淺談牛結(jié)節(jié)性皮膚病診斷及防控

高鳳斌 李天庚

（1.吉林省四平市鐵東區(qū)石嶺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，吉林 四平 136000；2.吉林省林業(yè)勘察設(shè)計研究院，吉林 長春 130000）

牛結(jié)節(jié)性皮膚病于1929年首次在贊比亞被報道，20世紀(jì)70年代向非洲北部和西部廣泛傳播，2005年后傳播至中東一些國家，2015年以來，已經(jīng)蔓延至歐洲東南部國家和俄羅斯，2019年8月12日我國首次確診在新疆伊犁地區(qū)爆發(fā)牛結(jié)節(jié)性皮膚病。牛結(jié)節(jié)性皮膚病作為國家二類動物疫病，表現(xiàn)出較強(qiáng)的傳染性。若養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的牛發(fā)生該疾病，會給養(yǎng)殖場造成重大的經(jīng)濟(jì)損失，而該病的流行會對整個牛養(yǎng)殖行業(yè)產(chǎn)生嚴(yán)重影響。四平作為吉林省肉牛養(yǎng)殖的重要地區(qū)，務(wù)必對牛結(jié)節(jié)性皮膚病加以重點(diǎn)關(guān)注，加強(qiáng)對該流行性疾病的有效監(jiān)測，對科學(xué)防控措施進(jìn)行重點(diǎn)宣傳和推廣，提高養(yǎng)殖從業(yè)人員對該病的重視程度。在此基礎(chǔ)上，要完善防控基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)，為疫病科學(xué)防控提供可靠保障，避免牛結(jié)節(jié)性皮膚病的頻發(fā)，促進(jìn)牛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。

1.病原學(xué)

牛結(jié)節(jié)性皮膚病（LSD），也稱之為牛皮膚疙瘩病，是由牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒（LSDV）所引起的傳染病。該病毒屬于痘病毒科、羊痘病毒屬，該病毒只有一個血清型。病毒粒子有或無包膜，形態(tài)呈橢圓形或是磚塊形，病毒粒子大小介于260~320nm，屬于雙鏈DNA病毒，基因組大小約為151kb。與山羊痘病毒和綿羊痘病毒基因組核苷酸具有約96%的同源性，彼此存在交叉免疫保護(hù)性。

該病毒對外界環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力，特別是寒冷干燥季節(jié)，能夠存活數(shù)月，在零下90℃可保存10年，4℃的條件組織內(nèi)的病毒存活時間可達(dá)到約180d，該病毒對熱敏感，55℃條件下2h或是65℃條件下30min，病毒可有效滅活；酸堿溶液可殺滅該病毒，在pH6.6-8.6的環(huán)境中長期存活；對20%的乙醚、氯仿、1%福爾馬林和一些洗滌劑（如十二烷基磺酸鈉劑）敏感，對次氯酸鈉（2%-3%）、苯酚（2%，15min）、碘化合物（1：33稀釋液）和季銨化合物（0.5%）等也敏感；該病毒粒子對陽光敏感，在黑暗條件下可保持活力長達(dá)幾個月。

LSDV以羔羊、犢牛的睪丸細(xì)胞或是腎上腺細(xì)胞等原代細(xì)胞可以完成培養(yǎng)，或是以牛腎細(xì)胞或是倉鼠腎細(xì)胞等傳代細(xì)胞完成培養(yǎng)，于細(xì)胞漿內(nèi)可完成生長繁殖，接種之后10d方可出現(xiàn)病變。此外，以雞胚絨毛尿囊膜內(nèi)繁殖，形成肉眼可見痘樣病變，不會對雞胚產(chǎn)生致死作用。超聲波破壞細(xì)胞之后，可釋放病毒至細(xì)胞外部。

2.流行病學(xué)

LSDV主要感染牛和水牛，各品種的牛都易感，奶牛易感性相對較高，山羊和綿羊被人工接種感染后，通常在接種部位局部出現(xiàn)反應(yīng)，暫未發(fā)現(xiàn)人感染病例。患病牛是該病的主要傳染源，主要是通過昆蟲（如蚊、蠅和虱）媒介機(jī)械傳播，其次是通過自然接觸傳播，另外被病牛的唾液、脫落的痂皮等污染的飲水或飼草等也可傳播。自然感染的潛伏期多介于2~5周，約28d。全年都有可能出現(xiàn)LSD，但以6~9月份最為嚴(yán)重，發(fā)病率相對較高，以散發(fā)為主。發(fā)病率多介于2~45%，死亡率可控制小于10%，病牛病毒血癥時間約12d，康復(fù)之后能夠形成終生免疫。血液帶毒時間約3周，公牛感染LSD之后，精液排毒時間約為5個月。針對痂皮內(nèi)所含病毒，殺滅難度相對較大，養(yǎng)殖場若是出現(xiàn)疫病爆發(fā)的情況，撲殺病牛之后，若繼續(xù)引入免疫力不足的牛，有可能再次引起發(fā)病。

3.臨床癥狀

自然條件下，LSD潛伏期介于2~5周，試驗感染則介于4~12d，通常7d。病牛體溫升高可達(dá)40℃以上，呈稽留熱型，并持續(xù)7天左右。初期表現(xiàn)為鼻炎和結(jié)膜炎，進(jìn)而眼和鼻流出新鮮膿性分泌物，隨著病情發(fā)展，可逐漸轉(zhuǎn)變成角膜炎。結(jié)節(jié)一般最先出現(xiàn)于頭部、頸部、胸部、會陰、乳房及四肢等處皮膚，產(chǎn)生明顯的硬實結(jié)節(jié)，形狀多以圓形為主，直徑可達(dá)1~5cm，且結(jié)節(jié)存在于表皮、真皮之間，集聚則可形成不規(guī)則的腫塊，最終可能引起壞死。病牛的肩前、股前、后肢與腹股溝外等位置的淋巴結(jié)發(fā)生腫大。口腔、眼、鼻與外生殖器等處黏膜也可產(chǎn)生結(jié)節(jié)和潰瘍等現(xiàn)象，潰瘍嚴(yán)重情況下，則會出現(xiàn)繼發(fā)性細(xì)菌感染，并引發(fā)其他并發(fā)癥。泌乳母牛可發(fā)生乳房炎，妊娠母牛可能出現(xiàn)流產(chǎn)并會持續(xù)幾個月不發(fā)情，公牛病后4~6月內(nèi)不育，若發(fā)生睪丸炎則可出現(xiàn)永久不育。

4.發(fā)病機(jī)理及病理變化

剖檢變化，主要以消化道、呼吸道、泌尿生殖道等位置黏膜，特別是口、鼻、氣管、皺胃、子宮壁等，存在明顯結(jié)節(jié)病變。結(jié)節(jié)附近位置，通常伴有炎癥反應(yīng)，皮下組織、結(jié)締組織與黏膜下組織，存在漿液性和出血性滲出液，呈紅色或是黃色。皮膚最初病變?yōu)樗[和表皮增生及上皮樣細(xì)胞浸潤，之后則出現(xiàn)漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞。真皮、皮下組織的血管、淋巴管則出現(xiàn)明顯栓塞，并引發(fā)淋巴管炎和血管炎、血管周圍炎，血管周圍細(xì)胞發(fā)生明顯聚集，并形成套狀。在病死牛的上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、皮腺細(xì)胞、浸潤的巨噬細(xì)胞與淋巴細(xì)胞等內(nèi)，可觀察到圓形或卵圓形嗜伊紅染色的胞漿內(nèi)包涵體，包涵體表面存在球狀突起，且周圍存在暈圈。因淋巴液的聚集與滲出，可引起皮炎、肌炎、淋巴炎等，通過感染淋巴結(jié)使淋巴液回流受阻，引起一肢或多肢、前腹壁腫脹，對患畜的行動產(chǎn)生影響。

5.診斷

基于流行病學(xué)、臨床癥狀與病理變化等，能夠完成初步診斷；確診還需實驗室的診斷。其中，需對部分類似疾病加以仔細(xì)準(zhǔn)確的鑒別診斷。由牛皰疹病毒-2（BHV-2）感染、昆蟲叮咬、蠕形螨感染、盤尾絲蟲病、貝諾孢子蟲病和嗜皮菌病引起的皮膚損傷會與LSD所引起的混淆。一般情況下，BHV-2感染引起的淺表皮膚病變較多，病程較短，且比LSD病癥輕。此外，BHV-2感染中存在的核內(nèi)包涵體與LSD引起的胞質(zhì)內(nèi)的包涵體是相反的。嗜皮菌病是由剛果嗜皮菌所引起，這是牛和其他大家畜的一種常見的皮膚傳染病，以淺表性的滲出性、膿包性皮炎、局限性的痂塊和脫屑性皮疹為特征。牛皮蠅感染則多為牛皮蠅幼蟲所造成，病牛出現(xiàn)局部疼痛以及恐懼等，對牛休息、采食等產(chǎn)生不利影響，常于牛背部皮下形成結(jié)節(jié)，形狀以長圓形為主，結(jié)締組織囊內(nèi)則能夠發(fā)現(xiàn)幼蟲。

若對LSD確診，則需通過實驗室檢測。具體涉及病毒分離鑒定、分子生物學(xué)檢測、透射電鏡觀察等不同方法。病毒的分離，多以淋巴結(jié)、肺等組織或是皮膚結(jié)痂作為樣本，樣本與生理鹽水的比例控制在1:5，并研磨獲得混懸液，通過反復(fù)凍融3次之后，使病毒完全釋放，以12000r/min、3min完成離心操作，選擇上清液，通過0.22μm濾器過濾除菌，接種易感細(xì)胞，發(fā)生明顯細(xì)胞病變之后，通過血清中和試驗或間接免疫熒光試驗，完成科學(xué)鑒定。同時，可取病料切片直接進(jìn)行熒光抗體染色觀察分析；也可通過電鏡設(shè)備，對病毒粒子進(jìn)行有效觀察，這是對牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒最直接快速的鑒定方法。病毒分離所需時間相對較長，且成本相對較高。分子生物學(xué)監(jiān)測，特別是實時熒光PCR檢測，效果相當(dāng)顯著。經(jīng)過不斷深入研究，針對LSD開發(fā)相應(yīng)的病毒熒光定量PCR核酸檢測試劑盒，可直接選擇新鮮病料，完成特異性檢測。

6.防控措施

6.1 提高疫情排查有效性

重點(diǎn)落實疫情排查工作，并充分保證全面嚴(yán)格，對預(yù)防LSD有著關(guān)鍵性的影響和作用。鑒于此，為保證牛養(yǎng)殖行業(yè)良好發(fā)展，需對疫病排查采取嚴(yán)格的措施，切實提高疫病排查有效性，促使疫病排查所具有的關(guān)鍵作用能夠得以有效發(fā)揮。對防疫工作站重點(diǎn)負(fù)責(zé)管轄的范圍內(nèi)，要定期開展全面嚴(yán)格地疫情排查，特別是對調(diào)入、引種，要重點(diǎn)加強(qiáng)疫病監(jiān)測。開展疫病排查期間，需基于LSD特征，實施科學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)異常情況，需對牛只采取單獨(dú)隔離，及時聯(lián)系檢測人員，完成進(jìn)一步的臨床鑒別診斷。若診斷確診為LSD，需及時向上級畜牧部門報告。為切實提高有效性，需對各部門采取嚴(yán)格監(jiān)督管理，制定責(zé)任制度，并對責(zé)任制度加以嚴(yán)格有效落實，確保相關(guān)人員保持良好的責(zé)任意識與積極性，為疫病排查高質(zhì)量開展落實提供可靠保障。

6.2 重視流行病學(xué)調(diào)查

對疑似LSD病例，應(yīng)加以重點(diǎn)關(guān)注，并及時采樣送檢，有關(guān)部門需嚴(yán)格有效落實全面排查工作，以當(dāng)?shù)卮鏅谂橹鳎瑢Υ碎_展重點(diǎn)巡查監(jiān)視。有關(guān)LSDV檢查，若呈現(xiàn)陽性結(jié)果，則需嚴(yán)格基于有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，對疫情加以嚴(yán)格處置。與此同時，對LSD流行病學(xué)調(diào)查要保持高度重視，有關(guān)疫情源頭、傳播方向等，對此加以仔細(xì)查明，有效避免LSD疫病的進(jìn)一步傳播擴(kuò)散。除此之外，應(yīng)加強(qiáng)對LSD的宣傳普及，對有關(guān)畜牧獸醫(yī)工作人員要開展專業(yè)系統(tǒng)的教育培訓(xùn)，以此為養(yǎng)殖從業(yè)人員提供科學(xué)正確的指導(dǎo)。

6.3 疫苗免疫

針對LSD的防控，疫苗免疫是十分重要的防控手段之一。開展疫苗接種，通常情況下，主要是以山羊痘疫苗以山羊5倍的劑量，采用皮內(nèi)注射的方式，要做到一畜一針，避免交叉?zhèn)魅荆陜H需接種1次。如果從外地調(diào)牛，則需及時完成疫苗接種免疫。此外，嚴(yán)禁從疫區(qū)引種，且引種之后應(yīng)當(dāng)采取單獨(dú)隔離措施，時間約30d，檢疫符合標(biāo)準(zhǔn)，方可混群飼養(yǎng)。

6.4 做好安全防護(hù)

對于進(jìn)出的車輛、人員和物品等，應(yīng)采取嚴(yán)格控制，尤其是進(jìn)出養(yǎng)殖場的車輛和人員等，需采取嚴(yán)格的消毒措施進(jìn)行處理。同時，重點(diǎn)落實蟲媒調(diào)查，并對蟲媒防治技術(shù)加以仔細(xì)研究，對蟲媒控制措施加以嚴(yán)格落實，對防蚊網(wǎng)和殺蟲劑等加以合理使用，以此對養(yǎng)殖場區(qū)域內(nèi)昆蟲采取有效殺滅。針對場區(qū)內(nèi)外、周邊環(huán)境，需定期采取全面嚴(yán)格的清理和消毒，避免病原微生物大量滋生，使LSD感染率能夠有效降低。牛舍、周圍環(huán)境，同樣需定期采取全面嚴(yán)格地消毒，特別是發(fā)病高峰期，或是疫病威脅嚴(yán)重時，需合理增加次數(shù)和頻率，并對消毒液的種類定期進(jìn)行合理更換，以此充分保證消毒效果。

6.5 及時診斷報告

發(fā)現(xiàn)牛存在疑似LSD癥狀的情況下，有關(guān)從業(yè)人員需加以密切關(guān)注，并向畜牧獸醫(yī)部門和動物疫病防控機(jī)構(gòu)等進(jìn)行及時報告。相關(guān)單位接到報告后，則需基于有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，基于可疑疫情、疑似疫情、確診疫情為主的標(biāo)準(zhǔn)流程，依次完成科學(xué)診斷，準(zhǔn)確認(rèn)定，并及時報告疫情。

6.6 嚴(yán)格處置確診病牛

對LSD疫病排查與監(jiān)測環(huán)節(jié)發(fā)現(xiàn)的病牛和確診病牛，需及時捕殺，采取無害化處理。開展捕殺處理期間，可能涉及到捕殺無法順利落實的情況，主要是由于捕殺病牛，會使養(yǎng)殖戶面臨相應(yīng)的經(jīng)濟(jì)損失，以至于瞞報、阻攔等情況時有發(fā)生。所以，為確保對病牛采取嚴(yán)格處置，有關(guān)政府部門則需要提高度重視程度，制定合理的捕殺補(bǔ)償制度，對養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失進(jìn)行合理的補(bǔ)償，以此確保捕殺工作能夠得以順利有效地開展。病牛捕殺之后，需重點(diǎn)關(guān)注善后處理，如牛群臨床檢查與監(jiān)視等，并對養(yǎng)殖場環(huán)境進(jìn)行全面仔細(xì)地徹底消毒。蚊蟲是疫病傳播的重要媒介，養(yǎng)殖場需加強(qiáng)滅蟲工作。此外，對牛群及時完成集中免疫，以避免疫病出現(xiàn)范圍性的傳染擴(kuò)散。疫苗免疫之后30d之內(nèi)，對牛群的移動要嚴(yán)格限制。

6.7 增強(qiáng)宣傳培訓(xùn)

區(qū)域范圍內(nèi)發(fā)生LSD情況下，地區(qū)有關(guān)政府部門則需保持高度重視，對疫情向全國范圍完成及時準(zhǔn)確通報，保證其他地區(qū)可以加強(qiáng)相應(yīng)的排查和預(yù)防，促使各地區(qū)有效提高疫病防控意識。與此同時，可以以宣傳手冊、廣播等渠道，并緊密結(jié)合新媒體渠道，如微信、網(wǎng)站等，有效落實宣傳工作，對診斷及防控的有關(guān)知識進(jìn)行全面宣傳普及。在此基礎(chǔ)上，對有關(guān)人員開展必要的專業(yè)培訓(xùn)，切實提高其防控意識，并促使養(yǎng)殖從業(yè)人員共同參與疫病防控，有效杜絕LSD頻發(fā)。此外，針對生物安全防范，同樣需加以重點(diǎn)關(guān)注，對生物安全體系加以完善建設(shè)，重點(diǎn)關(guān)注無疫區(qū)建設(shè)。有關(guān)政府部門則需發(fā)揮主導(dǎo)作用，為有關(guān)人員提供科學(xué)專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo)和教育培訓(xùn)。而有關(guān)人員同樣需保持高度重視，對養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖區(qū)域，采取定期全面、嚴(yán)格仔細(xì)地清洗、消毒，尤其是被污染的養(yǎng)殖設(shè)施、飼草等物品，保證養(yǎng)殖區(qū)域保持干凈清潔，為牛群健康生長發(fā)育提供可靠保障。

7.結(jié)論

綜上所述，牛結(jié)節(jié)性皮膚病屬于一種傳染病，一旦感染會對牛的生長發(fā)育造成不利影響。養(yǎng)殖期間，若出現(xiàn)牛結(jié)節(jié)性皮膚病，則有可能發(fā)生一定范圍的傳播，也有可能增加牛的死亡，進(jìn)而影響?zhàn)B殖經(jīng)濟(jì)效益。所以，為確保吉林省四平市牛養(yǎng)殖行業(yè)健康平穩(wěn)發(fā)展，有關(guān)人員須重點(diǎn)對加強(qiáng)科學(xué)防控、流行病學(xué)、臨床癥狀與病理變化等做到充分地了解和掌握，對疫病做出科學(xué)診斷，并采取科學(xué)有效的防控措施避免疫病頻發(fā)，保證牛的健康生長發(fā)育，提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益的同時，促進(jìn)牛養(yǎng)殖行業(yè)的健康發(fā)展。