細胞形態學檢查聯合血清腫瘤標志物檢測對惡性胸腔積液/腹水的診斷價值

桂 強

黃石有色醫院檢驗科，湖北黃石 435005

惡性腫瘤、結核性胸膜炎等病理改變均可導致胸腔積液/腹水的發生，患者主要表現為呼吸困難、胸痛、腹痛、惡心嘔吐等癥狀，嚴重影響患者的身體健康，而準確判斷胸腔積液/腹水的良惡性對醫師診療疾病具有重要的意義[1-2]。近年來，隨著分子生物學、免疫學技術的不斷發展，癌胚抗原(CEA)、糖類抗原199(CA199)等血清腫瘤標志物檢測在惡性胸腔積液/腹水的診斷中得到了廣泛應用，該方法具有可定性、可定量的特點，但診斷靈敏度、特異度較低，容易出現漏診、誤診[3-4]。細胞形態學檢查具有操作便捷、快速，特異度較高的優勢，在良惡性胸腔積液/腹水的鑒別中得到了逐步應用和推廣[5-6]。為了探討更加準確的檢測方法，本文就細胞形態學檢查聯合血清腫瘤標志物檢測對惡性胸腔積液/腹水的診斷價值進行了探討，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院收治的93例胸腔積液/腹水患者，其中胸腔積液患者57例，腹水患者36例，病例選擇時間為2018年3月至2020年3月。根據胸腔積液/腹水病理檢查結果，將患者分為良性組(45例)與惡性組(48例)。納入標準：(1)因胸腔積液/腹水而遵醫囑行胸腔積液/腹水抽取的病例；(2)臨床資料保存完整；(3)患者同意配合本研究。排除標準：(1)血液系統疾病者；(2)癲癇患者；(3)妊娠或哺乳期女性；(4)認知功能障礙、語言表達能力障礙、精神病等無法配合研究者。患者中男50例，女43例；年齡34～82歲；平均(58.01±9.67)歲；肺癌21例，胃癌13例，膽管癌8例，卵巢癌4例，肝癌2例，結核性胸膜炎20例，肝炎14例，肝硬化11例。患者均對本研究知情同意，本研究經本院倫理委員會審核通過。良、惡性組患者的一般資料比較，差異無統計學意義(P<0.05)，具有可比性。見表1。

表1 兩組一般資料對比

1.2方法 使用EDTA-K2專用抗凝管收集患者胸腔積液/腹水10 mL，1 600 r/min離心10 min，取上清液行CEA、CA199、腺苷脫氨酶(ADA)檢測。將管底剩余殘渣均勻混合后用吸管吸出20 μL，制作3張涂片，待其自然干燥后使用瑞士染色液進行涂色處理，使用OLYMPUS CX31-P顯微鏡觀察細胞形態。每張涂片選出3～9個異常細胞進行細胞形態量化檢測，從細胞體大小、核質比、細胞核大小、細胞分布特點、核仁/核5個方面觀察細胞形態。細胞形態學計分標準如下：大小差異>2倍計1分，大小差異≤2倍計0.5分，大小一致計0分；核質比<0.3計0分，0.3～0.5計0.5分，>0.5計1分；細胞核直徑<12 μm計0分，12～20 μm計0.5分，>20 μm計1分；核仁/核<0.20計0分，0.20～0.25計0.5分，>0.25計1分；細胞分布特點，單個、質界清楚計0分，質界模糊計0.5分，成堆、細胞質融合計1分。總積分≥3.5分即可判斷為陽性[7]。采用羅氏Cobas e601電化學發光儀，借助化學發光免疫法測定CEA、CA199水平，配套試劑購于上海雙贏生物科技有限公司；采用TOSHIBA KF120全自動生化分析儀，使用速率法測定ADA，檢測試劑購于北京利德曼生化股份有限公司。ADA參考值<25 U/L；CEA參考值<5 U/L；CA199參考值<37 U/mL，超過參考值判定為陽性，在參考值范圍內判斷為陰性[8]。

1.3觀察指標 (1)比較兩組良惡性胸腔積液/腹水患者的細胞形態學、CEA、CA199、ADA檢測陽性率。(2)分析細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA與CEA、CA199、ADA單項指標檢測診斷惡性胸腔積液/腹水的結果，聯合診斷時，單項指標為陽性即可判斷為陽性，均為陰性即可判斷為陰性[9]。(3)以病理結果為金標準，評價細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA，以及CEA、CA199、ADA單項指標檢測診斷惡性胸腔積液/腹水的效能，包括準確性、特異度、靈敏度、漏診率、誤診率。靈敏度=真陽性例數/(真陽性例數+假陰性例數)，特異度=真陰性例數/(真陰性例數+假陽性例數)，準確性=(真陽性例數+真陰性例數)/總例數，漏診率=假陰性例數/(真陽性例數+假陰性例數)，誤診率=假陽性例數/(真陰性例數+假陽性例數)。

2 結 果

2.1兩組患者的細胞形態學、CEA、CA199、ADA陽性率對比 惡性組患者的細胞形態學、CEA、CA199、ADA陽性率高于良性組患者，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者細胞形態學、CEA、CA199、ADA陽性率對比[n(%)]

2.2細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA檢測診斷惡性胸腔積液/腹水的結果對比 見表3。

表3 細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA檢測診斷惡性胸腔積液/腹水的結果對比(n)

2.3聯合檢測與各指標單項檢測的診斷效能評價 細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA診斷惡性胸腔積液/腹水的靈敏度、準確性高于CEA、CA199、ADA單項檢測結果(P<0.05)，漏診率低于CEA、CA199、ADA單項檢測結果(P<0.05)，特異度、誤診率與CEA、CA199、ADA單項檢測結果比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 聯合檢測與各指標單項檢測的診斷效能評價[%(n/n)]

3 討 論

惡性胸腔積液/腹水主要由乳腺癌、肺癌等惡性腫瘤引發，隨著患者病情的發展，癌細胞擴散，嚴重威脅患者的生命健康。既往采用的涂片法在實際操作中易受到人為因素的影響，存在陽性率低、腫瘤分型難度高等方面的缺陷[10-11]。脫落細胞學檢查可能會受到細胞變異等因素的干擾，出現漏診、誤診情況。臨床中腫瘤患者體內代謝的有毒產物會刺激機體組織細胞，加快細胞代謝，致使大量腫瘤抗原釋放入血后引起胸腔積液/腹水，使胸腔積液/腹水中腫瘤標志物水平升高情況[12-13]。由于不同腫瘤標志物診斷惡性胸腔積液/腹水的靈敏度、特異度存在一定差異，因此聯合檢測已成為未來診斷惡性胸腔積液/腹水的主要發展趨勢[14-15]。

既往關于血清腫瘤標志物診斷惡性胸腔積液/腹水的報道較多，但大多集中在陽性率、準確性方面，而有關細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA的報道較為少見，且本研究對細胞形態學指標展開了量化分析，并從細胞形態學檢查聯合多項腫瘤標志物檢測對惡性胸腔積液/腹水的鑒別診斷價值展開了探討。本研究結果顯示，與良性胸腔積液/腹水患者比較，惡性胸腔積液/腹水患者的細胞形態學、CEA、CA199、ADA陽性率更高，提示患者的細胞形態學、ADA、CA199、CEA變化可為醫師區分良惡性胸腔積液/腹水提供參考。分析后可知，CEA、CA199是常用的腫瘤標志物之一，CEA主要存在于惡性組織細胞表面、胚胎胃腸黏膜上皮，CA199屬于胃腸癌相關抗原，與結腸癌、胃癌、膽囊癌、胰腺癌有關，在惡性胸腔積液/腹水患者中，胸腔積液/腹水中的CEA、CA199不易釋放入血被肝臟代謝，因此通常呈高表達狀態。ADA是腺嘌呤核苷代謝途徑中的一種酶，在人體脾、胸、腹、淋巴結等組織部位中廣泛分布，其表達水平與人體免疫功能密切相關，ADA在未分化、未成熟的細胞中呈高表達狀態，而在惡性腫瘤細胞中由于T淋巴細胞受到抑制，ADA活性會隨之降低。細胞形態學檢查是一種新興的檢查方法，能夠根據細胞形態特征進行積分，更加客觀地描述細胞形態學變化，實現對細胞形態的量化檢測。因此，細胞形態學檢查、ADA、CEA、CA199水平變化可為醫師篩查惡性胸腔積液/腹水提供重要的參考依據。

相關報道顯示，胸腔積液/腹水細胞形態學檢查能夠通過描述異常細胞形態，發現惡性腫瘤細胞，輔助醫師診斷惡性胸腔積液/腹水[16]。本文中細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA檢測診斷惡性胸腔積液/腹水的靈敏度、準確性分別為91.67%、91.40%。高于CEA、CA199、ADA單項指標檢測結果，漏診率為8.33%，低于CEA、CA199、ADA單項指標檢測結果，特異度、誤診率與CEA、CA199、ADA單項指標檢測結果對比，差異無統計學意義(P>0.05)。這說明采用細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA檢測可提高診斷惡性胸腔積液/腹水的靈敏度和準確性，減少漏診，為醫師準確檢出惡性胸腔積液/腹水提供參考。本研究還發現，單一腫瘤標志物診斷惡性胸腔積液/腹水的靈敏度、特異度存在一定差異，多項指標聯合檢測可彌補單項指標檢測存在的不足。而聯合細胞形態學檢查能夠輔助醫師從細胞體大小、細胞核大小、核質比、細胞分布等處入手，根據細胞形態學改變鑒別惡性腫瘤細胞，并將細胞形態特征與ADA、CA199、CEA檢測相結合，有效提高診斷結果的準確性，減少漏診病例。本研究中細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA診斷惡性胸腔積液/腹水僅漏診4例，漏診率較低。

綜上所述，在惡性胸腔積液/腹水診斷中應用細胞形態學檢查聯合CEA、CA199、ADA檢測可明顯提高診斷結果的靈敏度、準確性，為醫師鑒別診斷惡性胸腔積液/腹水提供可靠的參考依據，具有重要的臨床應用價值。但值得注意的是，為了保證細胞形態學檢查的準確性，建議在采集標本后30 min內盡快送檢，并在1 h內對標本進行固定和處理，并由工作經驗豐富、熟悉掌握細胞形態學特點的同一位檢驗人員完成各項檢測操作，以減少人為因素對檢查結果帶來的干擾，保障臨床診斷結果的準確性。