骨科患者創(chuàng)口分泌物的細(xì)菌檢驗與耐藥性分析

胡健，吳杏娟，吳文輝

宜興市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科,江蘇宜興 214200

近年來，隨著科技的不斷進步，工業(yè)化程度越來越高，機械性創(chuàng)傷越來越多，造成的骨傷患者也日漸增多。 由于骨科患者多數(shù)遭受了嚴(yán)重的創(chuàng)傷，其皮膚屏障有所損壞，從而使正常定植菌更易入侵，導(dǎo)致感染率相對增高[1-2]。 另一方面，骨科患者創(chuàng)口的感染具有難防、不易治、危害大等特點，若未得到及時處理和控制，易誘發(fā)骨不連、骨髓炎癥等，嚴(yán)重影響患者的康復(fù)[3-4]。此外，由于廣譜抗生素的大量使用，骨科患者傷口感染細(xì)菌的分布存在一定變化，其耐藥情況也在不斷加強，應(yīng)予以高度重視[5-6]。

骨科住院患者大多數(shù)需要進行手術(shù)治療手段，但是術(shù)后往往會出現(xiàn)創(chuàng)口感染，影響疾病的恢復(fù)，降低預(yù)后效果。此外，創(chuàng)口感染也會延長患者的臥床時間，影響患者的治療情緒，嚴(yán)重阻礙了患者的康復(fù)進程[7]。因此， 監(jiān)測住院患者傷口的細(xì)菌感染情況及耐藥性，有助于掌握該類患者的病原菌流行情況，為臨床及時準(zhǔn)確地采取積極有效的治療手段提供實驗依據(jù)，以確保患者盡早康復(fù)。 該研究通過分析2018年1月—2020年1月骨科住院的148 例患者傷口感染的病原菌情況及耐藥性， 給院內(nèi)感染監(jiān)控提供數(shù)據(jù)支持，為進一步臨床規(guī)范運用抗菌藥物提供科學(xué)的治療依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集該院骨科住院患者傷口分泌物標(biāo)本148 份，共檢測出致病菌63 株，沒有檢測出真菌菌株。 其中，有2 份分泌物標(biāo)本分離出2 株及以上致病菌。同一患者同一部位的多次送檢標(biāo)本視為同一菌株。質(zhì)控菌株包括大腸桿菌（ATCC 25922）、 金黃色葡萄球菌（ATCC 25923）和銅綠假單胞菌（ATCC 27853），均購于江蘇省臨床檢驗中心。

1.2 方法

①樣本采集與送檢：護理人員按照操作技術(shù)規(guī)范文件上面的要求，無菌、準(zhǔn)確地采集患者傷口分泌物樣本，并迅速放于無菌管內(nèi)，隨后送至微生物室進行檢驗。

②細(xì)菌培養(yǎng)與藥敏試驗：臨床微生物檢驗人員按照檢驗操作規(guī)范進行標(biāo)本接種和培養(yǎng)，應(yīng)用全自動儀器進行細(xì)菌檢驗和藥敏測定，并記錄所有標(biāo)本的檢測結(jié)果。 實驗所用培養(yǎng)基均購于康泰生物科技有限公司。 CO2培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱購自日本三洋公司。

1.3 觀察指標(biāo)

①骨科住院患者創(chuàng)口分泌物標(biāo)本中分離出的病原菌的分布情況。

②骨科住院患者創(chuàng)口分泌物標(biāo)本中分離出的病原菌對抗生素的耐藥情況。

1.4 統(tǒng)計方法

采用WHONET 5.6 統(tǒng)計學(xué)軟件對病原菌的類型和藥敏情況進行統(tǒng)計分析，分別以菌株數(shù)（n）和百分?jǐn)?shù)（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 患者創(chuàng)口分泌物標(biāo)本中病原菌的分布情況

經(jīng)檢測，148 份創(chuàng)口分泌物標(biāo)本中共培養(yǎng)出病原菌63 株，分離率為42.57%。 該研究中沒有檢測出真菌菌株。 其中，分離出44 株（69.84%）革蘭陽性菌，主要為金黃色葡萄球菌39 株（61.90%）和凝固酶陰性葡萄球菌5 株（7.94%）；還分離出19 株（30.16%）革蘭陰性菌，主要為大腸埃希菌6 株（9.52%）和陰溝桿菌6 株（9.52%）；另有銅綠假單胞菌3 株（4.76%）和其他革蘭陰性桿菌4 株（6.35%）。 見表1。

表1 骨科患者傷口分泌物標(biāo)本中病原菌的分布情況

2.2 革蘭陽性球菌的耐藥性分析

經(jīng)藥敏試驗檢測， 檢出耐甲氧西林金葡菌（MRSA）12 株，陽性率為30.77%。 金葡菌對慶大霉素、替加環(huán)素、 利福平和復(fù)方新諾明敏感性較好， 均為100.00%敏感。此外，分離出4 株耐甲氧西林的凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS），檢出率為80.00%，且對大部分抗菌藥物耐藥性較強。 MRCNS 對5 種常用抗生素的耐藥率超過了50%。 所有葡萄球菌對青霉素G 均產(chǎn)生了耐藥性，耐藥率達100%。沒有檢出耐萬古霉素和利奈唑胺的葡萄球菌。 見表2。

表2 主要革蘭陽性球菌的藥敏試驗結(jié)果

2.3 革蘭陰性桿菌的耐藥性分析

經(jīng)檢測，發(fā)現(xiàn)4 株（66.67%）產(chǎn)超廣譜β–內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的大腸埃希菌，其產(chǎn)生的耐藥性均較強，并且呈現(xiàn)出多重耐藥性特征。大腸埃希菌對8 種常用抗生素的耐藥率超過了50%， 其中對氨芐西林為100%耐藥。 大腸埃希菌對哌拉西林/他唑巴坦、丁胺卡那霉素和呋喃妥因的敏感性達到了100%。 陰溝桿菌和銅綠假單胞菌對抗生素的敏感性總體上較好，對常用抗生素幾乎都是敏感的。未發(fā)現(xiàn)對碳青霉烯類耐藥的腸桿菌。 見表3。

表3 主要革蘭陰性桿菌的藥敏試驗結(jié)果

3 討論

骨科住院患者的傷口情況復(fù)雜， 清創(chuàng)難度大，且大多數(shù)需要長期臥床休養(yǎng)， 這就增加了感染風(fēng)險，非常容易受到細(xì)菌的侵襲從而導(dǎo)致創(chuàng)口感染，影響疾病恢復(fù)，降低預(yù)后效果，同時也進一步加重了患者的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)[8-9]。因此，在骨科傷口感染治療中，應(yīng)加強病原學(xué)檢測，及早明確感染致病菌，合理應(yīng)用抗菌藥物，這對保證臨床治療效果尤為關(guān)鍵。

該次研究結(jié)果顯示，該院骨科患者傷口病原菌檢出率為42.57%，低于許淑珍等[10]報道的70.6%和李哲等[11]報道的68.0%，這與該院一直堅持的中草藥抗菌療法存在一定的關(guān)系，值得繼續(xù)推廣應(yīng)用。 此外，有2份分泌物標(biāo)本分離出2 株及以上致病菌。既往研究已經(jīng)表明，多重感染對于臨床治療來說難度更大、效果更差，需引起我們的足夠重視[12]。 該研究中檢出的病原菌以革蘭陽性菌（69.84%）為主，與國內(nèi)其他研究結(jié)果相一致[13-14]。 其中，以金葡菌（61.90%）最多，也證實了金葡菌是導(dǎo)致骨科傷口感染的主要病原菌，應(yīng)予以高度重視，加強防治。近年來，廣譜抗生素在臨床上使用越來越多，MRSA 的分離率也在不斷提高， 給臨床治療帶來了不小的壓力和困擾。該院骨科創(chuàng)口感染中MRSA 的分離率為30.77%，低于張月紅等[15]報道的45.0%和程方圓等[16]報道的44.7%，這可能是由于該院在治療傷口感染時部分采用了中草藥抗菌療法。另有研究表明， 部分中草藥可以逆轉(zhuǎn)細(xì)菌的耐藥性，可大大縮短患者的康復(fù)周期[17-18]。既往的研究報道表明，定植于患者皮膚表面的CNS，在患者機體抵抗力較弱時可通過傷口入侵感染， 導(dǎo)致臨床治療效果不佳[19]。該次研究中，CNS 的分離率為7.94%， 雖顯著低于金葡菌的分離率，但是其中有4 株為MRSE（80.00%），對常用抗生素耐藥性較強， 提示臨床應(yīng)重視其地位，合理規(guī)范用藥治療，并且可多次同部位送檢樣本作比較，不能將其簡單歸為污染菌。

近年來骨科創(chuàng)傷感染的病原菌譜正在不斷變化中，部分研究報道以革蘭陰性桿菌為主，且耐藥性較高甚至出現(xiàn)多重耐藥菌[20-21]。該研究中，革蘭陰性桿菌占所有致病菌的30.16%，顯著低于王娜等[22]報道的60.2%和郭旭鋒等[23]報道的68.66%。 這可能與樣本采集方法以及地域差異有關(guān)，提示我們不能盲目參照其他地區(qū)的監(jiān)測結(jié)果，應(yīng)根據(jù)該地區(qū)的病原菌譜和耐藥性調(diào)整抗感染治療方案。 此外，該研究還發(fā)現(xiàn)了4 株(66.67%)產(chǎn)ESBLs 的大腸埃希菌，其造成的耐藥性均較強，呈現(xiàn)多重耐藥性特征，需引起我們的強烈關(guān)注，并及時提醒臨床醫(yī)師注意藥敏情況。該次研究中沒有檢出對碳青霉烯類耐藥的腸桿菌，這可能是由于日常工作中臨床用藥有所限制，此類藥物在該院監(jiān)測中敏感性普遍較好，仍可作為經(jīng)驗性用藥首選。

綜上所述，骨科患者傷口感染復(fù)雜多變化，應(yīng)加強對其感染菌群譜型的研究， 重視細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測，為臨床合理規(guī)范用藥提供可靠的數(shù)據(jù)支持。 多重耐藥菌感染對單一抗菌藥物反應(yīng)差， 治療進展緩慢，可導(dǎo)致嚴(yán)重的感染。因此對多重耐藥菌的監(jiān)測也是我們工作中需要特別注意的地方。 此外，該次研究還存在部分不足，例如研究時間較短，研究樣本數(shù)量不夠等。因此在今后的相關(guān)研究中，應(yīng)延長研究時間，加大研究樣本數(shù)量，完善研究數(shù)據(jù)的可靠性，為臨床治療提供科學(xué)數(shù)據(jù)，提高抗感染治療效果，促進患者盡早康復(fù)。