子宮內膜癌組織中MMR蛋白表達缺失的臨床意義

何蓉，易靜，何小清，李君怡

（萍鄉市婦幼保健院病理科，江西 萍鄉 337000）

子宮內膜癌是女性生殖系統常見惡性腫瘤之一，其病因尚未明確，多認為與生活方式、遺傳等因素密切相關，而隨著生活模式的轉變，該病發生率呈逐年升高的趨勢[1-2]。錯配修復（MMR）蛋白是修復DNA 錯配重要因子，可糾正DNA 復制過程中出現的錯誤堿基對，維持基因組織穩定性與完整性，預防基因突變，抑制腫瘤產生[3]。MMR蛋白缺失對推進子宮內膜癌疾病發展具有重要意義，但該觀點尚未得到臨床證實?；诖?，本研究旨在探討子宮內膜癌組織中MMR蛋白表達缺失的臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析本院2016 年2 月至2019 年12月收治的62例子宮內膜癌患者的臨床資料，年齡32～58歲，平均年齡（43.26±3.24）歲；其中腫瘤浸潤至黏膜內23 例，腫瘤浸潤至淺肌層26例，腫瘤浸潤至深肌層13例；無淋巴結轉移59 例，伴有淋巴結轉移3 例；FIGO 分期：Ⅰ期29 例，Ⅱ期17例，Ⅲ期11例，Ⅳ期5例；高分化子宮內膜癌37例，中分化子宮內膜癌16例，低分化子宮內膜癌9例。患者均對本研究知情同意并自愿簽署知情同意書；本研究經本院倫理委員會審核批準。納入標準：均經手術治療，且經手術病理確診；術前未應用激素類藥物；臨床資料完整。排除標準：嚴重心、肝、腎等重要臟器功能不全；合并其他惡性腫瘤；合并感染性疾病；哺乳期或妊娠期女性；凝血功能障礙。

1.2 方法 選取患者的石蠟病理組織，連續切取厚度為4 μm 的薄片，應用Envision 法進行免疫組化；將石蠟切片脫蠟至水，應用PBS 液進行沖洗后，采用pH 9.0 的EDTA 進行抗原修復；修復后將組織切片置于3%H2O2水中，于室溫下孵育10 min后，應用PBS液進行沖洗；于切片組織上滴加正常血樣血清工作液，在室溫環境下孵育20 min后，傾去液體，并分別滴加鼠抗人MLH1單克隆抗體、鼠抗人MSH2單克隆抗體、鼠抗人MSH6單克隆抗體、鼠抗人PMS2單克隆抗體，于4 ℃環境下孵育過夜后，應用PBS 液清洗；添加辣根酶標記鏈霉卵白素工作液，于37 ℃環境下孵育15 min 后，應用PBS 液清洗；DAB 顯色后，應用自來水清洗，并以蘇木素對細胞進行復染，采用中性樹膠封固切片。免疫組化試劑盒及MLH1、MSH2、MSH6、PMS2 均選自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3 診斷標準 MMR蛋白陽性：細胞核明確著色；MMR蛋白陰性：細胞核不著色；陽性對照：正常子宮內膜腺上皮細胞、血管內皮細胞、間質細胞、淋巴細胞MMR蛋白著色情況。

1.4 觀察指標 觀察MMR蛋白在病理組織中的表達情況，并分析MMR蛋白表達缺失與不同年齡、病理類型子宮內膜癌關系。

1.5 統計學方法 采用SPSS 18.0統計軟件進行數據分析，計數資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MMR 蛋白在子宮內膜癌中表達情況 62 例患者病理組織中，MMR 蛋白表達缺失率為29.03%（18/62），其他子宮內膜癌組織MMR蛋白表達正常。

2.2 MMR蛋白在不同年齡、病理類型子宮內膜癌中的表達情況 MMR蛋白表達缺失在不同年齡段子宮內膜癌中比較差異無統計學意義；MMR蛋白表達缺失在不同肌瘤浸潤深度、淋巴結轉移、FIGO 分期、腫瘤分化程度子宮內膜癌中比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 MMR蛋白在不同年齡、病理類型子宮內膜癌中的表達情況[n（%）]Table 1 The expression of MMR protein in endometrial cancer of different ages and pathological types[n(%)]

3 討論

子宮內膜癌是女性常見及多發的惡性腫瘤，好發于圍絕經期或絕經后女性，具有較高病發率及致死率，嚴重影響女性身心健康，甚至威脅生命安全[4]。有研究顯示，伴有林奇綜合征家族史女性子宮內膜癌發病率風險高達60%，而林奇綜合征是由MMR 蛋白缺失導致的常染色體顯性遺傳性疾病，因此，明確MMR蛋白缺失與子宮內膜癌病情發展關系，對臨床診治具有重要意義[5-6]。

本研究結果顯示，62例子宮內膜癌患者病理組織中，MMR蛋白表達缺失率為29.03%，且MMR蛋白表達缺失在不同年齡段子宮內膜癌中比較差異無統計學意義，在不同肌瘤浸潤深度、淋巴結轉移、FIGO分期、腫瘤分化程度子宮內膜癌中比較差異有統計學意義（P＜0.05），表明MMR蛋白缺失與子宮內膜癌患者年齡無關，但在腫瘤浸潤、淋巴結轉移、疾病分期、腫瘤分化程度中具有重要作用[7-8]。分析原因為，MMR蛋白于DNA修復過程中具有重要作用，主要以復合物形式修復生理功能，復合物主要分為MutSα、MutSβ兩種，其中MutSα主要由MSH6、MSH2組成，其兩者可結合MLH1、PMS2復合物，修復單堿基錯配，MutSβ主要由MSH2、MSH3組成，其兩者結合MLH1、PMS2復合物后，可修復DNA大缺失或突變環[9-10]。在關鍵調節途徑中，若DNA錯配修復功能丟失，則易導致調節途徑丟失調節功能，進而影響正常細胞生長與分裂，促進腫瘤形成與發展。而MMR蛋白丟失率越高，則子宮內膜腫瘤發展速度越快，進而浸潤深度、腫瘤分期越高，分化程度越低，且多伴有淋巴結轉移情況[11-12]。

有研究[13]顯示，隨著年齡的增加，MMR蛋白缺失率也隨之升高，故在不同年齡子宮內膜癌患者中，MMR蛋白缺失情況比較差異無統計學意義，但本研究選取最大年齡患者僅為58歲，故難以證實該研究結論，臨床仍需擴大選取患者年齡范圍，以探討MMR蛋白表達情況與患者年齡關系。

綜上所述，MMR 蛋白在深肌層浸潤、高FIGO 分期、淋巴結轉移、低分化子宮內膜癌組織中表達缺失率較高，對推進子宮內膜癌疾病發展具有重要作用，建議臨床定期檢測子宮內膜癌患者MMR蛋白表達情況。