淺析自身免疫性疾病抗體譜及其實(shí)驗(yàn)室檢測進(jìn)展

卞曉楠

（南通市第六人民醫(yī)院 江蘇南通 226000）

【關(guān)鍵字】 自身免疫性疾病；抗體譜；實(shí)驗(yàn)室檢測；進(jìn)展

引言

自身免疫性疾病是臨床上經(jīng)常出現(xiàn)的機(jī)體對自身抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)，造成自身組織損害的疾病。隨著近些年醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和進(jìn)步，越來越多的病癥被納入到自身免疫性疾病范圍，其與自身抗體的存在屬于兩個(gè)不同的概念，無自身免疫性疾病的正常人或老年人體內(nèi)都存在自身抗體，如細(xì)胞核DNA 抗體、甲狀腺上皮細(xì)胞抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體、胃壁細(xì)胞抗體等。很多情況下，機(jī)體在受損或抗原性變化激發(fā)下容易產(chǎn)生自身抗體，但是這一產(chǎn)生過程屬于繼發(fā)性免疫反應(yīng)，不會出現(xiàn)致病作用，與自身免疫性疾病有所不同。因此，臨床上將診斷自身抗體作為自身免疫性疾病診斷的重要依據(jù)，不同的自身免疫性疾病會呈現(xiàn)出不同的自身抗體譜特征，成為生物學(xué)早期診斷重要指標(biāo)，而當(dāng)在患者血液中檢測得到高效自身抗體則成為了臨床對自身免疫疾病進(jìn)行確診的關(guān)鍵依據(jù)。一些存在的自身抗體具有高度特異性，對臨床診斷工作具有重要參考價(jià)值，從而成為了重要的自身免疫性疾病診斷指標(biāo)。

自身免疫抗體譜也叫抗核抗體譜，是細(xì)胞內(nèi)全部抗原的自身抗體的總和，靶抗原分布于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞骨架和細(xì)胞分裂周期，按核內(nèi)各個(gè)分子性能不同將其區(qū)分，每大類又由不同抗原再分為許多種類，形成自身免疫抗體譜，為各種自身免疫性疾病的診斷提供臨床依據(jù)。常見的有SS-A 抗體，SS-B 抗體，Sm 抗體，SCL-70 抗體，抗DS-DNA 抗體等。

1 臨床常見自身免疫性疾病及其自身抗體譜

1.1 自身免疫性肝病及其自身抗體譜

臨床上將受到自身免疫反應(yīng)影響產(chǎn)生的不明原因肝臟疾病歸結(jié)為自身免疫性肝病，主要可以分為原發(fā)硬化性膽管炎、自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化和重疊綜合癥等情況。在這些種類的肝臟疾病臨床診斷過程中，均需要通過對自身抗體的檢測來發(fā)揮作用。在自身免疫性肝炎中最常見的便是將抗核抗體作為自身抗體，特別是在I 型自身免疫性肝炎中會與抗平滑肌抗體同步檢測到具有突出的特異性，同時(shí)在很多結(jié)締組織疾病中也會有所表現(xiàn)。在II 型自身免疫性肝炎中，最常見的自身抗體為抗肝溶質(zhì)抗原I 型抗體和抗肝腎微粒體抗體。而在III 型自身免疫性肝炎中，最突出的特異性指標(biāo)是肝胰抗原抗體和可溶性肝抗原抗體。如果出現(xiàn)高低度抗線粒體抗體，則標(biāo)志極大可能存在原發(fā)性膽汁性肝硬化，如果出現(xiàn)核周型抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體，則標(biāo)志極大可能存在原發(fā)性硬化性膽管炎。

1.2 血管炎及其自身抗體譜

業(yè)內(nèi)將抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體簡稱為ANCA，其也是一種自身抗體，主要將單核細(xì)胞胞漿和中性粒細(xì)胞胞漿的有關(guān)成分作為靶抗原，是臨床上進(jìn)行結(jié)締組織炎性腸病系統(tǒng)性血管炎等疾病診斷工作的重要參考指標(biāo)，可以通過間接免疫熒光檢測法進(jìn)行不同熒光模型的檢測，如通過蛋白酶3 靶抗原進(jìn)行抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體檢測，或通過髓過氧化物酶靶抗原進(jìn)行抗中性粒細(xì)胞核周抗體檢測，通過對胞漿抗體和核周抗體的檢測，實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞胞質(zhì)抗體的初步判斷。

1.3 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎RA 及其自身抗體譜

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎屬于慢性進(jìn)行性關(guān)節(jié)病，患者可能伴有血管炎、貧血、淋巴結(jié)腫大等多重表現(xiàn)。在血清中存在多種自身抗體，如不及時(shí)治療，容易反復(fù)發(fā)作，最終導(dǎo)致機(jī)體關(guān)節(jié)變形或功能喪失。此類患者的血液中常伴有高滴度自身抗體和許多循環(huán)免疫復(fù)合物，因此在治療時(shí)需選用免疫凈化方法去除血漿中的過高免疫球蛋白和自身抗體等免疫復(fù)合物，改善機(jī)體B 細(xì)胞和T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等功能，降低血液粘滯度，提高藥物療效。其中與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷特異性最突出的是抗CCP 抗體，因此臨床上常將其用于早期診斷，后期可通過多種抗體如類風(fēng)濕因子RF 與CCP 抗體進(jìn)行綜合診斷應(yīng)用，以提升診斷正確性。

1.4 自身免疫性糖尿病及其自身抗體譜

在對糖尿病自身抗體的檢驗(yàn)中一般包括三項(xiàng)，即：抗胰島素自身抗體（IAA）為未曾用過外源性胰島素的患者體內(nèi)可與胰島素相結(jié)合的自身抗體，IAA 的產(chǎn)生與1 型糖尿病的發(fā)生有顯著相關(guān)性。胰島細(xì)胞抗體（ICA），胰島素依賴型糖尿病患者中，抗胰島細(xì)胞抗體的發(fā)生率在90%以上，通常在確診一年后該抗體水平下降。ICA 可早期發(fā)現(xiàn)1 型糖尿病。非胰島素依賴型糖尿病患者出現(xiàn)抗胰島細(xì)胞抗體陽性，可能會發(fā)生胰島素依賴型糖尿病（IDDM）。ICA 能夠在臨床表現(xiàn)IDDM 癥狀前被檢測，所以它可作為IDDM 的早期指標(biāo)及防治手段。GAD 是使谷氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)樯窠?jīng)質(zhì)γ-氨基丁酸的生物合成酶，廣泛存在于動物及人的腦和胰島組織中。GAD 可能是糖尿病自身免疫反應(yīng)的始動靶抗原，可用于1 型糖尿病的鑒別診斷和預(yù)測。對糖尿病高危人群進(jìn)行這三種自身抗體（ICA、IAA 和GAD）的篩查，有助于防止或減慢糖尿病的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，自身抗體為陽性者，通常在之后的5～7 年內(nèi)發(fā)生IDDM。

1.5 胃腸疾病自身抗體譜

臨床上對胃腸疾病和消化系統(tǒng)疾病的體外定性檢測一般是通過對血清中特定物質(zhì)的檢測來實(shí)現(xiàn)的，這些特征性物質(zhì)主要包括抗內(nèi)因子抗體、抗釀酒酵母抗體、麥膠蛋白抗體、抗壁細(xì)胞抗體等。同時(shí)還可以同步完成對自身免疫性胃炎、炎性腸病、惡性貧血等一系列消化系統(tǒng)疾病的診斷，具有較高的臨床診斷價(jià)值。

1.6 抗磷脂抗體綜合征（APS）自身抗體譜

抗磷脂抗體綜合征臨床上又稱為Hoghes 綜合征，一般表現(xiàn)為流產(chǎn)、血小板減少、妊娠病態(tài)或血栓形成時(shí)間，很多會伴有血清中存在抗磷脂抗體（APL）。血栓一般會在中小血管中最先形成，在患者動脈或靜脈均有可能出現(xiàn)，且靜脈血栓所見更多，相關(guān)表現(xiàn)也可能復(fù)合呈現(xiàn)。臨床上對抗磷脂抗體綜合征的診斷一般通過抗心磷脂抗體、狼瘡抗凝物、抗β2糖蛋白等來實(shí)現(xiàn)。

2 自身抗體的實(shí)驗(yàn)室檢測及進(jìn)展

臨床上在進(jìn)行自身抗體實(shí)驗(yàn)室檢測時(shí)，一般通過酶聯(lián)免疫吸附法、膜條免疫印跡法和間接免疫熒光法來實(shí)現(xiàn)。其中：第一種方法具有客觀和靈敏的特點(diǎn)，能夠同步對機(jī)體的抗體水平實(shí)現(xiàn)定量檢測；第二種方法是部分病癥的主要測定方法，通過硝酸纖維膜上平行包被抗原進(jìn)行的純化鑒定，具有臨床操作簡便的特點(diǎn)，便于實(shí)驗(yàn)室檢測過程；第三種方法則是當(dāng)前臨床上最常用的進(jìn)行自身抗體檢測的方法，也是經(jīng)過業(yè)內(nèi)反復(fù)試驗(yàn)得到的進(jìn)行自身抗體檢測的基本方法。有條件時(shí)可以在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行間接免疫熒光法與其他方法的聯(lián)合使用，從而更好地確認(rèn)自身抗體基本情況。

隨著當(dāng)前越來越多的納米技術(shù)、芯片技術(shù)和微流體技術(shù)不斷發(fā)展與應(yīng)用，在進(jìn)行自身抗體檢測的過程中，已經(jīng)逐步呈現(xiàn)出微型化的趨勢，一定程度上推動了自身抗體譜相關(guān)實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)的發(fā)展和進(jìn)步。當(dāng)前在該領(lǐng)域發(fā)展的芯片技術(shù)主要分為微流控和微陣列兩個(gè)種類，微流控芯片技術(shù)主要通過微加工方式，在面積約為一平方厘米的范圍內(nèi)，通過巧妙的布局實(shí)現(xiàn)樣品的微型檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)過程，在近些年的業(yè)內(nèi)發(fā)展中備受關(guān)注，也被公認(rèn)為具有較強(qiáng)的發(fā)展?jié)摿Γ軌蛲ㄟ^微通道的設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)抗體和試劑的合理引入，從而對樣品進(jìn)行處理和分離，適用于對血液和其他樣品的物質(zhì)檢測。微陣列是以傳統(tǒng)免疫芯片技術(shù)為基礎(chǔ)進(jìn)行的微型化、自動化、高通量分析過程，主要基于抗原和抗體的特異性來進(jìn)行檢驗(yàn)過程。隨著后續(xù)納米材料的不斷發(fā)展與進(jìn)步，相關(guān)成像技術(shù)、生物傳感技術(shù)也將在自身免疫性疾病抗體檢驗(yàn)過程中不斷發(fā)揮著作用。

3 自身免疫性疾病實(shí)驗(yàn)室檢測新進(jìn)展

從最新的自身免疫性疾病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)情況來看，目前業(yè)內(nèi)從特異性t 淋巴細(xì)胞的檢驗(yàn)方面進(jìn)行了積極的探索，通過四聚體技術(shù)使檢驗(yàn)特異性t 淋巴細(xì)胞技術(shù)出現(xiàn)了新的進(jìn)展，準(zhǔn)確判斷抗原與自身反應(yīng)性T 細(xì)胞的相遇過程，從而幫助探究自身免疫疾病的發(fā)病機(jī)理，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)室的診斷過程拓展新的方向。

結(jié)語

綜上所述，對抗體譜的研究是醫(yī)學(xué)界探索自身免疫性疾病診斷的一個(gè)重要的發(fā)展方向，經(jīng)過近些年實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)的不斷發(fā)展與應(yīng)用，當(dāng)前臨床上已經(jīng)能夠?qū)崿F(xiàn)多項(xiàng)自身免性疾病的準(zhǔn)確診斷，借助相關(guān)自身抗體譜的特異性表現(xiàn)，為疾病診斷的準(zhǔn)確性和便捷性奠定基礎(chǔ)。目前業(yè)內(nèi)在自身抗體的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方面仍在不斷進(jìn)行研究機(jī)理和科學(xué)技術(shù)的發(fā)展與探索，相信隨著越來越多先進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用，一定會在自身免疫性疾病的診斷中發(fā)揮出更多的作用，取得更佳的診斷效果。