O型血孕婦產前不規則抗體效價與ABO型新生兒溶血癥關系研究

李彩梅，席真艷

(榆林市第二醫院輸血科，陜西 榆林 719000)

ABO型新生兒溶血癥(ABO hemolytic disease of newborn，ABO-HDN)是母體對胎兒紅細胞發生同種免疫反應所致的溶血性疾病，嚴重者可引起核黃疸、膽紅素腦病，死亡風險高，因此如何有效防治ABO-HDN至關重要[1-3]。ABO血型系統以外的所有紅細胞血型抗體稱為不規則抗體，其可通過母嬰血型不合妊娠、輸血等免疫刺激產生的IgG抗體經胎盤進入胎兒血液循環，再通過網狀內皮系統破壞血型不相容的胎兒紅細胞[4-5]。因此，對孕產婦開展產前不規則抗體(IgG抗A/B效價)檢測十分必要，也是臨床防治ABO-HDN的重要手段之一[6-7]。鑒于此，本研究將接受IgG抗A/B效價篩查的O型血孕婦作為研究對象，回顧性分析其IgG抗A/B效價檢測結果，明確O型血孕婦產前IgG抗A/B效價與ABO-HDN的關系，為ABO-HDN的臨床防治提供參考意見。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年12月至2019年12月在本院接受IgG抗A/B效價檢測的孕婦為研究對象。納入標準：孕婦血型為O型；臨床資料完整，能夠滿足研究需求。排除標準：夫婦血型為O-O型。最終納入1578例，其中年齡20～39歲，平均(30.17±2.05)歲；孕齡16～40周；夫婦血型A-O型694例，B-O型530例，AB-O型354例；56例孕婦的患兒出生后發生黃疸，母體IgG抗A/B效價高，新生兒血型鑒定明確為母嬰ABO血型不合，間接膽紅素增高，新生兒直接抗球蛋白實驗(陽性提示紅細胞表面包被不完全抗體)、游離實驗(陽性提示血清中存在游離IgG抗體)和放散實驗(陽性提示紅細胞膜上有抗體吸附)實驗中任意1項陽性，臨床確診為ABO-HDN。

1.2 研究方法 采集孕婦凝血、抗凝血2 ml血液樣本，EDTA-K2抗凝，制備血清、0.8%紅細胞懸液備用。微柱凝膠法檢測IgG抗A/B血型效價，篩查母體不規則抗體，不規則抗體篩檢卡(國械注準20163400856)、HDN母體IgG抗A/B效價檢測卡(國械注準20163400869)均購自江蘇力博醫藥生物技術有限公司，所有操作均嚴格參照試劑盒說明書。將經2-巰基乙醇處理后的血清用0.9%氯化鈉溶液進行倍比稀釋，再將0.8%紅細胞懸液(A或B)加入微柱凝膠卡反應室。加入倍比稀釋后的血清各50 μl，37 ℃條件下孵育15 min后離心15 min，觀察其凝集情況。陽性標準：1+凝集強度，此血清稀釋倍數的倒數則為IgG抗A/B效價。

1.3 觀察指標 ①比較不同夫婦血型中IgG抗A/B效價篩查結果及發生ABO-HDN孕婦中不同IgG抗A/B效價占比。②以ABO-HDN是否發生為條件將研究對象分為ABO-HDN組和非ABO-HDN組，比較兩組孕婦臨床資料，包括年齡、妊娠次數、孕齡、新生兒性別、分娩方式及IgG抗A/B效價，并分析ABO-HDN發生的影響因素。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0統計學軟件進行分析。計數資料以[例(%)]表示，比較采用χ2檢驗或秩和檢驗。IgG抗A/B效價與ABO-HDN的關系采用Logistic回歸分析。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 1578例O型血孕婦IgG抗A/B效價篩查結果 見表1。1578例O型血孕婦中，IgG抗A/B效價≥256者占比45.44%(717/1578)。夫婦血型A-O型、B-O型、AB-O型中，IgG抗A/B效價≥256者占比分別為49.86%(346/694)、41.89%(222/530)、42.09%(149/205)。不同夫婦血型中IgG抗A/B效價≥256者占比比較差異有統計學意義(χ2=9.754，P=0.008)，A-O型中IgG抗A/B效價≥256者占比顯著高于B-O型和AB-O型(H=10.224、11.663，均P=0.001)。

表1 1578例O型血孕婦IgG抗A/B效價篩查結果[例(%)]

2.2 發生ABO-HDN孕婦中不同IgG抗A/B效價占比比較 發生ABO-HDN的孕婦中，IgG抗A/B效價≥256者占比98.21%(55/56)，而IgG抗A/B效價<256者僅占1.19%(1/56)，前者明顯高于后者(χ2=104.143，P=0.000)。

2.3 ABO-HDN組和非ABO-HDN組孕婦臨床資料比較 見表2。兩組孕婦年齡、孕齡、新生兒性別、分娩方式比較差異無統計學意義(均P>0.05)，但妊娠次數、IgG抗A/B效價比較差異有統計學意義(均P<0.05)。

2.4 ABO-HDN發生影響因素分析 見表3。以ABO-HDN為因變量(是=1，否=0)，將妊娠次數(1次=0，>1次=1)、IgG抗A/B效價一(<256=0，256=1，512=2，≥1024=3)、IgG抗A/B效價二(<256=0，≥256=1)作為協變量，進行Logistic回歸分析。結果顯示，妊娠次數>1次、IgG抗A/B效價≥256是ABO-HDN發生的獨立影響因素，其中妊娠次數>1次是保護因素。

表2 ABO-HDN組和非ABO-HDN組

表3 ABO-HDN發生影響因素分析

3 討 論

ABO-HDN是因母嬰血型不合，母親對胎兒紅細胞發生同種免疫反應所引起的溶血性疾病，重癥可引發核黃疸，甚至致死[8-9]。機體紅細胞血型系統極為復雜，包括ABO、Rh、P、MN等多個血型系統，臨床將ABO血型抗體以外的所有紅細胞抗體均定義為不規則抗體，即不符合Landsteiner法則的抗體，包括完全抗體(IgM)及不完全抗體(IgG)[10-11]。既往研究[12-13]報道，正常人群中不規則抗體陽性率約0.3%～2%。妊娠、輸血免疫刺激則均是不規則抗體產生的重要原因，不規則抗體IgG可經胎盤進入胎兒血液循環，破壞紅細胞，最終引起HDN，以胎兒或嬰兒水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大為主要臨床表現，嚴重者可并發膽紅素腦病，預后不良[14-15]。同時，產后出血是產科常見并發癥，也是導致產婦死亡的重要原因，而選擇相配合的血液制劑則是贏得寶貴搶救時間的關鍵，因此對孕婦開展不規則抗體篩查十分必要，不僅可降低HDN發生風險，亦是為產婦輸血提供參考依據。

本研究1578例O型血孕婦中，IgG抗A/B效價≥256者占比45.44%，夫婦血型A-O型、B-O型、AB-O血型中IgG抗A/B效價≥256者占比分別為49.86%、41.89%、42.09%，這與房篤智等[16]報道的45.69%接近。A-O型中，IgG抗A/B效價≥256者占比顯著高于B-O型和AB-O型，提示血型可能與O型血孕婦血清IgG抗體效價存在一定關聯，這與葉海輝等[17]的報道存在差異。另外，56例發生ABO-HDN的孕婦中，IgG抗A/B效價≥256者占比98.21%，而IgG抗A/B效價<256者僅占1.19%。為進一步明確IgG抗A/B效價與ABO-HDN的關系，本研究將1578例孕婦所生新生兒按是否發生ABO-HBN分組，結果顯示兩組妊娠次數、IgG抗A/B效價比較差異有統計學意義。Logistic回歸分析結果顯示，妊娠次數>1次、IgG抗A/B效價≥256均是ABO-HDN發生的獨立影響因素。較妊娠次數為1次孕婦，>1次的O型血孕婦新生兒發生ABO-HDN的風險降低0.424倍。而較IgG抗A/B效價<256孕婦，IgG抗A/B效價256、512、≥1024的O型血孕婦新生兒發生ABO-HDN的風險分別增加2.951倍、3.056倍、3.501倍，可見其風險隨著IgG抗A/B效價增加而上升。這與既往報道[18]結論相似，均提示IgG抗體效價與HDN發生率呈正相關關系。IgG是唯一可穿過胎盤的免疫球蛋白，因此IgG性質的抗體理論上均可引起HDN，隨著抗體效價的上升，一旦超過機體保護機制，便可導致ABO-HDN發生。本研究中，Logistic回歸分析也顯示，較IgG抗A/B效價<256的孕婦，IgG抗A/B效價≥256的O型血孕婦新生兒發生ABO-HDN的風險增加5.709倍，因此臨床對不規則抗體IgG效價≥256的O型血孕婦=應高度重視。

研究[19-20]指出，HDN發生、嚴重程度不僅與IgG抗A/B效價有關，IgG抗體亞類、IgG轉運至胎兒效率、胎兒脾臟功能成熟度、人類白細胞抗原相關抑制抗體亦在HDN發生中起重要作用，因此不規則抗體篩查尚不能作為HND的預測指標。但結合當前研究，孕婦不規則抗體篩查所示IgG抗A/B效價與胎兒出生后24 h內膽紅素水平正相關[21]，這也提示產前IgG抗A/B效價控制的必要性，尤其是對于血清IgG抗A/B效價≥256的孕婦，應給予動態持續監測，結合產前血漿置換等干預措施降低HDN風險。

綜上所述，對孕婦開展不規則抗體篩查十分必要，并應重視IgG抗A/B效價≥256的孕婦，依據IgG效價進行積極的產前干預，最大限度地降低HDN風險。但本研究也存在一定局限性，如樣本數量相對較少，產前不規則抗體篩查與HDN的相關性仍有待擴大樣本量后深入探究。