金針菇膳食纖維改性、理化性質及抗氧化、降血脂活性

劉學成，王文亮，弓志青，王延圣，崔文甲，宋莎莎，張 劍，賈鳳娟

（山東省農業科學院農產品加工與營養研究所，山東省農產品精深加工技術重點實驗室，農業農村部新食品資源加工重點實驗室，山東 濟南 250100）

膳食纖維（dietary fiber，DF）被稱為“第七大營養素”，是天然存在的或者合成的碳水化合物的聚合物，主要存在于植物細胞壁中，不能被人體消化吸收，也不能為人體提供能量，但其對于人體膳食平衡起到至關重要的作用。按照是否溶于水可將DF分為可溶性膳食纖維（soluble dietary fiber，SDF）和不可溶性膳食纖維（insoluble dietary fiber，IDF）[1]。SDF能夠吸附糖類和脂類物質，降低血糖、血脂、膽固醇等指標水平，降低心腦血管病、糖尿病和某些癌癥的發病風險[2-4]。IDF主要由纖維素和木質素組成，能夠增加餐后飽腹感，其吸水性強并能促進胃腸蠕動，具有預防便秘和一定的減肥功效[5]。金針菇（Flammulina velutipes）學名毛柄金錢菌，俗稱冬菇，野生金針菇一般生長于腐樹干上，呈金光色，是一種食藥兩用的食用菌[6]，金針菇中的DF含量豐富，同時富含SDF和IDF，具有一定的抗氧化和抗衰老功效，因此研究金針菇DF對產品開發利用具有非常重要的參考價值[7]。

SDF具有更強的生理活性，因此SDF含量越高，DF品質越好，高品質DF中的SDF相對含量應在10%以上，否則只能作為食品充填劑[8]。天然植物DF中的SDF含量普遍較低，因此對DF進行改性，將部分IDF通過一定的方法轉變為SDF，以提高SDF的比例是十分必要的。本課題組通過前期預實驗對金針菇DF進行提取，發現金針菇DF得率為38.6%，其中SDF占總DF的8.2%，具有通過改性提高SDF含量的空間。目前DF的改性方法主要包括物理改性、化學改性、生物改性等[9-11]。此前對金針菇DF研究主要集中在提取階段，而對其改性研究和生理活性應用研究較少，故本實驗以提取的金針菇DF為原料，對其進行改性處理，分別采用纖維素酶法和高溫蒸煮法處理金針菇DF，在單因素試驗基礎上得到最佳改性工藝優化參數。此外，對兩種改性方法處理的金針菇DF進行理化性質測定，并通過掃描電子顯微鏡觀察和傅里葉變換紅外光譜分析，選出較優的改性方法。最后，建立高脂肥胖小鼠模型，通過飼喂改性后的金針菇DF飼料，探究改性DF對小鼠血脂和血清抗氧化指標的影響。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

雄性昆明小鼠（3～4 周齡）購自武漢塞維爾公司（生產許可證號：SYXK（鄂）2017-0013）。

小鼠1022基礎飼料、小鼠H10060高脂飼料 北京華阜康公司。

纖維素酶（比酶活力50 000 U/g） 上海源葉生物科技有限公司；壓榨玉米油 山東魯花集團有限公司；鹽酸（分析純） 煙臺萊陽市精細化工廠；氯化鈉（分析純） 天津市申泰化學試劑有限公司；氫氧化鈉（分析純） 天津市科密歐化學試劑有限公司；膽固醇（分析純）、鄰苯二甲醛（分析純） 國藥集團化學試劑有限公司；95%乙醇（分析純） 天津富宇精細化工有限公司；丙酮（分析純） 煙臺遠東精細化工有限公司；無水葡萄糖 山東西王藥業有限公司；甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high density liptein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density liptein cholesterol，LDL-C）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSHPx）試劑盒 南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器與設備

LDZ-50KB立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫療器械廠；GZX-9240MBE電熱鼓風干燥箱、SHZ-A恒溫水浴振蕩器 上海博迅實業有限公司；SCIENTZ-10N冷凍干燥機、SB25-12DTD超聲波清洗機、JY92-IIn超聲細胞粉碎機 寧波新芝生物科技股份有限公司；電子天平 美國OHAUS公司；ZN-20L小型粉碎機 北京興時利和科技發展有限公司；CR22DIII高速冷凍離心機 日本日立公司；Epoch酶標檢測儀 美國BioTeK公司；Chemray 240全自動生化分析儀 深圳雷杜生命科技有限公司；Nexus傅里葉變換紅外光譜儀 美國Thermo Nicolet公司；MSP-2S離子濺射儀 美國IXRF公司；SU8010掃描電子顯微鏡 日本Hitachi公司。

1.3 方法

1.3.1 金針菇DF粉制備工藝流程

金針菇烘干粉碎→液料比30∶1加水溶解→利用0.1 mol/L的NaOH和HCl溶液調節pH值為7→105 W超聲處理20 min→加入質量分數1.5%復合蛋白酶（酶活力10 000 U/g）→50 ℃恒溫水浴振蕩酶解→95 ℃高溫滅酶→加入質量分數2.0%α-淀粉酶（酶活力5 000 U/g）→55 ℃恒溫水浴振蕩酶解2 h→95 ℃高溫滅酶→加入4 倍體積95%（體積分數）乙醇溶液醇沉2 h→沉淀用丙酮洗滌→抽濾冷凍干燥→金針菇DF粉

1.3.2 改性金針菇膳食纖維制備

1.3.2.1 纖維素酶法改性

取干燥的DF粉2.0 g于錐形瓶中，按照一定的液料比加水混勻，加入一定量的纖維素酶，55 ℃水浴振蕩一段時間，95 ℃高溫滅酶5 min，冷卻后5 000 r/min離心15 min，保留上清液，加入4 倍體積的95%（體積分數）乙醇溶液醇沉2 h，抽濾乙醇保留白色絮狀物，并用丙酮洗滌兩次，抽濾除去乙醇，冷凍干燥所得SDF產品即為纖維素酶改性金針菇DF[12]。

1.3.2.2 高溫蒸煮法改性

取干燥的DF粉2.0 g于錐形瓶中，按照一定的液料比加水混勻，放入蒸煮滅菌鍋中在一定溫度下處理一段時間，冷卻后5 000 r/min離心15 min，保留上清液，加入4 倍體積的95%（體積分數）乙醇溶液醇沉，抽濾乙醇保留白色絮狀物，并用丙酮洗滌兩次，抽濾除去丙酮，冷凍干燥所得SDF產品即為高溫蒸煮改性金針菇DF[13-15]。

1.3.3 單因素試驗

1.3.3.1 纖維素酶法改性單因素設計

準確稱取2.0 g樣品，分別探究液料比（25∶1、30∶1、35∶1、40∶1、45∶1）、纖維素酶用量（0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%，以體系總質量計）、纖維素酶酶解時間（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h）對SDF得率的影響。SDF得率為改性后樣品質量和樣品初始質量的百分比。

1.3.3.2 高溫蒸煮法改性單因素設計

準確稱取2.0 g樣品，分別探究液料比（25∶1、30∶1、35∶1、40∶1、45∶1）、蒸煮溫度（105、110、115、120、125 ℃）、蒸煮時間（20、30、40、50、60 min）對SDF得率的影響。

1.3.4 正交優化試驗設計

采用L9（34）正交試驗優化DF改性工藝條件，以SDF得率為評價指標，分別探究纖維素酶和高溫蒸煮兩種方法對DF改性效果的影響，確定纖維素酶改性和高溫蒸煮改性的最佳工藝參數，試驗因素水平設計分別見表1和表2。

表1 纖維素酶改性DF正交試驗因素水平Table 1 Code and level of independent variables used for orthogonal array design for optimization of DF modification by cellulase

表2 高溫蒸煮改性DF正交試驗因素水平Table 2 Code and level of independent variables used for orthogonal array design for optimization of DF modification by high-temperature cooking

1.3.5 金針菇膳食纖維改性前后理化性質測定

1.3.5.1 陽離子交換力測定

取1.0 g改性前后干燥DF粉，浸泡在0.1 mol/L的鹽酸溶液中24 h，之后離心除去鹽酸（3 000 r/min、10 min），用蒸餾水多次洗滌沉淀，保證溶液pH＞4，用質量分數10% AgNO3溶液滴定除去溶液中Cl－，過濾并將濾液干燥，將干燥樣品懸浮于50 mL NaCl溶液（0.3 mol/L）中，再連續攪拌24 h，離心（5 000 r/min、10 min），上清液用0.01 mol/L NaOH溶液滴定，直至pH值基本不再變化，在滴定過程中，通過比較相同pH值下所消耗的NaOH體積，NaOH體積越小，則陽離子交換能力越強[16]，通過繪制體系pH值-NaOH消耗體積關系圖，能夠觀察到不同樣品陽離子交換能力變化的趨勢。

1.3.5.2 葡萄糖吸收能力測定

將1.0 g改性前后干燥DF粉（m/g），至100 mL濃度為100 mmol/L的葡萄糖溶液中（原始溶液葡萄糖物質的量記為n1/mmol），37 ℃水浴振蕩6 h，5 000 r/min離心15 min，取上清液，采用二硝基水楊酸比色法在540 nm波長處測定上清液中葡萄糖的吸光度并計算其物質的量（n2/mmol），按式（1）計算葡萄糖吸收能力[17]。

1.3.5.3 膽固醇吸附力測定

取市售鮮雞蛋蛋黃，加入9 倍質量的蒸餾水攪打成乳液勻漿，利用鄰苯二甲醛法測定乳液中膽固醇質量，記為m1/g。準確稱量1.0 g改性前后干燥DF樣品，記為m/g，按液料比25∶1加入上述稀釋后蛋黃液，攪打均勻，室溫振蕩搖勻4 h，5 000 r/min離心15 min，取上清液，測定上清液中膽固醇質量，記為m2/g，膽固醇吸附力按公式（2）計算[18]。

1.3.6 微觀結構觀察

1.3.6.1 掃描電子顯微鏡觀察微觀結構

將金針菇DF粉過60 目篩，分別取少量改性前后干燥DF粉，將樣品緊貼于導電碳膜雙面膠上，放入離子濺射儀樣品臺上噴金30 s，使用掃描電子顯微鏡（3.0 kV、3 000 倍）觀察并收集圖像[19]。

1.3.6.2 傅里葉變換紅外光譜測定

將DF粉過60 目篩，取改性前后干燥DF粉1 mg，加入100 mg KBr研磨成均質粉末，壓片制成透明薄片，并用空白KBr作為背景。掃描次數為32 次，分辨率為4 cm－1，掃描范圍為500～4 000 cm－1[20]。

1.3.7 動物實驗

1.3.7.1 小鼠高脂肥胖模型的建立

50 只雄性昆明小鼠在室溫20～25 ℃、相對濕度40%～50%下適應性喂養一周，期間自由飲食飲水。隨后將50 只小鼠隨機分成2 組，其中空白對照組8 只，高脂肥胖模型組42 只，空白對照組動物飼喂基礎飼料，高脂肥胖模型組小鼠飼喂高脂飼料，期間每周測量一次體質量，造模時間為4 周，分別取高脂肥胖模型組和空白對照組的小鼠進行尾動脈取血并檢測血脂四項指標，分別為TG、TC、HDL-C和LDL-C濃度，以高脂肥胖模型組小鼠對比空白對照組小鼠在平均體質量和血脂指標水平上具有顯著性差異視為造模成功。

1.3.7.2 小鼠DF干預實驗分組

將造模成功的高脂肥胖模型小鼠隨機分配為5 組，分別為模型組（基礎飼料）、陽性對照組（基礎飼料中添加5%燕麥DF）、DF低劑量組（基礎飼料中添加2.5%高溫蒸煮改性金針菇DF）、DF中劑量組（基礎飼料中添加5%高溫蒸煮改性金針菇DF）、DF高劑量組（基礎飼料中添加10%高溫蒸煮改性金針菇DF）。

分組完成之后，空白對照組繼續飼喂基礎飼料，高脂模型組飼喂基礎飼料，其他4 組按照組別飼喂相應不同飼料，繼續飼喂4 周，每周測一次體質量，飼喂結束之后，小鼠禁食12 h，頸椎脫臼處死小鼠，取血液于－20 ℃保存[21]，之后進行指標檢測。

1.3.7.3 主要指標檢測

血脂四項指標：TC、TG、LDL-C和HDL-C濃度采用相應試劑盒進行檢測。

血清抗氧化指標：SOD、GSH-Px活力采用相應試劑盒進行檢測。

1.4 數據處理與分析

采用Excel軟件進行數據統計處理，采用Origin 8.0軟件作圖，顯著性差異采用SPSS 24.0軟件中單因素方差分析檢驗法進行分析。

2 結果與分析

2.1 纖維素酶改性和高溫蒸煮改性對金針菇SDF得率影響的單因素試驗結果

2.1.1 纖維素酶改性對金針菇SDF得率的影響

以液料比30∶1、纖維素酶用量1.5%、酶解時間2.0 h為固定值，保持其中兩個因素條件不變的情況下，分別探究第3個因素對金針菇SDF得率的影響，結果如圖1所示。

圖1 纖維素酶改性對金針菇SDF得率的影響Fig. 1 Effect of cellulase modification on the yield of SDF

由圖1可以看出，隨著液料比、纖維素酶用量的提高與酶解時間的延長，SDF得率均呈現先升后降的趨勢，液料比在30∶1時，SDF得率最高（16.6%）；綜合考慮選取液料比25∶1、30∶1、35∶1作為正交試驗3個水平。當纖維素酶用量為1.5%時，SDF得率最高（16.1%）；纖維素酶量過量時，部分SDF也會被分解，綜合考慮選取纖維素酶用量1.0%、1.5%、2.0%作為正交試驗3個水平。纖維素酶酶解時間為1.5 h時，SDF得率最高（15.8%）；當酶解時間繼續延長時，會造成纖維素酶的過度酶解，導致SDF得率降低，綜合考慮選取酶解時間1.0、1.5、2.0 h作為正交試驗3個水平。

2.1.2 高溫蒸煮改性對金針菇SDF得率的影響

以液料比30∶1、蒸煮溫度120 ℃、蒸煮時間40 min為固定值，保持其中兩個因素條件不變的情況下，分別探究第3個因素對金針菇SDF得率的影響，結果如圖2所示。

圖2 高溫蒸煮改性對金針菇SDF得率的影響Fig. 2 Effect of high-temperature cooking modification on the yield of SDF

由圖2可以看出，當液料比為30∶1時，SDF得率最高（20.5%）。綜合考慮選取液料比25∶1、30∶1、35∶1作為正交試驗3個水平。隨著蒸煮溫度的升高，SDF得率呈現先增加后趨于穩定的趨勢，當蒸煮溫度為120 ℃時，SDF得率最高（20.6%），高溫會破壞DF分子內氫鍵，部分結晶區遭到破壞促使部分IDF轉變為SDF[22]，當蒸煮溫度高于120 ℃時，SDF得率趨于穩定。綜合考慮選取蒸煮溫度115、120、125 ℃作為正交試驗3個水平。隨著蒸煮時間的延長，SDF得率呈現先增加后趨于穩定的趨勢，當蒸煮時間為40 min時，SDF得率最高（20.2%）。當蒸煮時間不足40 min時，隨著蒸煮時間的延長，部分DF分子質量和聚合度降低，促使部分IDF轉變為小分子的SDF[23]，當蒸煮時間超過40 min時，SDF得率保持不變。綜合考慮選取蒸煮時間30、40、50 min作為正交試驗3個水平。

據當地人介紹，江底鐵索橋是東川銅業鼎盛時期的產物，古名永安橋，屢毀屢修。鋼梁橋1944年開工建設，橋頭引道要經過僅4米寬的江底街道，行車艱難。1978年，為改善當地交通條件，江底雙曲拱橋正式開工建設。從鐵索橋到鋼梁橋再到雙曲拱橋，3座不同時期建設的橋梁下游往上依次跨越牛欄江，常被攝入同一照片里，“江底三橋”成為人們津津樂道的話題。

2.2 金針菇DF改性工藝參數優化

表3為纖維素酶改性正交試驗設計與結果，表4為高溫蒸煮改性正交試驗設計與結果。根據表3中的極差（R）分析得出各因素對金針菇改性SDF得率影響的主次順序為B＞C＞A，即纖維素酶用量＞酶解時間＞液料比。最佳改性工藝組合是A3B2C3，即液料比35∶1、纖維素酶用量1.5%、酶解時間2.0 h，按照此方案進行驗證試驗，得到SDF得率為16.2%。從表4中的極差（R）分析得出各因素對金針菇改性SDF得率影響的主次順序為B＞C＞A，即蒸煮溫度＞蒸煮時間＞液料比。最佳改性工藝組合是A2B3C3，即液料比30∶1、蒸煮溫度125 ℃、蒸煮時間50 min，按照此方案進行驗證實驗，SDF得率為20.4%。由此可以看出高溫蒸煮改性SDF得率高于纖維素酶改性。

表3 纖維素酶改性金針菇DF正交試驗結果Table 3 Orthogonal array design with experimental values of SDF yield by cellulase modification

表4 高溫蒸煮改性金針菇DF正交試驗結果Table 4 Orthogonal array design with experimental values of SDF yield by high-temperature cooking modification

2.3 金針菇膳食纖維改性前后理化性質

DF分子結構中含有許多羧基和羥基的側鏈基團，可以與陽離子進行可逆交換[24]。從圖3可以看出，NaOH溶液消耗體積為0～1 mL時，幾種方法處理的溶液pH值上升都較慢，NaOH溶液消耗體積為1～3 mL時，幾種方法處理的溶液pH值上升較快，其中高溫蒸煮處理溶液pH值上升最快，pH值為7時NaOH溶液消耗體積為1.6 mL，纖維素酶處理溶液在pH值為7時NaOH溶液消耗體積為1.7 mL，未改性處理的溶液pH值為7時NaOH溶液消耗體積為2 mL，當NaOH溶液消耗體積超過3 mL時，幾種溶液的pH值緩慢上升直至接近11。在相同pH值條件下，NaOH溶液消耗體積越小則陽離子交換能力越強。由此可以看出陽離子交換能力依次為高溫蒸煮改性組＞纖維素酶改性組＞未改性組。

圖3 改性處理前后金針菇DF陽離子交換能力比較Fig. 3 Comparison of cation exchange power of Flammulina velutipes DF before and after modification

從圖4中可以看出，纖維素酶改性法和高溫蒸煮改性法都能明顯提高DF的葡萄糖吸收能力，葡萄糖吸收能力從10.2 mmol/g分別提高到16.8 mmol/g和18.3 mmol/g，葡萄糖吸收能力由大到小依次為高溫蒸煮改性組＞纖維素酶改性組＞未改性組。葡萄糖吸收能力主要受SDF含量的影響，改性使金針菇SDF含量提高，DF結構表面積增大，表面變得疏松多孔，對葡萄糖吸收能力產生積極作用，產生良好的水合作用，這與Ma Mengmei等[25]的研究結果相一致。

圖4 改性前后金針菇DF葡萄糖吸收能力比較Fig. 4 Comparison of glucose absorption capacity of Flammulina velutipes DF before and after modification

膽固醇過高是誘發心腦血管疾病的主要病因之一，果膠和β-葡聚糖等SDF可以在胃腸中形成凝膠態，增加胃腸中食物黏稠度，促進對食物中膽固醇的吸收從而降低腸道對膽固醇的吸收[26]。如圖5所示，纖維素酶改性法和高溫蒸煮改性法都能明顯提高膽固醇吸附力，膽固醇吸附力從5.1 mg/g分別上升到9.8 mg/g和10.1 mg/g。膽固醇吸附力由大到小依次為纖維素酶改性組＞高溫蒸煮改性組＞未改性組。

圖5 改性前后金針菇DF膽固醇吸附力比較Fig. 5 Comparison of cholesterol adsorption capacity of Flammulina velutipes DF before and after modification

2.4 金針菇DF改性前后的微觀結構

如圖6所示，3 種方法處理的DF結構差別較大。未改性處理的DF結構較為緊密；經過纖維素酶改性處理的DF結構中孔狀結構較多，可能是DF主要成分為纖維素，纖維素酶分解一部分纖維素轉變為SDF所致；而高溫蒸煮改性處理的DF結構表面疏松多孔，且表面多呈現絲狀結構，原因可能是高溫迫使DF結構發生改變，使得相當一部分IDF轉換成SDF溶解在水中[27]。由此可以看出，兩種改性處理方法均可以使金針菇DF具有更大的表面積和多孔結構，且高溫蒸煮改性的效果比纖維素酶改性效果更為顯著。

圖6 改性前后金針菇DF掃描電子顯微鏡圖Fig. 6 SEM photographs of Flammulina velutipes DF before and after modification

2.5 金針菇DF改性前后傅里葉變換紅外光譜分析結果

如圖7所示，3 種方法處理的DF在吸收峰上沒有明顯的變化，在3 400 cm－1附近出現一個較寬的吸收峰，是典型的纖維素和半纖維素O—H伸縮振動帶，說明存在分子間的氫鍵作用力，在2 900 cm－1附近出現一個較弱的吸收峰，主要由糖類亞甲基上的C—H基團伸縮振動引起，在1 630 cm－1處出現木質素中芳香苯基團產生的吸收峰，在1 370 cm－1處出現糖醛酸的C=O特征吸收峰，在1 040 cm－1處出現一個較強的吸收峰，主要由纖維素和半纖維素中醚鍵C—O—C伸縮振動引起。觀察到高溫蒸煮改性在各波數吸收峰的透光率較高，說明高溫蒸煮可以破壞一定的纖維素和半纖維素結構，產生具有可溶性的小分子物質[28]，符合預期的改性效果。

圖7 改性前后金針菇DF傅里葉變換紅外光譜圖Fig. 7 Fourier transform infrared spectra of Flammulina velutipes DF before and after modification

2.6 小鼠高脂肥胖模型造模結果

由體內脂代謝異常造成血漿中多種脂質指標高于正常水平的病癥稱為高血脂癥。研究表明，高脂飲食能夠增加血漿中TG、TC、LDL-C水平，降低HDL-C水平[29-30]。由表5可知，高脂肥胖模型組與空白對照組體質量和TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均有極顯著差異，說明小鼠造模成功。

表5 高脂肥胖模型造模實驗結果Table 5 Body mass and blood lipids in control and high fat diet-induced obese mice

2.7 金針菇膳食纖維對高脂肥胖小鼠各項生理指標的影響

2.7.1 膳食纖維對高脂肥胖模型小鼠體質量的影響

從表6可以看出，實驗組與模型組初始體質量無明顯差異，隨著時間的推移，各實驗組與模型組開始出現差異性，從第2周開始，DF中劑量組和高劑量組小鼠體質量顯著低于模型組體質量（P＜0.05），從第3周開始，陽性對照組、DF中劑量組和DF高劑量組體質量極顯著低于模型組小鼠（P＜0.01），第4周DF低劑量組小鼠體質量顯著低于模型組小鼠（P＜0.05）。上述結果表明DF對小鼠肥胖具有一定的抑制作用，且DF中劑量組和高劑量組對小鼠肥胖具有較好抑制作用，可能是由于DF對小鼠腸道內油脂具有一定的吸附作用，能夠減少腸道對油脂吸收，使油脂隨糞便排出體外。

表6 金針菇DF對高脂肥胖模型小鼠體質量的影響Table 6 Effect of Flammulina velutipes DF on body mass of high fat diet-induced obese mice

2.7.2 膳食纖維對高脂肥胖模型小鼠的血脂水平影響

由表7可知，模型組中TG、TC和LDL-C濃度顯著高于空白對照組，而HDL-C濃度顯著低于空白對照組，說明食用高脂飼料導致模型組小鼠血脂水平異常。實驗組TG濃度均與模型組存在極顯著差異（P＜0.01），DF中劑量組和高劑量組與空白對照組無顯著差異，說明中劑量組和高劑量金針菇DF可有效改善高血液TG水平；模型組、陽性對照組和DF低劑量組與空白對照組TC濃度存在極顯著差異（P＜0.01），而DF中劑量組和高劑量組與空白對照組差異不顯著，且與模型組存在極顯著差異（P＜0.01），DF中劑量組和高劑量組比陽性對照組更能有效改善血液TC水平，這與2.3節膽固醇吸附力結果吻合；各實驗組與模型組HDL-C水平均存在顯著差異，DF高劑量組和陽性對照組與空白對照組無顯著性差異，DF高劑量組和陽性對照組能夠極顯著提高血液中HDL-C水平（P＜0.01）。中劑量組和高劑量組LDL-C濃度與空白對照組無顯著性差異，與模型組相比，中劑量組和高劑量組均能極顯著降低血液LDL-C水平（P＜0.01）。

表7 金針菇DF對高脂肥胖模型小鼠血脂水平的影響Table 7 Effect of Flammulina velutipes DF on serum lipid parameters of high fat diet-induced obese mice

2.7.3 膳食纖維對高脂肥胖模型小鼠血清抗氧化指標的影響

SOD、GSH-Px活力為血清抗氧化能力評價指標。如表8所示，模型組與DF低劑量組血清SOD活力極顯著低于空白對照組（P＜0.01），與模型組相比，陽性對照組、DF中劑量組和DF高劑量組能極顯著提高血清中SOD活力（P＜0.01）。與空白對照組相比，模型組和DF低劑量組血清GSH-Px活力極顯著降低（P＜0.01），陽性對照組血清GSH-Px活力極顯著升高（P＜0.01）；與模型組相比，其余組別GSH-Px活力極顯著升高（P＜0.01）。

表8 金針菇DF對高脂肥胖模型小鼠血清抗氧化指標的影響Table 8 Effect of Flammulina velutipes DF on serum antioxidant indices in high fat diet-induced obese mice

3 結 論

本實驗采用纖維素酶法和高溫蒸煮法對DF進行改性，在單因素試驗基礎上得到改性最佳工藝優化參數，纖維素酶法按照最佳優化水平組合驗證，測得SDF得率為16.2%；高溫蒸煮法按照最佳優化水平組合驗證，測得SDF得率為20.4%，表明高溫蒸煮法獲得的SDF得率較高。將兩種處理方法得到的DF與未改性改性的DF進行理化性質對比，發現高溫蒸煮法改性DF在陽離子交換力、膽固醇吸附力和葡萄糖吸收能力均優于纖維素酶法改性DF。此外，掃描電顯微鏡鏡觀察和傅里葉變換紅外光譜分析結果表明，高溫蒸煮改性法所得SDF微觀結構更加疏松多孔，透光率更高，與理化性質分析結果一致。最后建立小鼠高脂肥胖模型，通過飼喂3 種含不同劑量的DF飼料，探究金針菇DF對高脂肥胖模型小鼠生理指標的影響，結果表明金針菇DF對高脂肥胖模型小鼠的體質量、血脂以及血清抗氧化等各項指標均有顯著的改善效果。