腫瘤標(biāo)志物TAP、CEA、CA19-9檢測在食管癌診斷中的應(yīng)用價值

張 喆，汪 闊

空軍軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院唐都醫(yī)院檢驗科，陜西西安 710038

食管癌是臨床常見的消化道惡性腫瘤之一，病死率極高，位居第4，發(fā)病年齡多大于40歲，男性多于女性，且近年來發(fā)病率呈上升趨勢，對人類健康構(gòu)成了嚴重的威脅[1-2]。臨床上，食管癌患者多采用食管鏡、內(nèi)窺鏡、組織病理學(xué)檢查等發(fā)現(xiàn)，但有操作復(fù)雜、檢測時間長、靈敏度低等缺點，給臨床診療工作和患者造成諸多不便[3]。血清腫瘤標(biāo)志物具有簡便、經(jīng)濟、易行、創(chuàng)傷小等特點，成為輔助診斷腫瘤的主要手段[4-5]。因此，尋找靈敏度高、特異性好的腫瘤標(biāo)志物成為近年來食管癌研究的熱點。本文主要探討異常糖鏈糖蛋白(TAP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原19-9(CA19-9)3種腫瘤標(biāo)志物在食管癌診斷中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年8月至2021年4月在本院就診的食管癌患者60例作為食管癌組，均經(jīng)CT檢查或穿刺活檢、組織病理學(xué)檢查確診為食管癌，其中男50例，女10例，年齡(63.75±6.55)歲。排除標(biāo)準：(1)哺乳期或妊娠期女性；(2)合并肝、腎、顱腦、心臟等器官病變者；(3)合并食管病變以外的其他臟器炎癥、自身免疫性疾病、傳染性疾病患者；(4)應(yīng)用生物素制劑治療者。另選取同期在本院臨床診斷為食管良性腫瘤患者60例作為食管良性腫瘤組，其中男47例，女13例，年齡(62.12±8.43)歲；體檢健康者60例作為健康對照組，其中男30例，女30例，年齡(57.46±5.43)歲。食管良性腫瘤組及健康對照組均經(jīng)體檢、影像學(xué)檢查、胸部X光透視排除其他惡性腫瘤。本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)規(guī)定。3組年齡、性別等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2儀器與試劑 TAP檢測使用浙江瑞生TAP集成閱片儀、腫瘤異常蛋白檢測系統(tǒng)圖像分析儀或生物顯微鏡，試劑為異常糖鏈糖蛋白檢測試劑盒(凝集法)，由凝聚素分散藍CR-E、蒸餾水、氫氧化鈉組成，購自浙江瑞生醫(yī)療科技有限公司；血清CEA、CA19-9檢測使用德國羅氏Cobas e 602型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，檢測試劑為腫瘤抗原定量測定試劑盒，主要組成成分包括M(包被鏈霉親和素的磁珠微粒)、R1(生物素化的抗癌胚抗原抗體)、R2(釕標(biāo)記的抗癌胚抗原抗體)，腫瘤抗原定量測定試劑盒、校準品、質(zhì)控品均購自羅氏診斷產(chǎn)品(上海)有限公司。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 采用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管及含有分離膠的促凝管采集3組研究對象清晨空腹靜脈血，各1管。EDTA-K2抗凝管采血2 mL，用于TAP檢測，促凝管采血3～4 mL，3 000 r/min離心10 min后分離血清，用于腫瘤標(biāo)志物CEA、CA19-9檢測。所有標(biāo)本無溶血、脂血、凝血、黃疸現(xiàn)象，2 h內(nèi)完成檢測。

1.3.2檢測方法 TAP檢測方法為凝集法。取靜脈抗凝全血25 μL，在載玻片上推制薄厚均勻的血片，共2張，靜置待干。血片干燥后，在2張血涂片分別均勻垂直滴下?lián)u勻后的TAP檢測試劑3滴(每滴約50 μL)，形成3個圓形斑點，平放靜置1.5～2.0 h。質(zhì)控品選取前1天任意2例患者標(biāo)本，偏倚控制在10%以內(nèi)。TAP的凝聚物面積≥125 μm2為陽性，晶體顆粒呈深褐色淺黃色或淺綠色，為邊緣不整的圓形、卵圓形或多邊形，中間有屈光性，四周較深呈棕黑色或墨綠色；凝聚物面積≥225 μm2為強陽性，凝聚物面積較大；凝聚物面積<125 μm2為陰性，無上述顆粒檢出。血清CEA、CA19-9檢測方法為電化學(xué)發(fā)光法，每天應(yīng)進行質(zhì)控或每次定標(biāo)后進行質(zhì)控，檢測高、中、低3個檢測值，各值應(yīng)在正常參考范圍內(nèi)。血清CEA正常參考范圍為0～5 ng/mL，血清CA19-9正常參考范圍為0～27 U/mL，高于正常參考范圍為陽性。

2 結(jié) 果

2.13組TAP的凝聚物面積及CEA、CA19-9水平比較 食管癌組TAP的凝聚物面積及CEA、CA19-9水平高于食管良性腫瘤組和健康對照組，食管良性腫瘤組TAP的凝聚物面積及CEA、CA19-9水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組TAP的凝聚物面積及CEA、CA19-9水平比較[M(P25，P75)]

2.23組TAP、CEA、CA19-9單獨及聯(lián)合檢測的陽性率比較 食管癌組TAP、CEA、CA19-9單獨及3項聯(lián)合檢測的陽性率高于食管良性腫瘤組和健康對照組，食管良性腫瘤組高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 3組TAP、CEA、CA19-9單獨及聯(lián)合檢測的陽性率比較(%)

2.33項指標(biāo)單獨及聯(lián)合檢測食管癌的靈敏度、特異度 TAP、CEA、CA19-9 3項聯(lián)合檢測食管癌的靈敏度為85.00%，特異度為75.00%，約登指數(shù)高于單項指標(biāo)檢測，見表3。

表3 3項指標(biāo)單獨及聯(lián)合檢測食管癌的靈敏度、特異度、約登指數(shù)(%)

3 討 論

2015年國家癌癥中心統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，我國食管癌的發(fā)病人數(shù)約為477 900例，發(fā)病人數(shù)占全部惡性腫瘤的11.1%，死亡人數(shù)估計為375 000例，死亡人數(shù)占全部惡性腫瘤的13.3%[6]。據(jù)調(diào)查研究顯示，食管癌的高發(fā)與多種因素有關(guān)，如飲食習(xí)慣、腫瘤家族史、經(jīng)濟狀況、生活節(jié)奏的加快和環(huán)境的惡化[7-8]。

TAP又稱腫瘤異常蛋白，是腫瘤細胞在新陳代謝過程中釋放的糖蛋白和鈣-組蛋白復(fù)合物[9]。本研究結(jié)果顯示，食管癌組TAP的陽性率高于對照組，與文獻報道一致[10]，提示TAP是檢測食管癌的一個較好的指標(biāo)。TAP是細胞中的癌基因、抑癌基因等發(fā)生基因突變后所表達的產(chǎn)物，在食管癌發(fā)生、發(fā)展的過程中分泌增多，到達一定水平后，向血液中排放，并較多地存在于外周血[11]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TAP檢測食管癌的靈敏度為75.00%，特異度為76.67%，TAP單項檢測的靈敏度高于血清CEA、CA19-9單項檢測。CEA是一種復(fù)雜的可溶性糖蛋白，主要存在于成人腫瘤細胞及胎兒的胃腸道中。在成人消化道腫瘤中，腫瘤細胞會重新表達CEA，并釋放入血[12]。有研究顯示，CEA是提示食管癌疾病的最早指標(biāo)，與食管癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[13]。本研究結(jié)果顯示，CEA單獨檢測食管癌的診斷特異度(83.33%)較好，但陽性率(45.00%)較低，漏診率較高。所以CEA單項檢測臨床意義不大，通常采用多項指標(biāo)聯(lián)合檢測。CA19-9是一種黏蛋白型的糖類腫瘤相關(guān)抗原。據(jù)文獻報道，CA19-9可作為食管癌發(fā)生的首選標(biāo)志物，在食管癌中的陽性率為20%～50%，特異度為70%～90%[14]。本研究結(jié)果顯示，CA19-9的陽性率為51.67%，特異度為80.00%，與文獻[14]研究結(jié)果一致。

本研究結(jié)果顯示，TAP、CEA、CA19-9聯(lián)合檢測的靈敏度高于任一單項檢測，提示單項檢測腫瘤標(biāo)志物對食管癌的診斷具有一定的局限性，所以臨床上應(yīng)建立有效的多參數(shù)、多指標(biāo)聯(lián)合檢測以提高對食管癌的靈敏度。有文獻報道，CEA、CA19-9聯(lián)合檢測食管癌的靈敏度為53.33%，CA19-9、CEA、糖類抗原125(CA125)聯(lián)合檢測靈敏度為41.20%[15-16]。本研究發(fā)現(xiàn)，TAP、CEA、CA19-9聯(lián)合檢測的靈敏度達到了85.00%。這是由于TAP運用多級偶聯(lián)技術(shù)，用數(shù)十種凝集素，一次性組合檢測20多種異常糖鏈結(jié)構(gòu)[17-18]，提高了檢測的靈敏度和準確性，所以TAP在食管癌的篩查和檢測中起到了很好的輔助作用，在食管癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后等方面有一定的臨床應(yīng)用價值。

綜上所述，腫瘤標(biāo)志物TAP、CEA、CA19-9聯(lián)合檢測對食管癌的診斷具有重要的價值，而對于其他消化道腫瘤的診斷有待進一步研究。