

血清膽紅素的來源主要有3方面：大部分由衰老紅細(xì)胞破壞、降解而來，小部分來自血紅素蛋白質(zhì)的破壞分解，極小部分由無效造血產(chǎn)生。故膽紅素水平受紅細(xì)胞影響較大。膽紅素在臨床上常用于消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病的評估及黃疸的鑒別診斷，其具有細(xì)胞毒性，過量的膽紅素會對神經(jīng)系統(tǒng)造成嚴(yán)重?fù)p害。膽紅素含有的共軛雙鍵系統(tǒng)和活性氫原子使其可以快速清除體內(nèi)的氧自由基，對細(xì)胞產(chǎn)生有效保護(hù)。近年研究表明，由于膽紅素具備抗氧化作用，膽紅素水平與各種基礎(chǔ)性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[7]，故建立其準(zhǔn)確的參考區(qū)間具有重要意義。

我國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 404.4-2018[3]建立的TBIL參考區(qū)間有性別差異。本研究得出的結(jié)果與俄羅斯[5]、肯尼亞[8]、唐山地區(qū)[9]等的血清膽紅素研究結(jié)果一致，均為TBIL、DBIL水平在健康成人間存在性別差異，同年齡段男性TBIL、DBIL水平明顯高于女性，這與男性血液中紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白水平高于女性的生理特點相符。本研究中，男性及女性的TBIL、DBIL均存在年齡差異，驗證了RAI等[10]的相關(guān)研究結(jié)果。本研究中，男性TBIL、DBIL及女性TBIL水平均隨年齡增加而有逐漸增加趨勢，女性DBIL水平隨年齡增加而有逐漸降低趨勢，在60歲后有所回升，考慮可能為一種生理現(xiàn)象，與相關(guān)研究中男性TBIL水平與年齡呈正相關(guān)[4]，女性DBIL水平與年齡呈負(fù)相關(guān)的研究結(jié)果相符[11]。本研究得出的TBIL參考區(qū)間上限偏高，與相關(guān)研究結(jié)果相符[12-13]。通過相對偏差與RCV比較得出，本研究建立的TBIL、DBIL參考區(qū)間與俄羅斯[5]及上海地區(qū)[6]的相關(guān)研究結(jié)果間無明顯差異(相對偏差RCV；女性30～<80歲DBIL參考區(qū)間上限低于我國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 404.4-2018[3]中羅氏配套系統(tǒng)檢測得出的參考區(qū)間，相對偏差>RCV。與其他研究結(jié)果略存在差異的原因可能是：(1)血清膽紅素受地理環(huán)境及氣候因素差異影響[14]，長春地區(qū)位于我國北方，氣溫普遍偏低且四季溫差較大；(2)不同地區(qū)人群飲食習(xí)慣及結(jié)構(gòu)差異、生活方式及工作壓力不同；(3)不同實驗室使用的儀器、試劑、方法不一致。

檢驗項目的參考區(qū)間是用于判定個體是否健康的主要依據(jù)，容易受到年齡、性別、地區(qū)、生活習(xí)慣、檢測系統(tǒng)等諸多因素的影響，故各實驗室應(yīng)建立適于本地區(qū)人群的參考區(qū)間。目前已證明間接法建立參考區(qū)間的可行性[15-16]，間接法的缺陷在于可能納入大量非健康樣本，但通過大數(shù)據(jù)的萃取、適宜的離群值剔除和數(shù)學(xué)統(tǒng)計模型建立，可有效彌補(bǔ)這一缺陷[17]。間接法憑借著相對簡便的優(yōu)勢，可得到與直接法相似的結(jié)果，為臨床實驗室參考區(qū)間建立帶來了新的思路。

本研究使用間接法建立了長春地區(qū)健康成人血清TBIL、DBIL參考區(qū)間，該參考區(qū)間具有年齡及性別差異，這為長春地區(qū)血清膽紅素的相關(guān)研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，同時也有利于臨床醫(yī)生對患者相關(guān)疾病進(jìn)行準(zhǔn)確診斷，值得推廣。