CTRP1、HMGB1、CAM水平變化與腦卒中患者神經功能損傷程度的關系研究

錢晶，谷麗麗

（河南省直第三人民醫院 神經內科，河南 鄭州 450000）

腦卒中的發生，能夠導致患者短期內致殘率和不良臨床結局發生率的上升，從而增加患者的多器官功能障礙風險［1］。部分研究者認為，腦卒中的發病率可超過475/1 萬人左右，部分高危地區腦卒中的發病率可進一步的上升［2］。臨床上對于腦卒中患者的病情評估具有重要的意義，對于神經功能的評估，能夠在疾病的治療及臨床預后隨訪方面發揮重要的作用。血清學炎癥性相關因子，能夠在病情的進展及臨床預后隨訪方面發揮作用。腫瘤壞死因子相關蛋白（CTRP1）能夠通過誘導炎癥反應，加劇瀑布式炎癥反應的激活，進而促進腦組織的炎癥性損傷，加劇腦功能的障礙［3］；高遷移率族蛋白1（HMGB1）能夠通過誘導趨化因子的富集，募集炎癥因子的沉積，進而促進腦組織的損傷和功能的障礙［4］；鈣調蛋白（CAM）的表達改變，能夠通過影響到神經元細胞內鈣離子的超載，進而誘導神經元細胞的線粒體損傷，促進神經元的凋亡［5］。為了揭示CTRP1、HMGB1、CAM 的表達及其與腦卒中患者的神經功能障礙的關系，本次研究選取選取2019 年6 月至2020 年6 月在河南省直第三人民醫院接受治療的腦卒中患者為研究對象，探討了CTRP1、HMGB1、CAM 的表達情況，并分析了相關指標與腦卒中患者的病情關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年6 月至2020 年6 月河南省直第三人民醫院收治的92 例腦卒中患者，設為觀察組，其中男50 例，女42 例；年齡54～75 歲，平均（63.74±4.33）歲。納入標準：①年齡≥50 周歲；②經CT 或相關檢查確診為腦卒中；③無其他系統嚴重疾病者；④均為首次發病。排除標準：①臨床資料不全者；②合并其他嚴重基礎疾病者；③死亡病例。另選取來院體檢的健康人士92 例作為對照組，其中男51 例，女41 例；年齡52～78歲，平均（63.86±4.45）歲。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本項研究經醫院倫理委員會評審通過，且所有參與者均知情同意。

1.2 方法

取受試者靜脈血4 mL，1 500 r/min 離心15 min，取上清液，在每個聚苯乙烯板中加入上述液體0.1 mL，4℃過夜孵育，加入磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌3 次，每次3 min，在每個聚苯乙烯板孔中加入CTRP1、HMGB1、CAM 抗體（1∶800，購自南京伯斯金生物公司），37℃孵育30 min，加入PBS 洗滌3 次，3 min/次，每孔中加入四甲基聯苯胺（TMB）溶液底物0.1 mL，37℃，20 min，加入2 M 硫酸0.05 mL 終止反應，采用Varioskan LUX 多功能酶標儀（上海賽默飛世爾科技有限公司）進行OD 值檢測。

1.3 評價指標

觀察兩組研究對象CTRP1、HMGB1、CAM 水平，分析腦卒中患者CTRP1、HMGB1、CAM 與神經功能損傷程度的相關性。神經功能損傷程度采用美國國立衛生研究院卒中量表（NIHSS）評估（均在入院時完成）：小于7 分：輕型神經功能缺損；7～15 分：中型神經功能缺損；大于15 分：重型神經功能缺損。患者出院后第三個月月底進行電話隨訪，并采用改良的Rankin 量表（MRS）評估患者預后，滿分5 分，≤2 分預后良好，＞2 分預后不良。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0 軟件對數據進行分析。計數資料以例表示；計量資料以均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗和F檢驗（兩兩比較采用LSD-t檢驗）。相關性采用Pearson 相關分析法分析。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較

觀察組患者的CTRP1、HMGB1、CAM 水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組研究對象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（n=92,±s）

表1 兩組研究對象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（n=92,±s）

2.2 不同神經功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較

根據NIHSS 評分將患者分為輕型神經功能缺損39 例，中型神經功能缺損31 例，重型神經功能缺損22 例。不同神經功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平存在明顯不同，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同神經功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（±s）

表2 不同神經功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（±s）

2.3 腦卒中患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平與神經功能損傷程度的相關性

腦卒中患者的CTRP1、HMGB1、CAM 水平與神經功能損傷程度均呈正相關，差異有統計學意義（r=0.764、0.737、0.801,P＜0.05）。

2.4 不同預后患者CTRP1、HMGB1、CAM水平

預后不良組患者29 例，預后良好患者63 例。預后不良組患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平顯著高于預后良好組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同預后患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平（±s）

表3 不同預后患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平（±s）

3 討論

臨床上不同的病理性改變，能夠通過誘導腦血管內皮細胞的損傷，加劇粥樣斑塊的沉積，進而提高腦卒中的發生風險。在具有基礎性高血脂癥或者動脈管壁硬化的患者中，腦卒中的發病率和病死率可進一步的惡化［6-7］。長期的觀察發現，腦卒中患者的總體生存時間較短，其短期內病情變化較快，治療后的神經功能缺損表現較為明顯［8］。而臨床上缺乏對于腦卒中患者神經功能缺損的相關評估性指標，雖然影像學指標能夠在腦卒中患者的病情評估過程中發揮作用。但部分單中心的臨床分析研究可見，磁共振或者頭顱CT 檢查，對于腦卒中患者神經功能評估的一致性率不足45%，其對于患者病情演變評估的靈敏度較低［9］。本次研究對于腦卒中患者血清中CTRP1、HMGB1、CAM 的表達分析研究，能夠揭示腦卒中患者病情進展機理的同時，為臨床上腦卒中患者的神經功能缺損評估提供參考。

CTRP1 是炎癥性相關因子，其作為腫瘤壞死因子家族成員，能夠通過直接誘導神經元細胞的損傷，促進神經元膜完整性的破壞，進而加劇腦組織的功能損傷和神經功能障礙的發生。相關研究還認為，CTRP1 能夠在機理上誘導腫瘤壞死因子α 或者白細胞介素-6（IL-6）的富集，進而加劇炎癥信號通路的激活，提高腦卒中患者的病情進展速度［10］；HMGB1 是趨化因子相關家族成員，其能夠誘導補體成分C3、C4 的激活，進而提高其對于腦組織的浸潤和損傷作用［11］；CAM 是鈣離子調控相關蛋白，其能夠提高鈣離子的內流速度，加劇神經元細胞的鈣超載負荷，進一步加劇神經元細胞的破壞［12］。部分研究者探討了HMGB1 的表達與腦卒中的關系，認為在腦卒中患者中，HMGB1 的表達明顯上升，但缺乏對于CTRP1、CAM 的分析研究。

對于腦卒中患者血清中CTRP1、HMGB1、CAM 的分析研究可見，在腦卒中病例組患者中，CTRP1、HMGB1、CAM 的表達濃度均明顯上升，高于正常對照組人群，統計學差異較為明顯，提示了CTRP1、HMGB1、CAM 的高表達均可能影響到了腦卒中的病情進展。其具體基礎方面的機理，可能考慮與CTRP1、HMGB1、CAM 的下列幾個方面的病理生理性改變有關［13-14］：①CTRP1 能夠誘導腫瘤壞死因子家族成員的激活，提高了下游炎癥性信號通路NF-KB 的激活程度，進而促進了腦組織的破壞；②HMGB1 能夠提高趨化蛋白的富集，促進其對于腦血管內皮細胞的浸潤和損傷，加劇了腦組織的缺血性氧化應激性損傷；③CAM能夠提高線粒體鈣離子的超載，導致線粒體的功能障礙，加劇了線粒體的功能損傷。沈顯群等［15］研究者發現了與本次研究相似的結論，其發現在腦卒中患者中，HMGB1 的表達濃度可明顯上升，平均上升幅度可超過35%以上，同時在具有明顯的腦功能缺損的患者中，HMGB1 的表達波動更為顯著。NIHSS 評分是評估患者腦功能缺損的評分指標，腦卒中患者的相關評分明顯的上升，腦功能的缺損較為明顯，提示了腦卒中患者的腦功能的障礙，這主要由于腦組織的缺血性損傷，促進了神經元細胞的凋亡，導致神經電沖動傳遞的異常，進而影響到了腦功能。相關關系分析研究可見，CTRP1、HMGB1、CAM 的表達與腦卒中患者的腦功能評分正相關，預后不良組患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平顯著高于預后良好組。進一步提示了CTRP1、HMGB1、CAM 的表達與腦卒中患者的病情關系，這主要由于相關指標的波動，能夠反應患者神經膠質細胞或者神經元的損傷程度，進而評估病情進展。臨床上可以通過檢測CTRP1、HMGB1、CAM，分析腦卒中患者腦神經損傷情況，同時預測患者臨床結局。

綜上所述，在腦卒中患者中，CTRP1、HMGB1、CAM 的表達明顯上升，同時CTRP1、HMGB1、CAM 的表達與腦卒中患者的腦功能評分密切相關。后續臨床研究可以深入探討相關指標的診斷學價值。