腸道菌群和血清炎性因子變化及益生菌對肝性腦病的預防作用

范英超，程芳，司海驕

（中國人民解放軍北部戰(zhàn)區(qū)空軍醫(yī)院干部病房，遼寧 沈陽 110042）

亞臨床肝性腦病是指慢性肝病患者并未出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)體征和臨床精神癥狀的異常，僅能通過電生理檢查或/和智力測驗才能判斷的一種肝性腦病[1-2]。亞臨床肝性腦病具有較高的臨床發(fā)病率，且存在較大的潛在危害性；現(xiàn)階段有關該病的發(fā)病機制尚不明確。目前，在亞臨床肝性腦病發(fā)生、發(fā)展中，炎癥因子水平以及腸道菌群紊亂的影響引起了臨床廣泛的關注[3]。近年來，相關研究[4]顯示，選擇益生菌對亞臨床肝性腦病患者進行輔助治療效果顯著，但有關其是否能調節(jié)炎癥因子和腸道菌群的報道較少。基于此，本研究旨在探究腸道菌群、血清炎性因子變化及益生菌對肝性腦病的預防作用，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取本院2017 年3 月至2019 年12 月收治的60 例亞臨床肝性腦病患者作為實驗組，另選取同期在本院進行健康體者60 名作為對照組。實驗組男37 例，女23

例；年齡38～63歲，平均（46.2±6.1）歲。納入標準：神經(jīng)系統(tǒng)及精神系統(tǒng)檢查均正常，體感誘發(fā)電位檢查或/和精細智力測檢測異常；存在肝硬化病史。排除標準：精神系統(tǒng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病者；臨床型肝性腦病者；入組前8 周接受鎮(zhèn)靜劑或中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制劑治療者。對照組男34名，女26名；年齡40～61歲，平均（46.8±5.5）歲。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。所有研究對象均對本研究知情同意，并自愿簽署知情同意書。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會審核批準。

1.2 方法 實驗組患者接受護肝降轉氨酶以及低鹽飲食干預，并給予雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊（上海上藥信誼藥廠有限公司，國藥準字S10950032）治療，每次630 mg，每天2 次，采用溫開水送服，持續(xù)治療6周。

1.3 觀察指標 比較兩組血清炎癥因子水平以及腸道菌群數(shù)量。對照組在入組時檢測血清炎癥因子水平以及腸道菌群數(shù)量。實驗組分別于治療前、治療后6 周，檢測血清炎癥因子水平以及腸道菌群數(shù)量。①血清炎癥因子水平：于清晨空腹狀態(tài)下，采集研究對象4～6 mL 靜脈血，通過離心處理分離血清，置于-20 ℃的冰箱中備用，采用放射免疫法測定血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清白介素-6（IL-6）和血清白介素-10（IL-10）水平，并選擇上海恒遠生物科技有限公司生產的試劑盒，嚴格按照試劑盒說明書開展相關的檢測操作。②腸道菌群：嚴格遵循無菌操作原則，采集所有研究對象2 g新鮮糞便，放置于無菌離心管內，保存于-20 ℃的環(huán)境中。選擇DNA提取試劑盒提取標準菌株DNA，并檢測其濃度，計算標準品PCR片段拷貝數(shù)。離心洗滌糞便，選擇相同方法提取細菌總DNA，自行設計引物，通過熒光定量PCR測定糞便細菌DNA；按照反應后擴增曲線計算細菌拷貝數(shù)[5]。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以“±s”表示，比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組腸道菌群數(shù)量比較 治療前，實驗組大腸埃希菌數(shù)量明顯多于對照組，腸道乳桿菌、雙歧桿菌數(shù)量明顯少于對照組（P＜0.05）；治療后6周，實驗組大腸埃希菌數(shù)量明顯少于治療前，腸道乳桿菌、雙歧桿菌數(shù)量明顯多于治療前（P＜0.05），見表1。

表1 兩組腸道菌群數(shù)量比較（±s，lg CFU/g）Table 1 Comparison of intestinal flora between the two groups(±s,lg CFU/g)

表1 兩組腸道菌群數(shù)量比較（±s，lg CFU/g）Table 1 Comparison of intestinal flora between the two groups(±s,lg CFU/g)

注：與對照組比較，aP＜0.05；與治療前比較，bP＜0.05

組別實驗組（n=60）雙歧桿菌7.52±0.65a 8.65±0.88b 8.25±0.81時間治療前治療后6周對照組（n=60）大腸埃希菌8.43±0.86a 7.09±0.74b 7.69±0.75乳桿菌7.87±0.74a 8.87±0.93b 8.39±0.87

2.2 兩組血清炎性因子水平比較 治療前，實驗組TNF-α、IL-6水平均明顯高于對照組，IL-10水平明顯低于對照組（P＜0.05）；治療后6周，實驗組TNF-α、IL-6水平均明顯低于治療前，IL-10水平高于治療前（P＜0.05），見表2。

表2 兩組血清炎性因子水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum inflammatory factors between the two groups(±s)

表2 兩組血清炎性因子水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum inflammatory factors between the two groups(±s)

注：TNF-α，腫瘤壞死因子-α；IL-6，血清白介素-6；IL-10，血清白介素-10

IL-10（μg/L 14.82±3.69a 23.14±4.48b 36.09±4.74組別實驗組（n=60）時間治療前治療后6周對照組（n=60）TNF-α（ng/mL）2.12±0.42a 1.67±0.28b 1.21±0.24 IL-6（ng/L）2.15±0.53a 1.34±0.24b 0.46±0.07

3 討論

亞臨床肝性腦病發(fā)病機制較復雜，目前，尚未完全明確[6]。有研究[7]顯示，亞臨床肝性腦病患者的消化道淤血水腫、門靜脈壓等發(fā)生率升高，進而增加腸黏膜的通透性；此外，亞臨床肝性腦病患者的胃腸道蠕動較緩慢，腸道致病菌清除率較差，致病菌繁殖速度較快，導致內毒素的產生量增加，進而引起內毒素血癥，肝細胞受到刺激會導致炎癥因子的分泌量增加，腸黏膜屏障被進一步破壞，腸內毒素、細菌、炎癥因子出現(xiàn)大量易位，進入門靜脈，導致肝功能損傷加重，并形成惡性循環(huán)[8-9]。本研究結果表明，治療前，實驗組TNF-α、IL-6 水平明顯高于對照組，IL-10 水平明顯低于對照組（P＜0.05）。治療后6 周，實驗組TNF-α、IL-6 水平明顯低于治療前，IL-10水平明顯高于治療前（P＜0.05），表明，亞臨床肝性腦病患者的血清炎癥因子網(wǎng)絡出現(xiàn)紊亂，抗炎癥因子（IL-10）水平顯著降低，而促炎癥因子（TNF-α、IL-6）水平則顯著升高。

雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊是現(xiàn)階段臨床中應用比較廣泛的一種口服益生菌，該益生菌能在腸黏膜上皮競爭性粘附，且繁殖速度較快，并在腸黏膜表面形成菌膜，能對致病菌的繁殖和定植進行有效拮抗，使腸道菌群能維持平衡，重建腸道菌膜屏障。此外，益生菌還會對腸黏膜造成刺激，增加炎癥因子的釋放量，進而有效調節(jié)炎癥反應，使腸道局部抗感染能力顯著提升。本研究結果表明，治療前，實驗組大腸埃希菌數(shù)量明顯多于對照組，腸道乳桿菌、雙歧桿菌數(shù)量明顯少于對照組（P＜0.05）。治療后6 周，實驗組大腸埃希菌數(shù)量顯著低于治療前，腸道乳桿菌、雙歧桿菌數(shù)量顯著多于治療前（P＜0.05），表明，選擇雙歧桿菌三聯(lián)活菌膠囊對亞臨床肝性腦病患者進行輔助治療，能糾正腸道菌群紊亂，重建腸道菌群屏障進行。

綜上所述，應用益生菌治療亞臨床肝性腦病患者，能有效糾正腸道菌群紊亂，重建腸道菌群屏障，且還能有效調節(jié)血清炎癥因子水平，進而有效控制局部炎癥反應。