前列腺素D2對(duì)大腸桿菌誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子分泌的影響

金 鳳，李茜如，鞏志國，顧柏臣，趙佳敏，曹金山，劉 博 (內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

前列腺素(PGs)的形成過程為花生四烯酸(AA)在環(huán)氧合酶(COXs)，包括COX-1和COX-2的作用下轉(zhuǎn)化為前列腺素H2(PGH2)，隨后在前列腺素合成酶(prostaglandin synthetase)的作用下轉(zhuǎn)化為PGs[1]。與炎癥反應(yīng)調(diào)控過程關(guān)聯(lián)最緊密的PGs包括前列腺素E2(PGE2)和前列腺素D2(PGD2)[2]。在炎癥反應(yīng)中，PGE2可視為一種典型的炎癥介質(zhì)[3-6]。在此過程中，PGD2的分泌水平同樣出現(xiàn)顯著上升[7]。在小鼠巨噬細(xì)胞中，PGD2的合成分泌與其合成酶的表達(dá)呈正相關(guān)，主要通過造血型前列腺素D2合成酶(H-PGDS)依賴性途徑產(chǎn)生[2,7-8]。PGD2是否能夠調(diào)控病原菌感染后免疫細(xì)胞細(xì)胞因子的分泌，尚需進(jìn)一步的探討。

巨噬細(xì)胞可通過分泌細(xì)胞因子對(duì)病原微生物及其病原相關(guān)分子模式(PAMPs)所激活的天然免疫應(yīng)答起到關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用[9]。在小鼠巨噬細(xì)胞被金黃色葡萄球菌感染后，其PGE2的合成分泌依賴于細(xì)胞中TLR2(TLR2)、TLR4(TLR4)和NLRP3(NLRP3)等模式識(shí)別受體(PRRs)的存在[10]。此外，大腸桿菌感染可誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞中PGs的合成分泌[11]。因此，在巨噬細(xì)胞中，PGs的合成分泌與細(xì)菌感染之間具有緊密的關(guān)聯(lián)，但大腸桿菌感染巨噬細(xì)胞后通過何種模式識(shí)別受體誘導(dǎo)PGD2的合成分泌，目前尚不清楚。

本研究探討了模式識(shí)別受體TLR2、TLR4和NLRP3在大腸桿菌誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞PGD2合成分泌中的作用。此外，分析了內(nèi)源性和外源性PGD2對(duì)大腸桿菌誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子分泌影響。為闡明PGD2在宿主炎癥反應(yīng)中的調(diào)控作用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑PGD2、PGD2ELISA試劑盒、兩種前列腺品素D合成酶抑制劑HQL-79和H-PGDS抑制劑Ⅰ(H-PGDS Inhibitor Ⅰ)均購自Cayman chenical公司；……