乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與微血管侵犯的相關性分析

張曉榮，李 微

陜西省榆林市第一醫院：1.檢驗科；2.輸血科，陜西榆林 719000

肝細胞癌是一種惡性程度較高的腫瘤，我國肝細胞癌病死率居世界第2位[1]，臨床多采用手術及肝移植術等方式治療肝細胞癌，但患者術后復發率高，遠期生存率不理想[2]。肝細胞癌患者肝臟組織血供豐富，極易發生微血管侵犯(MVI)[3]，其發生率為30%～60%，并與其病理特征和臨床分期有關，這也是導致肝細胞癌術后復發轉移的重要病理學基礎[4]。MVI是影響肝細胞癌患者術后復發的重要因素，MVI患者術后1、2、3、4年總生存率均明顯低于無MVI患者[5]。隨著人們對乙型肝炎相關肝細胞癌MVI患者血清甲胎蛋白(AFP)、血管內皮生長因子(VEGF)、巖藻糖苷酶(AFU)等血清學指標的研究深入，AFP、VEGF、AFU有望作為預測肝細胞癌MVI的血清學指標。本研究通過檢測乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平，并分析其與MVI的相關性，旨在為臨床治療和預后評估提供指導，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年11月至2019年11月本院收治的235例乙型肝炎相關肝細胞癌患者作為研究對象。納入標準：(1)經CT、磁共振及病理學明確診斷為肝細胞癌，同時符合《慢性乙型肝炎診斷標準(2015年版)》[6]中有關乙型肝炎的診斷標準；(2)患者均接受肝細胞癌根治術治療，同時未接受其他相關治療；(3)符合赫爾辛基實驗準則。排除標準：(1)合并嚴重心、腎等臟器疾病或其他惡性腫瘤者；(2)丙型肝炎、丁型肝炎以及酒精性肝炎等肝病者；(3)遠處轉移者；(4)精神障礙者。根據患者是否發生MVI，將其分為MVI組(108例)和無MVI組(127例)。此外，依據文獻[7]對患者MVI病理特征進行分級，將MVI組進一步分為低危組(M1期，20例)、中危組(M2期，31例)和高危組(M3期，57例)。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，所有患者和家屬均簽署知情同意書。MVI組和無MVI組患者性別、年齡、肝功能分級(Child-Pugh分級)、肝硬化情況、腫瘤位置等基線資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 患者一般資料在MVI組和無MVI組間比較

1.2方法 采集所有研究對象外周靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，取血清，保存于-80 ℃冰箱備用。AFP水平采用化學發光免疫分析儀及配套試劑盒(北京源德生物醫學工程有限公司)進行檢測；VEGF水平采用ELISA試劑盒(美國安迪生物工程有限公司)進行檢測；AFU水平采用生化定量法進行測定，相關試劑盒由四川邁克生物科技股份有限公司提供。

1.3觀察指標 比較MVI組和無MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平；比較不同MVI分級患者血清AFP、VEGF、AFU水平；分析乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI的相關性；分析血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關肝細胞癌患者發生MVI的效能。

2 結 果

2.1MVI組和無MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較 MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平高于無MVI組患者，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 MVI組和無MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較

2.2不同MVI分級患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較 高危組患者血清AFP、VEGF、AFU水平高于低危組、中危組患者(P<0.05)，中危組患者血清AFP、VEGF、AFU水平高于低危組患者(P<0.05)。見表3。

表3 不同MVI分級患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較

2.3乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI發生的相關性分析 Spearman相關分析結果顯示，乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MV發生I均呈正相關(P<0.05)。見表4。

表4 乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI發生的相關性分析

2.4血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關肝細胞癌發生MVI的效能 ROC曲線分析結果顯示，AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關肝細胞癌MVI的曲線下面積(AUC)分別為0.867、0.924和0.904，3項指標聯合診斷的AUC為0.958，均高于單項指標檢測。見圖1、表5。

圖1 血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關肝細胞癌發生MVI的ROC曲線

表5 血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關肝細胞癌發生MVI的效能分析

3 討 論

肝細胞癌是一種常見的原發性肝癌，可能與肝炎病毒感染以及肝硬化有關[8]。人體感染乙型肝炎病毒后，一方面，乙型肝炎病毒DNA可隨機插入人染色體，誘導染色體突變、缺失；另一方面，乙型肝炎病毒能夠激活原癌基因，致使抑癌基因突變，從而在癌變過程中發揮作用，最終誘發肝細胞癌[9]。目前，手術切除和肝移植仍是治療肝細胞癌的主要途徑，但患者術后5年復發率高達70%，肝移植后復發率高達25%[10]。MVI指的是門靜脈分支在顯微鏡下出現癌細胞團的現象，也是肝細胞癌術后復發的獨立危險因素[11]。發現MVI不僅可幫助臨床醫生制訂手術后治療方案，還可指導外科醫生制訂肝移植、肝切除和擴大手術范圍。然而，MVI的診斷仍然依賴于肝切除或肝移植后的病理組織活檢。因此，尋找預測肝細胞癌MVI的血清學指標具有重要意義。

AFP已被證實可作為肝細胞癌及術后無復發生存期的預測指標[12]。血清AFP水平升高，多提示預后不良以及肝細胞癌術后復發[13]。LI等[14]研究顯示，AFP可獨立預測肝細胞癌切除術后患者總生存期和無復發生存期，在腫瘤復發風險較高(出現單個或多個MVI)的患者中，AFP應答者(術后AFP下降程度大于AFP變化最佳臨界值)比無應答者生存率更高。VEGF是一種與血管生長相關的特異性生長因子，可參與維持血管內皮完整，還可調控腫瘤血管形成，與腫瘤侵襲和轉移有關[15]。楊錦鋒等[16]研究顯示，原發性肝細胞癌患者腫瘤組織VEGF表達陽性率明顯高于癌旁組織，且其表達與腫瘤轉移明顯相關。AFU在肝臟組織中表達豐富，一旦肝臟發生癌變，AFU大量釋放進入血液系統，血清AFU水平將明顯上升[17]。相比于健康人群，慢性肝炎、肝硬化以及肝細胞癌患者血清AFU水平均呈升高趨勢[18]。本研究結果顯示，MVI組血清AFP、VEGF、AFU水平明顯高于無MVI組，表明血清AFP、VEGF、AFU水平可能與乙型肝炎相關肝細胞癌MVI有關。同時，隨著肝細胞癌MVI加重，血清AFP、VEGF、AFU水平逐漸上升，表明血清AFP、VEGF、AFU水平可反映肝細胞癌MVI程度，即血清AFP、VEGF、AFU水平越高，肝細胞癌MVI越嚴重。張義等[19]指出，VEGF與肝細胞癌血清AFP水平有關，且VEGF高表達組2年內復發率明顯高于VEGF低表達組，VEGF高表達可能增加肝細胞癌術后短期復發風險。故AFP、VEGF、AFU可作為預測肝細胞癌MVI的血清學指標。

相關性分析結果顯示，乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI均呈正相關，表明乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平能夠在一定程度上反映肝細胞癌MVI程度，可作為診斷肝細胞癌MVI的血清學指標。ROC曲線分析結果顯示，AFP、VEGF、AFU聯合檢測診斷乙型肝炎相關肝細胞癌MVI的AUC明顯高于各指標單獨檢測，表明聯合檢測有助于提高對肝細胞癌MVI的診斷效能。臨床通過監測肝細胞癌術后患者血清AFP、VEGF、AFU水平，可盡早篩選出MVI高?；颊?，從而及時實施針對性治療，以改善患者預后。但本研究收集樣本量有限，所得結論可能存在一定偏倚，后續工作中有待進一步增大樣本量，以充分證實以上結論的可靠性。

綜上所述，乙型肝炎相關肝細胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平明顯上升，其水平與肝細胞癌MVI呈正相關，聯合檢測血清AFP、VEGF、AFU對于診斷乙型肝炎相關肝細胞癌MVI具有較高的效能。