血清學檢測在胃癌一級親屬中的篩查研究

王文玲，高孝忠

(1.濱州醫學院，山東 煙臺 264003；2.威海市文登區人民醫院消化內科，山東 威海 264400；3.威海市立醫院消化內科，山東 威海 264200)

0 引言

胃癌侵襲性高、死亡率高，是常見的消化道惡性腫瘤。2020 年全球癌癥最新統計數據[1]顯示，2020 年全球大約有108.9 萬例新發胃癌病例和76.9 萬例胃癌死亡病例，在全球前10 位惡性腫瘤中胃癌的新發病例數占到了第五位，胃癌的死亡病例數占全部惡性腫瘤的第四位。胃癌一級親屬(FDRs)是胃癌高風險人群，其發生胃癌及胃癌前病變的幾率要高于普通人群[2]。2011年西東京醫學會倡議將幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp) 和血清胃蛋白酶原(Pepsinogen,PG)的聯合測定方法作為胃癌的大規模篩查方法，已在日本和歐洲應用多年，證實其對胃癌及胃癌前疾病的診斷具有重要的臨床價值，可作為篩選胃癌高風險人群的重要指標[3]。目前關于胃癌一級親屬血清學檢測的報道并不多見，本研究通過分析不同人群Hp 感染率和血清PG 水平，探討胃蛋白酶原聯合幽門螺桿菌抗體分型在胃癌一級親屬中檢測的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019 年3 月至2020 年12 月威海市文登區人民醫院確診胃癌患者39 例(經胃鏡及病理學證實)，隨機選取與其年齡、性別相匹配的參加威海市農村胃癌篩查的慢性胃炎41 例；選取胃癌一級親屬40 例，隨機選取與其年齡、性別相匹配的查體中心健康體檢人群38 例，受試者均空腹抽取血標本后送至威海市立醫院中心實驗室，測定Hp 抗體分型及PG Ⅰ、PG Ⅱ的水平，并計算PGR。其中胃癌組男25 例、女14 例，平均年齡(65.33±6.38)歲，慢性胃炎組男21 例、女20 例，平均年齡(63.49±4.09)歲，兩組間性別、年齡比較差異無統計學意義(P＞0.05)；胃癌一級親屬組男22 例、女18 例，平均年齡(42.05±9.83)歲，健康體檢組男22 例、女16 例，平均年齡(45.11±6.79)歲，兩組間性別、年齡比較差異無統計學意義(P＞0.05)。排除標準：孕婦或哺乳期患者；合并有其他活動期惡性腫瘤、腦中風、心肌梗塞等嚴重原發性疾病；有除胃癌外其他消化道腫瘤病史、腹部外科手術病史患者；有精神病病史患者。本研究經威海市立醫院倫理委員會批準并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

血清PG、Hp 抗體分型檢測：受檢者均需空腹8-10h，清晨采集其空腹肘部靜脈全血5mL 于抗凝管內，在離心機中3500r/min 離心5min，分離出上層血清并裝入干燥凍存管中，放置于-70℃低溫冰箱備檢。以酶聯免疫吸附測定法(ELISA)檢測血清PG Ⅰ、PG Ⅱ水平，并自動計算PG Ⅰ/PG Ⅱ比值(PGR)，Maglumi 4000P 全自動化學發光免疫分析儀及檢測試劑盒由深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司提供；H.pylori 抗體分型檢測使用免疫印跡法，移脫色搖床由海門市其林貝爾儀器制造有限公司提供、檢測試劑盒由深圳市伯勞生物制品有限公司提供；具體步驟嚴格按說明書進行操作。

1.3 統計學方法

采用 SPSS 25.0 軟件進行統計學分析。率的比較采用χ2檢驗。定量資料先用Shapiro-Wilk 檢驗進行正態性檢驗。符合正態分布的計量變量用(±s)表示，兩組間數據比較采用獨立樣本t檢驗；呈偏態分布的計量變量采用中位數表示集中趨勢，用百分位數P25和P75表示離散趨勢[M(P25-P75)]，兩組間數據比較采用 Mann-Whitney U 秩和檢驗，均以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胃癌組和慢性胃炎組Hp 感染率的比較

胃癌組和慢性胃炎組Hp 感染率比較差異無統計學意義(P＞0.05)；但Ⅰ型Hp 感染率胃癌組較慢性胃炎組明顯增高，組間比較差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 胃癌組和慢性胃炎組Hp 感染率的比較

2.2 胃癌一級親屬組和健康體檢組Hp 感染率的比較

胃癌一級親屬組的Hp 感染率和Ⅰ型Hp 感染率均較健康體檢組明顯增高，組間比較差異有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 胃癌一級親屬組和健康體檢組Hp 感染率的比較

2.3 胃癌組和慢性胃炎組PG 水平的比較

胃癌組的PG Ⅰ和PGR 水平均較慢性胃炎組明顯降低(P＜0.05)；胃癌組和慢性胃炎組的PG Ⅱ水平差異無統計學意義(P＞0.05)。見表3。

表3 胃癌組和慢性胃炎組PG 水平的比較[M(P25-P75)]

2.4 胃癌一級親屬組和健康體檢組PG 水平的比較

胃癌一級親屬組的PG Ⅰ和PG Ⅱ水平均較健康體檢組明顯降低(P＜0.05)；胃癌一級親屬組和健康體檢組的PGR 水平差異無統計學意義(P＞0.05)。見表4。

表4 胃癌一級親屬組和健康體檢組PG 水平的比較[M(P25-P75)]

3 討論

胃癌起病隱匿，早期胃癌缺乏特異性癥狀，患者因消化道癥狀去醫院檢查時大多已發展至晚期，五年生存率低，而早期胃癌內鏡下切除五年生存率可到達90%[4]。目前認為胃癌診斷的金標準仍然為胃鏡下病理組織檢查，但由于缺乏熟練的內鏡檢查專家、內鏡設備等醫療資源相對不足、居民依從性差等原因，進行全國性的胃鏡篩查并不可行，應探索針對胃癌的靶向篩查策略，風險分層可有助于篩選高風險人群，將有限的資源運用到最需要的人群，逐步提高早期胃癌的檢出率，提高篩查的成本效益[5]。血清學檢查在胃癌篩查中的作用逐漸受到關注和重視。血清胃蛋白酶原由兩種生化和免疫學上不同的類型組成，分別是胃蛋白酶原I(PGI)和胃蛋白酶原II(PGII)，是胃內無活性的胃蛋白酶前體，胃蛋白酶原進入胃腔后，可在胃酸作用后變成有消化功能的胃蛋白酶，只有大約1%的胃蛋白酶原可透過毛細血管進入到血液循環[6]，胃蛋白酶原水平可反應胃黏膜的腺體數量和分泌功能。幽門螺桿菌使宿主產生炎癥反應和胃粘膜上皮細胞增生，產生活性氧，增加了DNA 損傷和細胞突變的機會[7]。幽門螺桿菌可以誘導腫瘤抑制基因的啟動子DNA 甲基化而導致轉錄失活，干擾抑癌基因的活性而激活癌細胞[8]。胃癌一級親屬屬于胃癌高風險人群，一項薈萃分析[9]顯示，亞洲的胃癌一級親屬發生胃癌的風險是普通人群的2.71 倍。而針對這部分人群的血清學報道并不多見。

一項薈萃分析[10]顯示，我國Hp 總感染人口數將近7.7 億，Hp 感染率高達55.8%。我國幽門螺桿菌感染存在地區差異，胃癌高發區的Hp 感染也高[11]。Hp 在家庭中傳播是其感染的重要途徑，許多研究表明Hp 感染具有家庭聚集現象[12-13]。本研究中顯示胃癌組Hp 感染率雖略高于慢性胃炎組，但差異并無統計學意義，胃癌一級親屬組的Hp 感染率較年齡、性別相匹配的健康體檢組明顯增高。四組中Hp 感染率最低的健康體檢組的Hp 感染率也接近50%，表明威海地區Hp 感染率普遍較高，胃癌組和慢性胃炎組Hp 感染率無明顯差異考慮與人群普遍易感有關。我國一項病例對照研究[14]顯示胃癌一級親屬與年齡、性別相匹配的消化不良對照組相比，前者Hp感染率明顯增高。巴西一項研究[15]同樣顯示胃癌親屬Hp 感染率較對照組增高，其腸上皮化生、不典型增生和早期胃癌的檢出率與對照組相比均明顯增高。本研究結果還顯示，胃癌組和胃癌一級親屬組的Ⅰ型Hp 感染率均較其對照組顯著增高。Ⅰ型Hp 菌株分泌的細胞毒素相關蛋白 A(Cytotoxinassociated gene A，CagA)和細胞空泡毒素 A(Vacuolating cytotoxin A，VacA)，是幽門螺桿菌的主要毒力因子[16]，與胃癌的發生密切相關。CagA 可導致促進炎癥反應及促有絲分裂反應，誘導胃上皮細胞異常增殖及凋亡，增加了癌前病變及胃癌發生的風險[17]。有研究表明，感染CagA 陽性菌株和VacA陽性菌株(特別是s1/m1 基因型)的幽門螺桿菌菌株會增加癌前病變和胃癌的風險[18]。

萎縮性胃炎的特征是胃中特定細胞和腺體的丟失，被認為是胃癌的癌前病變，胃黏膜萎縮后，胃底黏膜主細胞減少、分泌功能下降，PG Ⅰ水平隨之降低，PG Ⅱ因其來源廣泛水平并未明顯下降，PG Ⅰ/PG Ⅱ比值(PGR)降低[19]。血漿中的PG Ⅰ水平降低和PG Ⅰ/PG Ⅱ比值低是萎縮性胃炎的相關指標[20]，與胃癌風險升高相關。夏威夷一項病例對照研究表明，Hp 感染陽性且PGI 水平或PGR 水平低的人極易發生非賁門胃癌[21]。本研究中胃癌組的PG Ⅰ和PGR 水平均較慢性胃炎組明顯降低，結果與之前研究相符。本研究中胃癌一級親屬組的PG Ⅰ和PG Ⅱ水平均較健康體檢組明顯降低，但PGR 水平差異無統計學意義。我國一項研究對受試者進行PG 和Hp 抗體聯合檢測，結果顯示最易患胃癌的人群是有胃癌家族史的一級親屬(FDRs)、男性和50 歲或以上的人群[22]。PG Ⅱ水平通常認為與幽門螺桿菌感染的炎癥有關，有研究表明Hp 陽性受試者的PG Ⅱ水平的平均值顯著高于Hp陰性受試者[23]，本研究結果與之前研究不符考慮與受試人群不同、樣本量較小有關。

綜上，胃癌一級親屬的Hp 感染率明顯高于普通人群，可能較普通人群更易發生胃癌及胃癌前病變。血清學檢測異常者建議胃鏡檢查并定期隨訪，以提高胃癌的早診率。