老年宮頸癌患者腫瘤細胞侵犯周圍神經與臨床病理特征的關系及對治療預后的影響

李媛媛 黃蓓蓓 夏燕 楊大平

(安徽醫科大學附屬宿州醫院(安徽省宿州市立醫院)婦科，安徽 宿州 234000)

宮頸癌在女性常見惡性腫瘤中的發病率僅次于乳腺癌，全球每年超過60萬人患宮頸癌，其中80%以上分布于發展中國家〔1〕。宮頸癌發病主要集中在40～50歲、60～70歲兩個年齡段，理論上認為，受年齡因素的影響，中青年宮頸癌患者和老年宮頸癌患者在病理特征方面存在一定差異，治療預后也不同〔2〕。相關研究顯示，周圍神經侵犯與部分惡性腫瘤的預后存在一定關系〔3〕。神經侵犯也被稱為腫瘤嗜神經性侵襲，研究認為是獨立于淋巴脈管間隙侵襲的另一種腫瘤細胞轉移途徑〔4〕。目前關于老年宮頸癌患者周圍神經侵襲的相關研究較少。本研究旨在探討老年宮頸癌患者腫瘤細胞侵犯周圍神經與臨床病理特征的關系及對治療預后的影響。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取2015年1月至2017年12月安徽醫科大學附屬宿州醫院收治的宮頸癌患者130例。入選標準：①病理檢查確診為宮頸鱗癌、腺癌、腺鱗癌；②國際婦產科聯盟(FIGO)分期為ⅠA2～ⅡA期；③行廣泛性子宮切除和盆腔淋巴結清掃術治療。排除標準：①術前有放化療史者；②合并其他類型惡性腫瘤者；③隨訪資料不完整者。患者年齡61～74歲，平均(54.80±9.26)歲；ⅠA期10例、ⅠB1期76例、ⅠB2期12例、ⅡA期32例。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2免疫組化檢測 取術中采集的宮頸癌組織，4%甲醛固定后常規石蠟包埋，4 μm連續切片，首先進行蘇木素-伊紅(HE)染色，觀察腫瘤細胞侵犯周圍神經情況，對宮頸癌組織的玻片進行篩選，得到對應的石蠟包塊進行免疫組化檢查。采用EnVision二步法檢測腫瘤細胞侵犯周圍神經的陽性率，操作過程：包塊、脫蠟、高溫高壓修復抗原、加入過氧化氫在溫箱中溫育60 min，滴加鼠抗人S100單克隆抗體，1∶500稀釋，4 ℃過夜，滴加二抗，1∶2 000稀釋；二氨基聯苯胺(DAB)顯色、蘇木精復染，光學顯微鏡視野下進行觀察，陽性染色呈黃色或棕黃色，陽性細胞數<5%為周圍神經侵犯陰性，≥5%為周圍神經侵犯陽性。

1.3治療方案與觀察指標 納入的患者均接受手術治療，包括腹腔鏡手術或開腹手術，術后根據病理檢查結果決定是否行輔助化療，根據FIGO指南，術后病理高危因素包括：手術切緣陽性、宮頸癌宮旁浸潤、淋巴結轉移，具有任一個高危因素的患者需接受輔助化療。記錄患者臨床分期、腫瘤分化程度、病理類型、腫瘤直徑、腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移情況、手術切緣及脈管侵犯情況。

1.4術后隨訪 宮頸癌患者術后進行為期3年的隨訪，第1年每3個月隨訪1次，之后每6個月隨訪1次，記錄患者生存情況，將隨訪截止時未出現新病灶或復發的患者定義為無復發，分析患者的3年無復發生存率和3年總生存率。

1.5統計學分析 采用SPSS24.0統計學軟件進行χ2檢驗、Cox分析。

2 結 果

2.1宮頸癌組織中腫瘤細胞侵犯周圍神經觀察 130例老年宮頸癌患者中腫瘤細胞侵犯陽性80例(61.54%)，陰性50例(38.46%)。HE染色觀察發現腫瘤細胞侵犯的區域主要為神經束膜和周圍結構，部分在神經束膜下方能夠延伸到神經內膜及其內部結構，神經外膜、神經內膜血管周圍、神經纖維內均可見宮頸癌細胞浸潤，見圖1。

2.2宮頸癌細胞侵犯周圍神經與臨床病理特征的關系 宮頸癌細胞周圍神經侵犯的陽性率在不同臨床分期、分化程度、腫瘤直徑、淋巴結轉移、手術切緣、脈管侵犯的老年宮頸癌患者間比較差異有統計學意義(P<0.01)；在不同病理類型、腫瘤浸潤深度的老年宮頸癌患者間比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

侵犯周圍神經(×100) 侵入神經纖維內(×400)圖1 宮頸癌細胞侵犯周圍神經觀察(HE染色)

表1 宮頸癌細胞侵犯周圍神經與臨床病理特征的關系〔n(%)〕

2.3宮頸癌細胞侵犯周圍神經對3年無復發生存率和總生存率的影響 宮頸癌細胞侵犯周圍神經陽性的患者3年無復發生存率和總生存率低于宮頸癌細胞侵犯周圍神經陰性患者，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 宮頸癌細胞侵犯周圍神經對3年無復發生存率和總生存率的影響〔n(%)〕

2.4老年宮頸癌患者病情復發的單因素分析 周圍神經侵犯、臨床分期、分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移、手術切緣、脈管侵犯是老年宮頸癌患者病情復發的影響因素(P<0.01)。見表3。

表3 老年宮頸癌患者病情復發的Cox單因素分析

2.5老年宮頸癌患者病情復發的多因素分析 為排除各因素之間的相互影響進一步構建Cox多因素模型，結果顯示，周圍神經侵犯、分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移是老年宮頸癌患者病情復發的獨立影響因素(P<0.01)。見表4。

表4 老年宮頸癌患者病情復發的Cox多因素分析

3 討 論

腫瘤細胞周圍神經侵犯主要通過神經內、神經束膜內的淋巴管來實現〔5〕。相關研究顯示，在前列腺癌、胰腺癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤中均存在腫瘤細胞周圍神經侵犯〔6～8〕。在部分惡性腫瘤中周圍神經侵犯被認為與患者不良預后密切相關，會縮短生存時間。相關研究顯示，約74%有腫瘤細胞周圍神經侵犯的胰腺癌患者有淋巴結轉移，提示存在周圍神經侵犯的胰腺癌患者淋巴結轉移風險增加〔9〕。近年來研究認為，周圍神經侵犯是腫瘤細胞轉移的途徑之一〔10〕；觀察前列腺癌患者病理切片發現，血管、淋巴結未見腫瘤細胞侵犯，但周圍神經受到侵犯，也證實了上述觀點。目前關于宮頸癌患者腫瘤細胞周圍神經侵犯的研究較少，探究周圍神經侵犯與宮頸癌患者預后的影響對臨床診治具有重要意義。

本研究結果提示腫瘤細胞周圍神經侵犯與老年宮頸癌患者臨床病理特征密切相關，隨著臨床分期增加、低分化程度、腫瘤大小增加、出現淋巴結轉移、手術切緣陽性、出現脈管侵犯，患者周圍神經侵犯的陽性率明顯增加，可能影響預后水平。進一步分析提示周圍神經侵犯與老年宮頸癌患者預后水平明顯相關，其原因可能與周圍神經侵犯促進腫瘤細胞轉移和侵襲有關，但具體分子機制目前仍未完全明確。相關研究顯示，腫瘤細胞周圍神經侵犯與神經細胞黏附因子的表達水平密切相關，進而提出了腫瘤細胞具有神經趨向性的觀點〔11〕。亦有研究發現，在膽管癌中，周圍神經侵犯不僅與患者的解剖結構有關，腫瘤細胞對神經組織的識別能力也參與其中，而腫瘤細胞正是通過分泌神經細胞黏附分子來識別神經組織〔12〕。宮頸癌復發是患者生命質量下降和生存時間縮短的主要原因〔13〕。本研究結果提示周圍神經侵犯對老年宮頸癌患者病情復發具有潛在的預測價值，在關注傳統臨床病理指標分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移的同時也要重視周圍神經侵犯對患者預后的影響。

綜上，腫瘤細胞侵犯周圍神經與老年宮頸癌患者臨床病理特征和病情復發密切相關，且對患者生存時間具有一定預測價值。在今后的研究中應進一步深入探討宮頸癌患者腫瘤細胞周圍神經侵犯的分子機制，為臨床治療提供途徑。