兒童肺炎支原體肺炎外周血T淋巴細胞亞群與細胞因子以及免疫球蛋白的動態探析

沈陽，邊興艷，李季，張鶴

（大連市兒童醫院檢驗科，遼寧 大連 116000）

兒童肺炎支原體肺炎主要由支原體發生感染所導致的肺部疾病，該病發病速度緩慢，臨床癥狀主要表現為發熱，目前臨床上常使用免疫檢測對病情進行檢查[1]。但目前關于兒童肺炎支原體肺炎外周血T 淋巴細胞亞群、細胞因子以及免疫球蛋白的動態分析的研究較少。基于此，本研究旨在探討兒童肺炎支原體肺炎外周血T 淋巴細胞亞群、細胞因子以及免疫球蛋白的動態效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年12月至2020年5月本院收治的兒童支原體肺炎的患兒50例作為觀察組，按病情的發展進程分為急性期組和恢復期組，各25例；另選取同期健康兒童50名作為對照組。對照組男23名，女27名；年齡1～12歲，平均（6.04±2.47）歲。觀察組男24 例，女26 例，年齡2～11 歲，平均（5.81±3.10）歲；住院時間2～21 d，平均（11.20±2.13）d。兩組臨床資料比較差異無統計學意義，具有可比性。所有研究對象家屬均簽署知情同意書，本研究獲得醫院倫理委員會審核批準。

1.2 納入及排除標準 納入標準：具有發熱，咳嗽，呼吸困難等臨床癥狀[2]；符合支原體肺炎的臨床診斷標準；具有呼吸道感染癥狀；無用藥過敏史[3]。排除標準：具有先天性免疫障礙；治療時意識不清晰，具有精神性疾病；心、肺、腎等重大器質性疾病[4]。

1.3 方法 3 組均進行樣本采集，入院時抽取靜脈血5 ml，分為2 個試管分裝。1 支試管進行抗凝，用于T 淋巴細胞亞群的檢測[5]。另一試管不進行抗凝，離心處理后收集血清，-20 ℃冷凍保存。使用流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群，取2支試管加入3組的抗凝血[6]。分別加入抗體進行充分攪拌均勻，放置陰暗處0.5 h，2 支試管各加入溶血劑2 ml 充分攪拌，再放入暗處10 min。通過機器離心5 min，去除上清液，洗滌3次，之后使用臨床分析軟件進行數據分析。抽空腹靜脈血2 ml測定細胞因子，放置在抗凝血管內，離心10 min，吸取上清液，之后檢測細胞因子濃度[7]。抽取所有研究對象空腹靜脈血2 ml 檢測免疫球蛋白，進行抗凝處理，離心10 min 后，吸取上清液，采用免疫比濁的方法測定血清免疫球蛋白的濃度。

1.4 觀察指標 ①比較3 組T 淋巴細胞亞群占比，包括 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK 細胞以及 B細胞。②比較3 組血清細胞因子水平變化，包括γ-干擾素（IFN-γ）、白細胞介素-4（IL-4）、輔助性T細胞1/輔助性T細胞2（Th1/Th2）。③比較3組血清免疫球蛋白的動態變化，包括免疫球蛋白G（IgG），免疫球蛋白A（IgA），免疫球蛋白M（IgM）。

1.5 統計學方法 采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據處理，計量資料以“”表示，行F檢驗，計數資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3 組T 淋巴細胞亞群占比比較 檢測后，急性期組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于恢復期組和對照組（P＜0.05），NK 細胞比例高于恢復期組和對照組（P＜0.05），恢復期組CD8+與B 細胞的占比與對照組比較差異無統計學意義，見表1。

表1 3組T淋巴細胞亞群占比比較（，%）Table 1 Comparison of T lymphocyte subsets in three groups(,%)

表1 3組T淋巴細胞亞群占比比較（，%）Table 1 Comparison of T lymphocyte subsets in three groups(,%)

注：CD3+，成熟T淋巴細胞；CD4+，誘導性T細胞/輔助性T細胞；CD8+，抑制性T細胞/細胞毒性T細胞；NK細胞，自然殺傷細胞；B細胞，B淋巴細胞

組別急性期組恢復期組對照組F值P值B細胞11.24±2.11 12.01±2.00 11.29±2.35 0.613 0.235例數25 25 50 CD3+62.14±2.11 69.14±3.21 73.25±2.05 4.258 0.021 CD4+31.45±2.55 36.14±2.00 43.25±2.01 6.568 0.000 CD4+/CD8+1.12±0.25 1.36±1.00 1.96±1.47 5.264 0.018 NK細胞28.23±2.44 16.24±2.14 18.22±1.24 5.895 0.016 CD8+28.25±2.11 28.36±2.33 27.92±2.04 0.547 0.336

2.2 3 組血清細胞因子水平比較 檢測后，急性期組IFN-γ、IL-4、Th1/Th2 均高于恢復期組和對照組（P＜0.05），恢復期組IFN-γ、IL-4、Th1/Th2與對照組比較差異無統計學意義，見表2。

表2 3組血清細胞因子水平比較（）Table 2 Comparison of serum cytokine levels among the three groups()

表2 3組血清細胞因子水平比較（）Table 2 Comparison of serum cytokine levels among the three groups()

注：IL-4，白細胞介素-4；Th1/Th2，輔助性T細胞1/輔助性T細胞2；IFN-γ，γ-干擾素

組別急性期組恢復期組對照組F值P值IFN-γ（ng/L）39.12±3.24 20.35±2.14 21.44±2.15 6.145 0.000例數25 25 50 IL-4（ng/L）28.12±2.33 11.24±1.59 12.55±2.41 6.350 0.000 Th1/Th2（%）3.25±2.48 1.25±1.44 1.56±1.55 5.754 0.000

2.3 3 組血清免疫球蛋白的動態變化比較 檢測后，恢復期組血清IgG 水平高于急性期組和對照組（P＜0.05），急性期組血清IgG水平與對照組比較差異無統計學意義；對照組血清IgA 水平高于急性期組和恢復期組（P＜0.05），急性期組血清IgA水平與恢復期組比較差異無統計學意義；急性期組血清IgM水平高于對照組和恢復期組（P＜0.05），對照組血清IgM水平與恢復期組比較差異無統計學意義，見表3。

表3 3組血清免疫球蛋白的動態變化比較（，g/L）Table 3 Dynamic changes of serum immunoglobulin among three groups(,g/L)

表3 3組血清免疫球蛋白的動態變化比較（，g/L）Table 3 Dynamic changes of serum immunoglobulin among three groups(,g/L)

注：IgG，免疫球蛋白G；IgA，免疫球蛋白A；IgM，免疫球蛋白M

組別急性期組恢復期組對照組F值P值IgM 3.24±2.11 1.26±0.69 1.29±0.24 4.354 0.000例數25 25 50 IgG 9.24±2.15 12.36±2.11 9.25±2.01 5.234 0.000 IgA 1.25±0.24 1.31±0.26 3.21±1.25 4.668 0.000

3 討論

支原體肺炎的感染病毒支原體小于細菌，能進行自我繁殖[8]。目前，嬰幼兒發病率較高，除肺炎外，還會引起多種并發癥，對體內器官造成損害，危及患者的生命安全，當支原體入侵機體，會通過釋放毒素損害細胞，刺激B細胞產生自身抗體[9]，進一步導致患者的免疫功能發生紊亂。目前臨床多使用免疫功能動態變化進行檢測，有助于后期治療[10]。本研究結果表明，檢測后，急性期組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于恢復期組和對照組（P＜0.05），NK 細胞比例高于恢復期組和對照組（P＜0.05），與恢復期組CD8+與B 細胞占比與對照組比較差異無統計學意義，說明當患兒感染支原體肺炎時，體內細胞亞群的含量發生紊亂[11]。本研究結果表明，檢測后，急性期組IFN-γ、IL-4、Th1/Th2 含量均高于恢復期組和對照組（P＜0.05），恢復期組IFN-γ、IL-4、Th1/Th2含量與對照組比較差異無統計學意義。說明患兒感染支原體肺炎時，機體內的細胞因子含量發生改變，對患兒機體造成一定影響。T 淋巴細胞在胸腺中發育成熟，參與機體免疫反應，在免疫功能中起調節作用。機體在感染病原體后體內的細胞因子會被激活，同時，清除病原體。免疫球蛋白主要由B細胞產生，具有特異性，能調節體內的免疫紊亂現象，對臨床治療起促進作用[12]。本研究結果表明，檢測后，恢復期組血清IgG水平高于急性期組和對照組（P＜0.05)，急性期組血清IgG水平與對照組比較差異無統計學意義；對照組血清IgA水平高于急性期組和恢復期組（P＜0.05），急性期組血清IgA水平與恢復期組比較差異無統計學意義；急性期組血清IgM水平高于對照組和恢復期組（P＜0.05），對照組血清IgM水平與恢復期組比較差異無統計學意義。說明當患兒感染支原體肺炎時，機體內免疫功能發生紊亂，隨病情的發展，免疫狀態發生變化。

綜上所述，患兒感染支原體肺炎時，機體內免疫功能發生紊亂，隨病情的發展，免疫狀態發生變化，臨床上對幼兒采取免疫監測，可為疾病的診斷以及后期治療提供依據。