李雪瑩, 武永剛
(山東中醫藥高等專科學校, 山東 煙臺 264199)
北沙參為常用中藥,有養陰清肺、益胃生津之功效,臨床可用于治療肺燥、熱病或久病導致肺陰虧耗、干咳、痰少等病癥,以及治療胃陰虛、內熱盛所導致的口干、嘈雜等。北沙參來源于傘形科植物珊瑚菜(GlehniaJittoralisFr. Schmidit ex Miq.)的干燥根,在臨床上常出現把迷果芹(Sphallerocarpusgracilis)、硬阿魏(Ferulabungeanum)、明黨參(ChangiumsmyrnioidesWolff)、田貢蒿(CarumburiaticumTurcz.)、川明參(ChuanminshenviolaceumSheh et Shan)誤當北沙參使用。因此,研究掌握北沙參準確、有效的鑒別方法對于保障臨床用藥安全具有十分重要的意義。因此,現闡述北沙參性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別等經典鑒別方法及碳-13核磁共振指紋圖譜、ITS2條形碼和聚丙烯酞胺凝膠電泳等現代鑒別方法,供生產、應用者參考。
經典鑒別方法簡便、易行、迅速,不僅能鑒定北沙參的真偽優劣,還可以判斷藥材的品質和道地性,方法主要包括性狀鑒別、顯微鑒別和理化鑒別。
易與北沙參混淆的中藥材有迷果芹、硬阿魏、明黨參、田貢蒿及川明參等,俗稱北沙參偽品。仔細辨別,各有其性狀特征。
1.1.1 正品 北沙參呈細長圓柱形,表面淡黃白色,未去凈栓皮顯黃棕色。全體有細縱皺紋及縱溝,上端具根莖殘基,稍細,中部略粗,下部漸細。質硬脆,易折斷,斷面皮部淡黃白色,中央有黃色放射狀的木質部,習稱金井玉欄。氣特異,味微甘。
1.1.2 偽品 迷果芹,呈長圓柱形,表面黃白色,根頭可見莖殘基,根頭部具密環紋,表面有明顯縱皺和橫長皮孔樣突起,質柔潤,斷面致密,淡黃白色,木部黃色,具菊花心;氣微,味微甜,嚼之有胡蘿卜味[1]。
硬阿魏,呈長圓柱形,體輕,質脆,易折斷,斷面皮部色較深,可見放射狀紋理,木部為致密的放射狀紋理;氣特異,味似胡蘿卜,微甜。
明黨參,呈細長圓柱形、不規則條形或長紡錘形,質硬脆,斷面呈角質樣,皮部較薄,黃白色,有時易與木部分離,木質部呈類白色;氣微,味淡。
田貢蒿,呈長圓柱形,表面黃白色,根頭部可見密集環紋,質硬脆,斷面具角質樣光澤,皮部黃白色,易與木部剝離,木部淡黃色;氣特異,味淡、微甘。
川明參,呈長條形,下端略細;表面黃白色至淡棕黃色,上端細環紋;質硬而脆,易折斷,斷面黃白色,具角質樣光澤,皮部有數圈白色的層狀環紋,木部具放射狀紋理;氣微,味淡,嚼之發黏。
迷果芹、硬阿魏、明黨參、田貢蒿及川明參等北沙參偽品橫切面顯微鑒別呈現結果各不相同。
1.2.1 正品 北沙參正品根橫切面顯微鑒別呈現出外皮已除去,韌皮部寬廣,外側篩管常頹廢成條狀,有分泌管散列,內含黃色分泌物,形成層環狀;木質部射線長2~5列細胞,木質部束多呈“V”字形。
1.2.2 偽品 迷果芹橫切面,表面木栓層偶有殘存,皮層較窄,外側有少數分泌腔散列,韌皮部較寬廣,形成層環不明顯;木質部導管多單個,導管混亂狀存在[2]。
硬阿魏橫切面,木栓層偶有殘存,皮層較寬,占橫切面的2/3以上,皮層中分布較多樹脂道,樹脂道形狀不規則,內皮層明顯;木質部斷面中部呈三角狀分布,韌皮部分布于木質部之間與其交替生長。
明黨參橫切面,木栓層偶有殘存,皮層較窄,有少數分泌道散在;韌皮部寬廣,有多數分泌道分布,分泌道由5~7個分泌細胞圍繞而成,內含黃色分泌物,形成層成環;木質部導管單個散在或2~5個相聚,放射狀排列。
田貢蒿橫切面,木栓層偶有殘存,皮層窄,韌皮部寬廣,射線寬為2列細胞,多彎曲;分泌管內含黃棕色分泌物,形成層環明顯,木質部導管放射狀排列。
川明參橫切面,木栓層偶有殘存,皮層數十列細胞,有多數分泌道散在;韌皮部寬廣,外側有多數分泌道散在;導管呈放射狀排列,單個散在或數個相聚。
王琳[2]研究發現,北沙參供試品色譜與對照品色譜在對應位置上能顯示相同顏色的熒光斑點,而迷果芹、硬阿魏、田貢蒿、明黨參、川明參供試品色譜與對照藥材色譜則無相同顏色的熒光斑點,以此可鑒別出北沙參正品與偽品。蘇星等[3]利用薄層色譜法對10批來自不同采集地的北沙參藥材以及3批山東萊陽北沙參藥材進行定性鑒別,建立了北沙參藥材的薄層色譜指紋圖譜,該方法對北沙參的真偽鑒別及質量控制具有一定意義。謝敏等[4]以歐前胡素和異歐前胡素為對照,利用薄層色譜對北沙參和迷果芹根進行了鑒別。
現代鑒別方法主要是通過現代技術手段對北沙參真偽進行判斷,從而更準確地區分北沙參的正品與偽品。
劉靜等[5]通過將北沙參藥材提取物的碳-13核磁共振指紋圖譜與其特征區域的共振峰有效結合,認為碳-13核磁共振指紋圖譜可以作為北沙參真偽鑒別的依據。
李忠祥等[6]通過對不同產地北沙參及其混淆品的ITS2分子鑒定,結果表明不同產地北沙參的ITS2序列一致,并且從系統發育樹(NJ樹)可明顯區分北沙參及其混淆品。
石俊英等[7]采用聚丙烯酞胺凝膠電泳法對中藥北沙參進行鑒別研究,在北沙參電泳圖譜中可見13條譜帶。李寶國[8]標定出共有峰作為北沙參指紋圖譜的基本峰,較全面地建立完善了山東道地藥材北沙參的HPLC指紋圖譜。
采用指紋圖譜、高效液相色譜(HPLC)等技術也可直接或間接對北沙參真偽進行鑒別,為北沙參的定性及含量測定等提供了科學依據,同時為其質量標準的制定提供了參考依據[8-10]。
《本草求真》中記載,沙參有南、北二種,均有清養肺胃之功。北沙參質堅性寒,富有脂液;南沙參空松而肥,氣味輕清,體虛力微。北沙參養陰清肺、益胃生津,用于肺熱燥咳、勞嗽痰血、熱病、津傷口渴。南沙參養陰清肺、化痰、益氣,用于肺熱燥咳、陰虛勞咳、干咳痰粘、氣陰不足煩熱口干。因此,對于南沙參與北沙參的鑒別可通過臨床療效加以區分[11-12]。
目前,中藥材北沙參的鑒別主要有性狀鑒別、顯微鑒別、色譜鑒別等經典鑒別方法及其碳-13核磁共振指紋圖譜、ITS2條形碼和聚丙烯酞胺凝膠電泳等現代鑒別方法,應用鑒別法不常用。研究認為,不同鑒別方法各有優點,同時也存在各自不足之處。傳統性狀鑒別法雖然具有簡便、直觀的優點,但難以對外觀性狀相似的正品與偽品進行有效區分。顯微鑒定方法對組織構造特征明顯不同偽品的鑒定準確有效,但是樣品處理過程比較復雜繁瑣。薄層色譜鑒別方法具有一定的局限性,高效液相色譜法用于北沙參真偽的鑒別具有準確、重現性好的優點,但需要一定的前期研究作為基礎。碳-13核磁共振指紋圖譜技術用于北沙參的真偽鑒別可以有效避免原材料的浪費,但核磁共振需要的儀器價格比較昂貴,故具有一定的局限性。ITS2條形碼技術DNA分子信息量大,不受鑒定者個人的主觀因素和固有經驗的影響,結果準確可靠。綜上所述,在北沙參藥材實際鑒定工作中,應多種方法相互補充,相輔相成,建議在北沙參的鑒別中以性狀鑒別結合HPLC指紋圖譜為主,以顯微鑒別和薄層色譜分析為輔的鑒定方法。