上皮性卵巢癌組織中MUC1、BDNF的表達及意義

李婭茹，林 萍

河北省衡水市人民醫院婦科，河北衡水 053000

有流行病學調查顯示，在婦科腫瘤性疾病中，上皮性卵巢癌患者的5年生存率僅達到30%左右[1]。上皮性卵巢癌的發病較為隱匿，往往在患者確診為上皮性卵巢癌時，疾病已經進展至中晚期或發生轉移。目前對于上皮性卵巢癌的診斷方法還未形成統一的標準[2]。有研究報道顯示，上皮性卵巢癌患者的進展與多種分子以及遺傳變化相關[3]。已有的研究顯示，上皮性卵巢癌的進展與基因組的結構、生長因子受體以及抑癌基因的平衡相關[4]。黏蛋白1(MUC1)水平在多種腺癌中都明顯升高，其主要由高度糖基化及非糖基化的區域性蛋白質形成，在正常的細胞中，MUC1含有大量的糖基化片段，而在腫瘤細胞中，由于細胞表面的免疫抗原表位支鏈覆蓋，所以在腫瘤細胞中MUC1水平明顯上升[5]。腦源性神經營養因子(BDNF)主要存在于神經系統中，該蛋白的異常表達可進一步激活磷脂酰肌醇-3激酶信號通路，促進腫瘤細胞的惡性增殖以及對周邊組織的浸潤[6]。本研究主要研究上皮性卵巢癌組織中MUC1、BDNF mRNA表達水平與患者預后的相關性，為上皮性卵巢癌的臨床治療以及效果評估提供科學依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 采用前瞻性研究的方法，以2015年9月至2017年12月在本院進行診斷并治療的62例上皮性卵巢癌患者作為研究對象。患者年齡30～64歲，平均(43.52±2.44)歲；平均體質量指數為(24.56±2.55)kg/m2；病理類型：黏液性癌23例，漿液性癌癥39例；分化程度：低分化22例，中分化26例，高分化14例；國際婦產科協會(FIGO)分期：Ⅰ～Ⅱ期33例，Ⅲ～Ⅳ期患者29例。所有研究對象均簽署知情同意書，并經醫院倫理委員會論證通過。

納入標準：(1)符合上皮性卵巢癌診斷標準[7]；(2)預計生存時間>6個月；(3)KPS[6]評分均≥70分；(4)入組后，所有患者均進行手術治療。排除標準：(1)心、肝、腎功能嚴重不全者；(2)存在交流障礙的患者。采用門診復查或電話形式對患者進行3年隨訪，截止時間為死亡或隨訪結束。

1.2方法 取患者的病灶部位以及癌旁組織進行勻漿處理后，以Trizol法進行總RNA提取，然后進行反轉錄反應合成cDNA，采用SYBR Green Ⅰ實時熒光PCR法進行擴增，檢測癌組織和癌旁組織中MUC1和BNDF的mRNA表達水平。MUC1上游引物：5′-CCCACCAATTTCTCGGACACT-3′，MUC1下游引物：5′-CAGTTCAGGATCCCCGCTATC-3′;BDNF上游引物：5′-TACATCTGGCTACTGGGTGTCGTATC-3′，BDNF下游引物：5′-TCGCAGGGTCCGAGGTATTC-3′;以GAPDH作為內參基因，GAPDH上游引物：5′-TCATGGGTGTGAACCATGAGAA-3′，GAPDH下游引物：5′-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3′。使用2-ΔΔCt計算MUC1、BDNF mRNA的相對表達量。

2 結 果

2.1癌組織和癌旁組織MUC1、BDNF mRNA表達水平比較 癌組織的MUC1、BDNF mRNA表達水平均高于癌旁組織(P<0.05)。見表1。

表1 癌組織和癌旁組織的MUC1、BDNF mRNA表達水平比較

2.2不同臨床病理特征患者癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平比較 不同年齡上皮性卵巢癌患者癌組織的MUC1、BDNF mRNA表達水平差異均無統計學意義(P>0.05)。病理類型為漿液性癌的患者癌組織中MUC1、BDNF mRNA表達水平明顯高于黏液性癌患者(P<0.05)；FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期的患者癌組織中MUC1、BDNF mRNA表達水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)；低分化程度的患者癌組織中MUC1、BDNF mRNA水平明顯高于中、高分化的患者(P<0.05)。見表2。

表2 不同臨床病理特征患者癌組織TMUC1、BDNF mRNA水平比較

續表2 不同臨床病理特征患者癌組織TMUC1、BDNF mRNA水平比較

2.3不同預后患者癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平比較 隨訪結束后，生存組42例，死亡組20例，生存組患者癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平均明顯低于死亡組(P<0.05)。見表3。

表3 不同預后患者癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平比較

2.4相關性分析 上皮性卵巢癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平與患者生存情況呈負相關(r=-0.689、-0.551，P<0.05)，與病理類型由黏液性癌變為漿液性癌呈正相關(r=0.581、0.462，P<0.05)，與FIGO分期呈正相關(r=0.470、0.774，P<0.05)，與癌組織分化程度呈負相關(r=-0.592、-0.513，P<0.05)。見表4。

表4 癌組織中MUC1、BDNF mRNA水平與患者臨床病理特征、預后的相關性分析

3 討 論

上皮性卵巢癌是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，在婦科惡性腫瘤的發病率中，上皮性卵巢癌位列第3[8]。在臨床診療過程中，上皮性卵巢癌因其較高的病死率和發病率，已經成為臨床醫師共同關注的焦點。目前對于上皮性卵巢癌的發病機制尚不明確，多數患者在明確診斷時已處于中晚期，這也是造成上皮性卵巢癌患者病死率較高的原因之一[8]。目前在上皮性卵巢癌的治療中，化療是主要的輔助性手段，但有嚴重的不良反應，所以臨床對于靶向治療藥物的研發具有重要的意義[9]。有研究顯示，在上皮性卵巢癌患者的治療中，MUC1可作為重要的靶向治療點[10]。BDNF主要存在于機體的神經系統中，BDNF 異常高表達能夠通過激活磷脂酰肌醇-3 激酶信號通路，進而促進腫瘤細胞的惡性增殖以及向周邊組織的浸潤[11]。

本研究顯示，與癌旁組織相比，上皮性卵巢癌患者癌組織的MUC1、BDNF mRNA表達水平均升高(P<0.05)。有分析認為，隨著患者BDNF mRNA表達水平的升高，BDNF/TrkB 信號通路呈現明顯的過度活化，從而增強腫瘤細胞的增殖能力[12-13]。也有研究顯示，BDNF可通過對鈣離子依賴性酪氨酸激酶的磷酸化，促進鈣離子的流動性，進一步促進腫瘤細胞的進展[14]。閆洪亮等[15]通過下調上皮性卵巢癌組織的BDNF基因表達，降低了Akt磷酸化水平，進而促進人上皮性卵巢癌 OV2008 細胞凋亡和侵襲能力減弱。有研究報道顯示，MUC1可通過與核因子-κB結合，促進細胞程式死亡-配體1(PDL1)水平的升高，在一定程度上增強了免疫逃逸機制，從而促進腫瘤細胞的增殖[16]。在直腸癌患者的治療中，通過對患者的MUC1靶向抑制性作用，可抑制腫瘤細胞的增生[17]。李程程等[18]對上皮性卵巢癌患者的MUC1水平進行了分析，發現隨著疾病的進展，患者的MUC1水平呈現明顯上升趨勢，并且與卵巢癌細胞的黏附性相關。在本研究中，上皮性卵巢癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平比較，死亡組高于生存組(P<0.05)，病理類型為漿液性癌的患者高于黏液性癌患者(P<0.05)，FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期的患者高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)，低分化程度的患者高于中、高分化程度患者(P<0.05)，這均與上述研究相互印證。

本研究相關性分析顯示，上皮性卵巢癌患者癌組織MUC1、BDNF mRNA表達水平與患者生存情況呈負相關(r<0，P<0.05)，與病理類型由黏液性癌變為漿液性癌呈正相關(r>0，P<0.05)，與FIGO分期等級呈正相關(r>0，P<0.05)，與分化程度呈負相關(r<0，P<0.05)，提示分析上皮性卵巢癌組織的MUC1、BDNF mRNA表達水平對于患者預后判斷具有積極的意義。但是本研究存在一定的局限性，即樣本量少，有待日后采集更大樣本量進行分析。

綜上所述，上皮性卵巢癌組織中MUC1、BDNF mRNA表達水平與患者生存情況、病理類型、FIGO分期及分化程度密切相關，可為評估患者治療效果及疾病進展提供重要依據。