高效液相色譜法測定番茄中甲氧蟲酰肼的殘留

遲夢宇 陳子雷 毛江勝 盧琦 張艷 李慧冬

摘要 [目的]建立測定甲氧蟲酰肼在番茄上殘留的高效液相色譜檢測方法。[方法]樣品經過酸化的甲醇高速勻漿提取，經過二氯甲烷萃取，采用甲醇∶乙腈∶水（30∶55∶15，V/V）為流動相，利用symmetry C18柱（4.0 mm×250 mm）進行檢測。[結果]在0.01、0.50、2.00 mg/kg 3個添加濃度水平下，甲氧蟲酰肼在番茄上的回收率為85%～105%，相對標準偏差（RSD）為0.6%～1.4%。相關系數（r）為0.999 8。甲氧蟲酰肼在番茄上的最低檢出限為0.01 mg/kg，最小檢出量為2 ng。在實際樣品檢測中檢測出有甲氧蟲酰肼的殘留，但均未超過我國規定的最大殘留限量值。[結論]在實際樣品檢測中，該方法能夠快速、準確地對樣品進行檢測，為大量樣品的檢測提供了數據方法。

關鍵詞 高效液相色譜法;甲氧蟲酰肼;番茄;農藥殘留

中圖分類號 TS 207.5+3? 文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2021）23-0201-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.23.056

Determination

of Methoxyfenozide Residues on Tomatoes by High Performance Liquid Chromatography

CHI Meng-yu1，2，3，CHEN Zi-lei1，2，3，MAO Jiang-sheng1，2，3 et al （1.Institute of Quality Standards & Testing Technology for Agro-Products of Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan，Shandong 251000;2.Shandong Key Laboratory of Testing Technology for Food Quality & Security，Jinan，Shandong 251000;3.Monitor Inspection &Test Center of Foods Quality of Ministry of Agricultural and Rural Affairs （Jinan），Jinan，Shandong 251000）

Abstract [Objective] To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） for the determination of methoxenozide residues on tomatoes.[Method]Methanol：acetonitrile：water （30∶55∶15，V/V） was used as the mobile phase，and a symmetry C18 column （4.0 mm×250 mm） was used for detection.[Result]At three additive concentration levels of 0.01，0.50，and 2.00 mg/kg，the recovery of methoxenozide on tomatoes was 85%-105%，and the relative standard deviation （RSD） was 0.6%-1.4%.The correlation coefficient （r） was 0.999 8.The minimum detection limit of methoxenozide on tomatoes was 0.01 mg/kg，and the minimum detection amount was 2 ng.The methoxenozide residues were detected in the actual samples，but none of them exceeded the maximum residue limit value stipulated by China.[Conclusion]In actual sample detection，this method could quickly and accurately detect samples，providing a data method for the detection of a large number of samples.

Key words High performance liquid chromatography （HPLC）;Methoxyfenozide;Tomato;Pesticide residue

基金項目

山東省農業重大應用技術創新項目（KY-NYZDJSCX2016）。

作者簡介 遲夢宇（1993—），女，山東青島人，碩士，從事農產品中農藥殘留檢測技術研究。通信作者，副研究員，從事農藥殘留限量標準與檢測技術研究。

收稿日期 2021-04-16

甲氧蟲酰肼是由美國陶氏益農公司研發的一種新型的雙酰肼類昆蟲生長調節劑，它不但能夠導致昆蟲異常蛻皮抑制進食，而且還有一定的殺卵活性[1-3]，對鱗翅目害蟲具有很好的防治作用。目前對甲氧蟲酰肼的殘留研究國內外均有報道[4-9]，但是在番茄上的殘留研究目前國內還鮮有報道。筆者以番茄為樣品，建立了測定甲氧蟲酰肼在番茄中殘留量的液相色譜檢測法，為快速、準確地測定番茄中甲氧蟲酰肼殘留提供了有效的數據方法，滿足了農藥殘留的要求。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

高壓液相色譜儀，Waters公司，Alliance2695泵，2487紫外檢測器;旋轉蒸發器，德國 Heidolph laborota 4000;離心機，北京醫用離心機廠LD5-2A。甲氧蟲酰肼標樣（德國，純度 98.9%）;甲醇（色譜純）;乙腈（色譜純）;重蒸水;二氯甲烷（分析純）;無水硫酸鈉（分析純）。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品處理。稱取樣品15.0 g加至80 mL離心管中，加入40 mL甲醇∶0.1 mol/L HCl（4∶1，V/V）混合溶液振蕩提取10 min，10 000 r/h勻漿破碎1 min，然后離心5 min，取清液于分液漏斗中，殘渣再加入40 mL甲醇∶0.1 mol/L HCl混合溶液，重復提取操作2次。

1.2.2 凈化。

將2次提取的上清液合并加至分液漏斗中，用二氯甲烷重復萃取2次，過無水硫酸鈉。40 ℃水浴旋轉蒸發二氯甲烷至干，凈化，甲醇定容，過膜，待測。

1.2.3 色譜條件。色譜柱為Waters symmetry C18柱（4.0 mm×250 mm）;流動相為水∶甲醇∶乙腈（15∶30∶55，V/V）; 柱溫30 ℃;流速1.0 mL/min;檢測波長200 nm;進樣量10 μL。相對保留時間8 min。

1.2.4 標準溶液的配制。

準確稱取0.01 g甲氧蟲酰肼標準品，用甲醇溶液定容至10 mL棕色容量瓶中，配制成濃度為1 000 mg/L標準貯備溶液。將甲氧蟲酰肼標準貯備液用甲醇溶液稀釋配制成濃度為0.01、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/kg的標準工作溶液，按“1.2.3”色譜條件進行分析，測定峰面積，以峰面積（Y）為縱坐標、質量濃度（X，mg/L）為橫坐標繪制標準曲線，進行線性回歸分析[10]。

1.2.5 添加回收試驗。

稱取15個番茄空白樣品各10 g，向空白樣品中添加3個不同水平的甲氧蟲酰肼標準溶液，使最終添加濃度分別為0.01、0.50、2.00 mg/kg，每個濃度設置5個重復，按照“1.2.1”和“1.2.2”樣品處理和凈化的方法進行處理，按“1.2.3”色譜條件對樣品進行檢測分析，計算加標回收率。

2 結果與分析

2.1 流動相的選擇 選擇甲醇-乙腈-水的梯度作為流動相，不僅能提高分離度，還能使農藥與樣品中的雜質完全分離開，避免雜質峰影響[6]。確定好流動相后對流動相的不同配比進行比較選擇。在乙腈體積為55%時，分離效果較好，但出峰時間長[10]。對甲醇和水的比例進行了優化。結果表明，在甲醇∶乙腈∶水的比例為30∶55∶15時，能夠使色譜分離效果最好，從而獲得峰型好、靈敏度高的色譜峰（圖1）。

2.2 線性關系的確立 將稀釋好的系列濃度標準溶液按“1.2.3”色譜條件進行分析，以峰面積（Y）和質量濃度（X，mg/L）為坐標軸繪制標準曲線，進行線性回歸分析，得出線性回歸方程為Y=14 299.46X+1 871.79，線性回歸系數（r）為0.999 8（圖2）。結果表明甲氧蟲酰肼的濃度在0.01～1.00 mg/L與峰面積呈線性關系，且線性關系良好，符合相關分析要求。

2.3 方法回收率和精密度

在沒有檢出的番茄樣品中分別添加不同含量水平的甲氧蟲酰肼標準溶液，使最終添加濃度分別為0.01、0.50、2.00 mg/kg，每個濃度設置5個重復。按照“1.2.1”和“1.2.2”樣品處理和凈化方法對樣品進行處理后進樣，得到添加回收圖譜（圖3～4）。計算得到的加標回收率為85%～105%，相對標準偏差（RSD）為0.6%～1.4%，表明該方法的準確度和精密度良好，符合農藥殘留檢測要求。甲氧蟲酰肼在番茄上的最低檢出限為0.01 mg/kg，最小檢出量為2 ng。

2.4 實際樣品的檢測

在濟南市場隨機抽取了番茄樣品，按照該研究建立的樣品前處理方法和檢測方法對樣品進行檢測，其中有番茄樣品檢測出有甲氧蟲酰肼殘留，檢出量分別為0.020、0.028、0.050、0.031、0.022、0.043 mg/kg，均小于國家規定的最大殘留限量值（2 mg/kg），說明市場上銷售的番茄相對比較安全。

3 結論

該試驗研究并建立了檢測番茄中甲氧蟲酰肼殘留量的高效液相色譜方法。通過酸化的甲醇提取，二氯甲烷萃取，流動相甲醇、乙腈、水的比例為30∶55∶15，檢測到的色譜峰分離效果好、準確度高。在優化的最佳條件下，該分析方法的平均回收率為85%～105%，最低檢出限為0.01 mg/kg，最小檢出量為2 ng，滿足殘留檢測要求。在實際樣品檢測中該方法能夠快速、準確地對樣品進行檢測，為大量樣品的檢測提供了數據方法。

參考文獻

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