乙醛脫氫酶2 基因多態(tài)性在人群中的分布特點(diǎn)及其與肝臟生化學(xué)及脂質(zhì)代謝之間的關(guān)系

毛春杰，李穎怡，郭翠芬，章瑞南，汪余勤，曹海霞

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）已取代慢性乙型病毒性肝炎成為世界范圍內(nèi)慢性肝病的第一大病因[1]，其疾病譜包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及相關(guān)肝硬化、肝癌。研究表明，NAFLD 的發(fā)病機(jī)制認(rèn)為是多重打擊因素作用于遺傳易感者進(jìn)而誘發(fā)NAFLD，這些打擊因素包括胰島素抵抗、遺傳和表觀遺傳因素、炎癥因子及腸道微生態(tài)等[2]。乙醛脫氫酶2（ALDH2）是醛類(lèi)物質(zhì)代謝的關(guān)鍵作用酶，與酒精性肝病及腫瘤性疾病等密切相關(guān)[3]。研究發(fā)現(xiàn)，ALDH2 基因多態(tài)性與NAFLD 發(fā)病密切相關(guān)，但ALDH2 不同基因型人群的臨床特點(diǎn)未進(jìn)一步分析[4]。本研究擬通過(guò)對(duì)NAFLD和健康體檢人群ALDH2基因多態(tài)性的分析，觀察NAFLD ALDH2基因多態(tài)性的分布特點(diǎn)，并進(jìn)一步分析ALDH2 基因多態(tài)性與肝臟生化學(xué)及脂質(zhì)代謝之間的關(guān)系。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017 年1 月至2018 年1 月就診于上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院和云南省保山市龍陵縣人民醫(yī)院的NAFLD 患者（237 例）和健康體檢者（433例），其中男367例，女303例；平均年齡47.1 歲。

所有研究對(duì)象均行實(shí)時(shí)腹部超聲檢查診斷脂肪肝，采用美國(guó)Philips B型超聲影像儀。入組NAFLD 患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)按照中華醫(yī)學(xué)會(huì)2018 版非酒精性脂肪性肝病防治指南。超聲顯示：（1）肝區(qū)回聲彌漫性增強(qiáng)或肝實(shí)質(zhì)回聲＞腎回聲；（2）肝內(nèi)膽管回聲模糊不清；（3）肝臟可呈現(xiàn)輕至中度腫大，邊緣呈圓鈍；（4）肝臟超聲顯示肝內(nèi)血管走向較正常，而肝內(nèi)血流信號(hào)相對(duì)減弱；（5）肝右葉橫膈回聲不完整；具有以上1條即診斷為脂肪肝。

1.2 方法（1）一般資料收集和血生化檢測(cè)。收集研究對(duì)象的一般資料，包括性別、年齡、身高及體質(zhì)量等信息，并計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。所有研究對(duì)象空腹抽取靜脈血，使用日本Hitachi 公司7600 型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血生化指標(biāo)。（2）基因檢測(cè)及分組。抽取靜脈血3 ml，首先提取基因組DNA，經(jīng)過(guò)PCR 擴(kuò)增，使用美國(guó)ABI 測(cè)序儀測(cè)序。ALDH2 rs671 位點(diǎn)上游引物為5’-CAAATTACAGGGTCAACTGCTAT-3’，下游引物為5’-CAGCAGGTCCTGAACTTCCA-3’，由生工生物工程股份有限公司設(shè)計(jì)合成并完成單核苷酸多態(tài)性（SNP）測(cè)序和分型。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果分為兩組，基因?yàn)橐吧停ˋLDH2 *1/*1）定為GG 組，基因突變雜合子型（ALDH2*1/*2）與純合子型（ALDH2*2/*2）定為GA/AA 組。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 22.0 軟件分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用檢驗(yàn)；采用Pearson檢驗(yàn)進(jìn)行遺傳平衡檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ALDH2 基因檢測(cè)結(jié)果 GG 型共439 例（65.25%），其中男253 例，女186例；GA 和AA 組共同組成基因突變型GA/AA 型，共231 例（34.48%），其中男114 例，女117 例。見(jiàn)表1。

表1 ALDH2 基因表型分布 例（%）

2.2 一般資料比較 GG 型谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、總膽紅素（TBiL）及清蛋白（ALB）水平明顯高于GA+AA型（均P＜0.05），兩組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）及直接膽紅素（DBiL）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組一般資料比較

2.3 兩組代謝指標(biāo)比較 GG 型三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）及非高密度脂蛋白膽固醇（Non-HDL-C）水平明顯高于GA+AA型（均P＜0.05），兩組BMI、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、空腹血糖（FBG）及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組代謝指標(biāo)比較

3 討論

肝功能指標(biāo)中的ALT、AST及GGT作為肝細(xì)胞損傷的常用標(biāo)志，可以反應(yīng)肝病嚴(yán)重程度。NAFLD 的肝功能異常多以ALT 及GGT 升高為主。在本研究中，對(duì)GG 型和GA+AA 型肝功能指標(biāo)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)前者GGT、TBiL 及ALB水平明顯高于后者（均P＜0.05），這提示GG 型的患者可能具有更嚴(yán)重的肝臟脂肪變程度，ALDH2基因多態(tài)性可能還與膽紅素和白蛋白代謝具有一定的相關(guān)性，但仍需進(jìn)一步基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)行證實(shí)。

肝臟是維持人體脂質(zhì)平衡的重要器官，通過(guò)糖原和脂質(zhì)代謝來(lái)發(fā)揮作用。NAFLD 通常被認(rèn)為是代謝綜合征在肝臟的表現(xiàn)，具有脂代謝紊亂的特征。高脂血癥是NAFLD 發(fā)病的公認(rèn)的危險(xiǎn)因素之一[5]。高脂血癥能增加NAFLD 的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，并且NAFLD 患者血脂代謝異常往往提示了脂肪肝程度的加重及心腦血管事件的高發(fā)[6]。而另一方面，單純性脂肪肝又能促進(jìn)高TG 血癥及高TC血癥的發(fā)生[7]，兩者相互促進(jìn)，密切相關(guān)。嗜酒者多有血脂代謝紊亂，既往多項(xiàng)研究提示ALDH2 在一定程度上參與或影響了脂代謝過(guò)程：ALDH2 在白色脂肪組織中的表達(dá)與肥胖呈負(fù)相關(guān)[8]；在中國(guó)飲酒男性中，ALDH2 基因rs671 多態(tài)性與內(nèi)臟脂肪面積有關(guān)[9]；在日本飲酒男性中，ALDH2 基因rs671 多態(tài)性與高TG和低HDL-C 血癥具有相關(guān)性[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，基因型GG 型和GA+AA 型脂代謝指標(biāo)比較，前者TG、TC、LDL-C 及Non-HDL-C水平均明顯高于后者。Non-HDL-C 是指除HDL 以外其他脂蛋白中含有的膽固醇總和，目前已分別被國(guó)內(nèi)指南和國(guó)際指南推薦作為動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病一級(jí)預(yù)防和二級(jí)預(yù)防的次要目標(biāo)和首要目標(biāo)[11]。研究表明，Non-HDL-C 也與脂肪肝的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，可能比TC 或LDL-C 更能反應(yīng)患者膽固醇的代謝異常，更好地預(yù)測(cè)心腦血管事件的發(fā)生[12]。本研究結(jié)果中，不同基因型的血脂水平差異提示ALDH2 rs671多態(tài)性可影響脂質(zhì)代謝，尤其是GG型患者可能具有更為嚴(yán)重的肝臟脂肪變程度和更高的心腦血管事件發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，本研究通過(guò)分析NAFLD和對(duì)照組人群中ALDH2 rs671 基因多態(tài)性，揭示了ALDH2 多態(tài)性分布在人群中的特點(diǎn)。ALDH2 野生型（GG 型）與突變型（GA+AA 型）的肝臟功能有不同特點(diǎn)，野生型體內(nèi)脂質(zhì)代謝指標(biāo)更高，進(jìn)而可能會(huì)影響冠心病及動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。對(duì)于臨床醫(yī)生，需密切隨訪重視ALDH2不同基因型患者的臨床轉(zhuǎn)歸，及早干預(yù)患者的脂質(zhì)代謝指標(biāo)，防止疾病進(jìn)展。