自身抗體及生化指標在成人隱匿性自身免疫性糖尿病診斷中的檢驗效果分析

王佳佳，林潔，肖小芬

廈門大學附屬中山醫院臨床檢驗中心，福建廈門 361004

在2019年，世界衛生組織對糖尿病分型標準進行重新界定，將成人隱匿性自身免疫性糖尿病（LADA）命名為“成人緩慢進展的免疫介導性糖尿病（slowly evolving,immune-mediated diabetes of adults）[1]”，屬于混合型糖尿病的一個亞型（不同于之前定義的“屬于1型糖尿病的1個亞型”）。為了幫助LADA患著制定適合其機體情況的糖尿病治療方案，首先需要確定其疾病類型。目前，臨床診斷LADA疾病的方法為：根據患者服藥一段時間后出現的有別于1型糖尿病的反應，將懷疑重點調整為LADA。基于此種方式確診LADA的準確性雖然較高，但容易錯過最佳治療時間，進而造成患者胰島β功能衰退速度更加迅速[2]。除了上述方式之外，檢測患者的胰島自身抗體及相關生化指標具備可行性。該研究以該院2019年1月—2020年12月收治的70例LADA患者為例，重點分析胰島自身抗體及生化指標在成人隱匿性自身免疫性糖尿病診斷中的檢驗效果，現整理研究過程，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院內分泌科70例已經確診為LADA的患者全部納入觀察組，男女比為41∶29，年齡41～58歲，平均（43.29±8.67）歲；另選取同時期在該院接受治療，且已經確診為2型糖尿病的患者70例，全部納入對照組，男女比為40∶30，年齡42～59歲，平均（43.37±8.91）歲。經比對，兩組患者的性別、年齡的分布情況差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

納入標準：①起病階段被診斷為2型糖尿病，初期口服降糖藥物能夠有效控制自身血糖，但在連續服藥6～12個月后，在無其他誘因出現時，感到原有治療方案無法有效控制血糖，前來該院接受檢查，最終確診為LADA（自身免疫功能和胰島β細胞功能進行性、緩慢減退）的患者；②所有患者（及家屬）均知悉該研究，自愿參與并簽署知情同意書；③研究開展期間，能夠遵從醫護人員指引行事的患者；④具備良好的溝通能力，能夠及時將機體所有與LADA疾病有關的信息向醫護人員清晰反饋的患者；⑤該院醫學倫理委員會對該研究予以支持[3]。

排除標準：①確診為1型、2型糖尿病（相關治療方案連續使用1年以上，在無其他誘因出現時，能夠將機體血糖水平控制在良好范圍內）的患者；②確診為妊娠期糖尿病、特殊原因糖尿病的患者；③因多種原因（如頭部遭受鈍器擊打、患有精神分裂癥等）導致思維意識混亂、喪失，無法與醫護人員有效交流的患者；④患有艾滋病等其他免疫系統缺陷疾病的患者；⑤對該研究不予認可，無法有效配合的患者[4]。

1.2 方法

兩組患者均接受胰島素自身抗體及生化指標檢測，具體流程如下。

1.2.1 胰島自身抗體檢測 免疫印跡法，使用深圳伯勞特生物制品有限公司生產的糖尿病自身抗體免疫印跡試劑盒。①取患者靜脈血2～5 mL，放置于試管，待凝固后進行離心作業，成功分離處血清后，放置于2～8℃的環境下存放備用；若24 h內無法測試，則應放置于-20℃的冰箱內保存。使用前，應注意觀察標本內是否出現絮狀物或霉變、溶血現象，避免測試結果受影響[5]。②配置洗滌應用液。向25 mL濃縮洗滌液內加入適量蒸餾水或離子水，稀釋至500 mL后放入試劑瓶中備用。③選取樣品稀釋液1 mL和10μl待檢血清，放入帶有印跡膜條的反應槽之中。④將反應槽放置于搖床上，在室溫（25℃）環境下搖動30 min。⑤向反應槽內加入1 mL洗滌用應用液，經過1 min后，去除反應槽液體，該過程持續4次，最后在吸水紙上拍干液體。⑥相反應槽中加入20μl酶聯試劑和1 mL樣品稀釋液，重復步驟④、⑤。⑦相反應槽中加入兩種顯色劑A和B，均為0.5 mL。⑧在搖床上搖動5 min，顯色。⑨等待待質控帶和陽性區帶顯色清洗后，加入0.5 mL終止液，搖動2 min。⑩使用自來水沖洗槽中的液體，取出印跡膜條，放在吸水紙上，干后進行對照觀察。

1.2.2 生化指標檢測 抽取患者的靜脈血后：①使用Beckman coulter貝克曼庫爾特公司生產的型號為AU5800的全自動生化分析儀檢測患者的血糖；②使用東曹株式會社生產的型號為HLC-723G8的全自動糖化血紅蛋白分析儀檢測患者的檢測糖化血紅蛋白項目；③使用Roch羅氏公司生產的型號為cobas 8000 e601的全自動化學發光免疫分析儀進行C肽檢測[6]。

1.3 觀察指標

①胰島素自身抗體檢測：共計3項內容：①胰島素自身抗體（IAA）；②谷氨酸脫羧酶抗體（GADA）；③抗胰島素細胞抗體（ICA）[4]。基于3項指標的具體值，評估患者是否為LADA陽性[7]。

②生化指標檢測具體內容：3項血糖常規檢測，即空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白。在上述3項指標的基礎上，還需增加空腹C肽和餐后2小時C肽兩項指標，分別進行組間和組內比對[8-9]。

1.4 統計方法

采用SPSS 23.0統計學軟件處理數據，計量資料以（x±s）表示，組間差異比較采用t檢驗；計數資料以[n（%）]表示，組間差異比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者基于胰島自身抗體的LADA陽性檢出情況對比

觀察組患者IAA、GADA、ICA，3項指標的陽性檢出率分別為34.29%、47.14%、42.86%，均高于對照組的1.43%、0.00%、1.43%，差異有統計學意義（χ2=25.760、43.178、38.845，P＜0.001），見表1。

表1 兩組患者基于胰島自身抗體的LADA陽性檢出情況對比[n（%）]

2.2 兩組患者生化指標檢測結果對比

觀察組患者的空腹血糖和餐后2 h血糖相比，差異無統計學意義（t=0.056，P=0.956）；對照組患者的空腹血糖水平顯著低于餐后2 h血糖，差異有統計學意義（t=5.403，P＜0.05）。觀察組患者的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。觀察組患者的空腹C肽及餐后2 hC肽水平均明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者生化指標檢測結果對比（x±s）

3 討論

成人隱匿性自身免疫性糖尿病（LADA）的臨床特征介于1型及2型糖尿病之間，起病初期的相關癥狀、治理方法等均類似于2型糖尿病；隨著疾病的進展，由于患者機體的胰島β細胞功能發生進行性退化，相關特征會偏向1型糖尿病。因此，該病被形象地稱為“1.5型糖尿病”[10]。目前可知，①與其他糖尿病患者相同，LADA患者也具備多飲、多食、多尿、體重減少等典型的“三多一少”癥狀[11]。②由于自身免疫功能對胰島β細胞的破壞，故患者機體內會產生大量胰島自身抗體[11-12]。該特點與1型糖尿病相似，即患者機體無法分泌充足的胰島素，隨著病情的進展，治療方案需要調整，最終必須接受胰島素治療[13-14]。③LADA患者的胰島β細胞功能減退速度存在差異，故不同個體之間在臨床表現方面存在較大的異質性。如部分患者按照常規2型糖尿病方案服藥6個月后，血糖水平便無法得到有效控制；而另一些患者可能在數年時間內都無需改變初始的治療方案。④LADA患者的胰島素抵抗類似于2型糖尿病。由此可見，LADA兼具1型、2型糖尿病的特點。由于胰島β細胞會受到持續性破壞，故LADA患者血糖的波動性普遍高于2型糖尿病[15-16]。

該研究結果顯示：①觀察組患者IAA、GADA、ICA，3項指標的陽性檢出率分別為34.29%、47.14%、42.86%，與對照組相比差異有統計學意義（P＜0.001）；②觀察組患者的空腹血糖和餐后2 h血糖相比，差異無統計學意義（P>0.05）；對照組患者的空腹血糖水平顯著低于餐后2 h血糖（P＜0.05）；③觀察組患者的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白水平均高于對照組（P<0.05）；④觀察組患者的空腹C肽及餐后2 hC肽水平均明顯低于對照組（P<0.05）。上述結果與山東省淄博市市立醫院檢驗科醫師李秀平[17]的結果類似。其研究報告中，LADA患者共計39例，納入LADA組；2型糖尿病患者51例，納入2型糖尿病組。檢測結果顯示：2型糖尿病組FPG、2 hPG、HbA1c、空腹C肽、餐后2 hC肽分別為（9.09±2.13）mmol/L、（12.18±1.25）mmol/L、（8.64±1.28）%、（1.26±0.29）ng/mL、（3.46±1.83）ng/mL；LADA組FPG、2 hPG、HbA1c、空腹C肽、餐后2 hC肽分別為（13.15±3.07）mmol/L、（13.20±1.17）mmol/L、（9.55±1.57）%、（0.41±0.24）ng/mL、（1.43±0.11）ng/mL，兩組差異有統計學意義（P＜0.05）[18]。

綜上所述，針對LADA疾病的治療除了控制血糖之外，還需對患者胰島β細胞功能的衰退速度進行抑制。因此，早發現、早治療十分關鍵。該研究結果顯示，單獨進行胰島自身抗體時，檢測陽性率均未超過50%；生化指標檢測結果顯示，LADA患者的空腹及餐后2 h血糖水平明顯有別于2型糖尿病患者。基于此，將兩種檢測方式聯合使用，有助于提高檢測準確率。