對比3種不同免疫檢驗方法檢測HIV抗體結果的可靠性

侯娟，葉峰山，陳煥文，陳成塔

（廈門大學附屬第一醫院杏林分院檢驗科，福建 廈門 361000）

艾滋病是以CD4+T淋巴細胞數量減少為典型特征的傳染性疾病，該病導致患者免疫功能受損甚至缺陷，引發其他嚴重并發癥，最終導致死亡[1-2]。人體免疫缺陷病毒（HIV）感染是引發艾滋病的根本原因，其傳播途徑眾多，如高危性行為、母嬰、不規范醫療操作、使用被污染的血制品等[3]。隨著艾滋病引發的社會問題越來越多，國家對其重視程度也不斷加強，對HIV監測的要求也逐漸提高[4]。目前HIV的檢測流程是先行抗體初篩，若抗體檢測呈陽性再行確診檢查，常見的初篩方法以免疫檢驗為主，以酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析法、化學發光法應用最廣泛，但3 種免疫檢驗方法各有優劣，臨床對于最優檢測方法尚存在爭議[5]。基于此，本研究選取于本院檢測確診為HIV 的143 例患者作為研究對象，對比酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析法、化學發光法檢測HIV抗體的可靠性，旨在為臨床工作順利開展提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年9月至2020年9月于本院檢測確診為HIV 的143 例患者，其中男79 例，女64 例；年齡22～71歲，平均年齡（38.66±9.50）歲；HIV抗體陽性97例，HIV抗體陰性46 例。所有患者均對本研究知情，并自愿簽署知情同意書。本研究經本院倫理委員會審核批準。

納入標準：①患者均經蛋白免疫印跡法檢測確認，并符合《中國艾滋病診療指南（2018版）》[6]的診斷標準；②無肺結核等其他傳染病。排除標準：①合并血液系統疾病；②合并免疫系統疾病；③合并嚴重精神疾病導致樣本采集失敗。

1.2 方法 采集患者血液樣本，分別行酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析法、化學發光法檢測，其中酶聯免疫吸附試驗使用廈門英科新創科技有限公司生產的檢測試劑盒與北京天石科技有限責任公司生產的SM-3型酶標儀，按照試劑盒與儀器說明書進行檢測與判定，觀察抗體和抗原結合后的顏色反應情況并進行定量分析，若測定值/臨界值＞1則判斷HIV抗體陽性，反之則為陰性。膠體金免疫層析法使用廈門英科新創科技有限公司生產的檢測試劑盒，將血液樣本浸入加樣區，全部浸沒后持續10 s，觀察試紙上質控點和測定點變化，若兩點同時出現則判斷HIV抗體陽性，僅出現質控點而未見測定點為陰性，未出現質控點則重新檢測。化學發光法使用美國雅培公司生產的I2000化學發光儀及配套試劑，按照說明書進行檢測，根據檢測臨界值指數（COI）判斷結果，COI值＞1則判斷HIV抗體陽性，反之則為陰性。

1.3 觀察指標 比較3種免疫檢驗方法的檢測結果，并評價對HIV 抗體的檢測效能，其中靈敏度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100%；特異度=真陰性例數/（真陰性例數+真陽性例數）×100%；準確率=（真陽性例數+真陰性例數）/總例數×100%。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，計數資料用率（%）表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 酶聯免疫吸附試驗對HIV抗體的檢測效能 酶聯免疫吸附試驗檢測出HIV 抗體陽性標本93 例，HIV 抗體陰性標本50例，檢測靈敏度為92.78%，特異度為93.48%，準確率為93.01%，見表1。

表1 酶聯免疫吸附試驗對HIV抗體的檢測效能

2.2 膠體金免疫層析法對HIV抗體的檢測效能 膠體金免疫層析法檢測出HIV 抗體陽性標本96 例，HIV 抗體陰性標本47例，檢測靈敏度為91.75%，特異度為84.78%，準確率為89.51%，見表2。

表2 膠體金免疫層析法對HIV抗體的檢測效能

2.3 化學發光法對HIV抗體的檢測效能 化學發光法檢測出HIV抗體陽性標本98例，HIV抗體陰性標本45例，檢測靈敏度為98.97%，特異度為95.65%，準確率為97.90%，見表3。

表3 化學發光法對HIV抗體的檢測效能

2.4 3 種方法檢測HIV 抗體的靈敏度、特異度、準確率比較化學發光法檢測HIV 抗體的靈敏度高于酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析法，差異有統計學意義（P＜0.05）；酶聯免疫吸附試驗、化學發光法檢測HIV抗體的特異度、準確率均高于膠體金免疫層析法，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 3種方法檢測HIV抗體的靈敏度、特異度、準確率比較（%）

3 討論

臨床實踐表明，及時監測HIV感染并予以有效干預是控制艾滋病發展的重要手段[7]。蛋白免疫印跡法由于高效、敏感度高、分析容量大等優點，已作為HIV抗體檢測的金標準，但該方法所用材料與試劑價格昂貴，在HIV大范圍初篩中難以有效開展，因此，實驗室常用酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析法、化學發光法等進行抗體檢測[8]。

酶聯免疫吸附試驗是先將酶分子與目標抗體共價結合，隨后與固相載體上吸附的抗原特異性結合，滴加底物溶液進行氧化還原反應，即可通過隨之出現的顏色反應對抗體進行定性或定量分析[9]。膠體金免疫層析法是利用膠體金作為示蹤標志物，其在弱堿環境下帶有負電荷，可與蛋白質分子正電荷發生靜電結合，從而對抗體進行標記[9-10]。化學發光法是基于待測物濃度與體系化學發光強度呈線性定量關系這一原理，通過對體系化學發光進行測量，確定相應抗體屬性[10-12]。此類方法均具有快速、簡便、價格低廉等特點，被廣泛應用于HIV 初篩，但3 種方法各有優劣，均可能對檢測結果造成影響，為降低漏檢可能，提高篩查準確度，因此，需探尋最優檢測方法。

本研究結果表明，酶聯免疫吸附試驗、化學發光法檢測HIV 抗體的特異度、準確率均高于膠體金免疫層析法，差異有統計學意義（P＜0.05），說明酶聯免疫吸附試驗、化學發光法對HIV抗體的檢測效果與蛋白免疫印跡法相似，而膠體金免疫層析法檢測效能較差，分析原因為，該方法診斷效果與實驗材料質量，滲濾膜、層析材料、試劑條等相關[13]。此外，本研究中，化學發光法檢測HIV抗體靈敏度高于酶聯免疫吸附試驗（P＜0.05），分析原因為，酶聯免疫吸附試驗耗時相對更長，且步驟繁瑣，實驗過程中易被類風濕因子、溶血、甲胎蛋白等因素干擾，從而導致假陽性率與假陰性率較高[14]。

綜上所述，化學發光法檢測HIV 抗體效能更高，可在疾病篩查時有效避免漏檢，值得臨床推廣運用。