佛山地區嬰兒血清心肌肌鈣蛋白I參考區間的建立及意義

李青青

廣東省佛山市婦幼保健院檢驗科，廣東佛山 528000

心肌肌鈣蛋白(cTn)具有較高的特異度和靈敏度，隨著臨床實踐的發展，cTn的檢測和臨床應用也不斷深入。有研究表明，cTn是目前應用于診斷心肌損傷較好的生物標志物[1-2]。

參考區間是目前國際通用的規范術語，是解釋檢驗結果、分析檢驗信息的一個基本尺度和依據[3]。由于多年來一直沒有中國人群參考區間的系統研究，我國目前臨床應用的檢驗項目參考區間主要引自試劑說明書、行業指南、書籍等提供的資料，其參考區間多基于幾十年前歐美人群的研究結果，而血清cTnI統一的參考區間為0.006～0.040 ng/mL。2012年，國家正式發布我國成人檢驗項目參考區間[4]，但目前尚未發布全國性的嬰幼兒檢驗項目參考區間。

血清cTnI是兒科醫生比較重視的，可反映嬰幼兒心肌損傷的重要指標，參照成人的參考區間容易導致臨床誤判。因此有必要建立起地區性嬰幼兒血清cTnI參考區間，這將對嬰幼兒急性心肌損傷及疾病情況分析有重要指導意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018—2019年于本院出生的1 264例1～12個月嬰兒(男嬰865例，女嬰399例)為研究對象(由于新生兒的特殊性，僅收集到少量病例，將其納入研究將影響統計分析，故本文暫不研究新生兒這一群體)。大部分資料來源于住院嬰兒，心電圖、B超檢查無心臟病；肝功能、腎功能、血脂、血糖、尿酸正常；血、尿、糞便常規正常；乙肝表面抗原陰性及體格檢查正常。

1.2儀器與試劑 儀器為西門子電化學發光分析儀；校準品、檢測試劑盒及質控品均購自德國西門子公司。cTnI檢測范圍為0.006～50.000 ng/mL。

1.3質量控制 根據相關要求，西門子儀器自進入科室以來每年進行儀器校準、儀器性能驗證；檢驗項目cTnI每年進行正確度驗證、精密度驗證、可報告范圍驗證、分析靈敏度驗證。性能驗證結果均符合項目說明書的要求。cTnI每年2次參加國家衛生健康委員會心肌標志物室間質評，室間質評成績均為100%，每天檢測開始前需保證室內質控在控，結果準確可靠。

1.4方法 搜集所有研究對象的血清。采用西門子電化學發光分析儀及配套試劑檢測血清cTnI水平。采血后2 h內以3 500 r/min 離心10 min，血清在離心后2 h內檢測。

1.5統計學處理 采用SPSS22.0統計軟件對數據進行處理和分析。檢測數據中如有疑似離群的數據，將疑似離群值的檢測結果與其相鄰值的差(D)和數據全距(R)相除，若D/R≥l/3 考慮為離群值，應棄之。若有2個以上疑似離群值，可將最小的疑似離群值做上述處理，如D/R 均≥1/3 則需將所有點棄去。繪制分布圖及利用Kolmogorov-Smirnov統計方法檢驗數據是否服從正態分布。采用Mann-WhitneyU檢驗比較不同性別cTnI水平。采用Z檢驗，根據年齡進行分組，分別計算Z值和Z*值，分組后參考區間采用百分位法，計算P99作為參考區間。以P<0.05為差異有統計學意義。Z檢驗公式如下所示：

1.6參考區間的驗證 選擇20例本院出生的嬰兒進行參考區間的驗證。在剔除離群值后如果20例標本測定值落在需驗證的參考區間外的比例不超過10%，則所建立的參考區間判定為通過驗證，可為實驗室直接使用；反之則所建立的參考區間可能不準確，不能為實驗室直接使用，需重新進行計算以獲得正確的參考區間。

2 結 果

2.1正態性檢驗 利用統計圖和Kolmogorov-Smirnov統計方法判斷數據是否服從正態分布，結果不服從正態分布(Z=0.265，P<0.05)。見圖1。

圖1 總樣本的頻數分布圖

2.2不同性別嬰兒cTnI水平比較 結果顯示佛山地區男嬰與女嬰的cTnI水平差異無統計學意義(U=-0.748，P=0.454)，見圖2。

圖2 不同性別cTnI水平比較

2.3血清cTnI參考區間的建立 經過無數次剔除離群值后最終確定嬰兒的分組主要可以分為1～2個月及3～12個月2組；利用百分位法計算P99作為參考區間，1～2個月的P99為0.099 ng/mL，3～12個月的P99為0.044 ng/mL。見表1。

表1 不同年齡段cTnI的Z檢驗及分組情況

2.4參考區間的驗證 20例本院出生的1～2個月嬰兒的cTnI測定值均落在該研究計算的參考區間范圍內，20例本院出生的3～12個月嬰兒的cTnI測定值均落在該研究計算的參考區間范圍內，說明該研究的參考區間適用于當地的嬰兒，均通過驗證。

3 討 論

研究表明，cTn是公認的心肌損傷重要生物標志物[5]。2002年公布的《心肌損傷標志物的應用準則》指出，將心臟cTnT或cTnI取代心肌酶成為檢測心肌損傷的金標準[1]。由于健康人血清中cTnI水平極低，當心肌細胞因各種原因發生損傷時，cTnI快速釋放到血液，導致人體血液中cTnI水平升高，心肌細胞損傷越嚴重，cTnI水平升高就越明顯[6]。由此cTnI可反映心肌的壞死程度和損傷程度[7-8]。臨床上血清cTnI對多種心肌疾病的診斷、治療及預后判斷均具有重要意義[9-12]。然而如何判斷血清中的cTnI水平是否是病理性升高，依賴于準確的實驗室診斷。

自本院2018年底開展cTnI檢測項目以來，一共檢測了約5 000余例血清標本，通過臨床醫生溝通反映，發現在沒有任何臨床癥狀及心電圖改變的情況下，出生不久的嬰兒的cTnI數值普遍超出試劑說明書的參考范圍。通過剔除有基礎疾病及心臟損傷的數據后，進行統計學分析發現，僅1～2個月的嬰兒參考區間水平普遍高于其他年齡段。這一結果表明，試劑說明書上的參考范圍并不適用于1～2個月的嬰兒群體。而繼續沿用該參考區間必然將多數健康嬰兒誤診為心肌損傷患兒。為了避免誤診，每個地區需要根據該地區的差異建立屬于本地區的實驗室參考區間。

本研究結果顯示，cTnI在1～2個月嬰兒血清中水平很高，隨著年齡的增長，cTnI水平逐漸降低。這可能與嬰幼兒前2個月的心肌發育不完善，心肌存在更新有關，其病理機制尚需進一步研究。本研究最終確認了佛山地區1～12個月嬰兒的參考區間。嬰兒(1～2個月)血清cTnI的參考區間為0.006～0.099 ng/mL。嬰兒(3～12個月)的參考區間為0.006～0.044 ng/mL，結果發現3～12個月嬰兒的參考區間與成人的參考區間高度一致，所以僅建立1～2個月及3～12個月的嬰兒參考區間將足以涵蓋整個人群。

佛山地區嬰兒的cTnI參考區間的建立有利于解釋cTnI的檢測結果，有利于臨床醫生的對嬰兒心肌損傷進行及時的診斷和治療，也為各醫院檢驗結果與臨床表現不符時，提供很好的科學解釋，具有重要的臨床應用價值及指導意義。