熊果苷的藥理作用及機(jī)制研究進(jìn)展

劉曉婷，王鑫璇

(天津商業(yè)大學(xué) 生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津，300134)

熊果苷(arbutin, Arb)，又名熊果素[1]，學(xué)名對苯二酚葡萄糖苷[2]。是一種源于綠色植物天然存在的糖苷類物質(zhì)，是許多耐凍干植物，如小麥、梨[3]、杜鵑花科的熊果[4-5]中含量豐富的溶質(zhì)[6]。呈白色針狀結(jié)晶或粉末，易溶于熱水、乙醇，略溶于冷水。目前已知的熊果苷有α-熊果苷、β-熊果苷和脫氧熊果苷。α-熊果苷來源途徑較窄，很少能從植物中提取得到，一般只能通過不同微生物的酶進(jìn)行轉(zhuǎn)移反應(yīng)，目前的合成方法主要有酶合成法和生物轉(zhuǎn)化法。β-熊果苷可以通過植物提取、植物細(xì)胞培養(yǎng)、酶轉(zhuǎn)化和化學(xué)合成4種方法得到，但由于產(chǎn)率、成本、技術(shù)水平等因素的制約，目前工業(yè)化生產(chǎn)β-熊果苷多采用化學(xué)合成法，適合大規(guī)模的工業(yè)化發(fā)展。脫氧熊果苷，其來源主要是有機(jī)合成，包括對苯二酚直接醚化、以2 - [(4 -芐氧基) 苯氧基]四氫吡喃為原料合成2種方法[7]。3種熊果苷的結(jié)構(gòu)式見圖1。

圖1 三種熊果苷的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formulae of the three arbutin

作為21世紀(jì)理想的皮膚美白及祛斑活性劑，熊果苷是一種集“綠色植物，安全可靠”于一身的皮膚高效色素脫失組分。熊果苷在保護(hù)肌膚不受自由基侵害的同時，具有良好的親水性，所以經(jīng)常作為美白劑在市場中銷售，在亞洲各國受到極大的歡迎。

隨著近年來研究的深入和研究范圍的進(jìn)一步擴(kuò)大，熊果苷的更多作用突顯出來，如抗氧化、抗炎[8]、抑菌[3]、鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘、抗癌[9]、抗腫瘤[10]、治療急性肺損傷等。因此，化妝品市場和醫(yī)藥市場對熊果苷的需求量正在逐年增加。鑒于熊果苷的研究工作對今后醫(yī)療的研究意義以及在日常生活中的現(xiàn)實應(yīng)用意義，本文對熊果苷的藥理活性作用及其機(jī)制做一綜述。

1 抑制黑色素

酪氨酸是黑色素形成的原料，作為主要限速酶，酪氨酸酶的活性決定了黑色素的形成量。酪氨酸酶具有酪氨酸羥化酶活性(催化酪氨酸→多巴)和多巴氧化酶活性(催化多巴→多巴醌)，是黑素細(xì)胞合成黑色素的關(guān)鍵因素。

而熊果苷作為一種酪氨酸酶活性競爭抑制劑具有可逆性。它能迅速滲入肌膚，在黑色素細(xì)胞沒有毒性的濃度范圍內(nèi)且不影響細(xì)胞增殖濃度的情況下，有效地抑制酪氨酸酶活性，通過自身與酪氨酸酶的直接結(jié)合，競爭多巴的結(jié)合位點，阻斷多巴及多巴醌的合成，進(jìn)而干擾黑色素細(xì)胞，抑制黑色素的生成(圖2)。同時它還具有淡化已形成的黑色素，加速黑色素的分解與排泄，減少皮膚色素沉積[11]，祛除色斑和雀斑[12]的功能。

圖2 人體皮膚黑色素形成機(jī)制及熊果苷作用示意圖Fig.2 Mechanism of melanin formation in human skin and effect of arbutin

陸彬等[13]以斑馬魚胚胎為模型，通過定性觀察發(fā)現(xiàn)，隨著熊果苷濃度的增加，其對黑色素生成的抑制作用明顯增強(qiáng)。而通過基因表達(dá)分析表明，熊果苷還可以通過抑制眼皮膚白化病II型，酪氨酸酶和銀色毛發(fā)等黑色素合成的相關(guān)基因，抑制黑色素的合成。

熊果苷作為美白劑在化妝品中廣泛應(yīng)用，臨床也用于黃褐斑及黑色素瘤的治療[3]。何盾等[14]通過復(fù)制黃褐斑鼠模型，予熊果苷干預(yù)，觀察其療效并探討可能機(jī)制。經(jīng)實驗證明其具有效的增白作用，可能通過提高局部皮膚組織中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性，明顯降低酪氨酸、丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量，從而抑制黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞的酪氨酸酶活性，促使皮膚細(xì)胞的氧化還原反應(yīng)，減少自由基產(chǎn)生，抑制黑色素的形成，進(jìn)而有效治療黃褐斑[14]。

作為黑色素抑制劑，熊果苷與其他同、異類物質(zhì)相比，在化妝品、醫(yī)療、商業(yè)等領(lǐng)域，體現(xiàn)出其應(yīng)用范圍廣、作用效果明顯、使用過程安全無毒的優(yōu)勢。

2 鎮(zhèn)痛抗炎抑菌

熊果苷可用于抗炎、抗?jié)儭Ｔ谒幚砩夏芤种埔葝u素的降解，口服后在體內(nèi)水解產(chǎn)生氫醌而具有殺菌作用[15]。在傳統(tǒng)醫(yī)療過程中，熊果苷作為熊果葉的主要藥效成分[16]，憑借著殺菌、消炎能力強(qiáng)的特點，主要用于治療尿路感染[17]及腸道消炎。研究表明，熊果苷能顯著降低促炎性細(xì)胞因子，及其他炎癥相關(guān)的基因，可用于治療響應(yīng)于脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞活化的炎癥和有害的影響[15]，可以快速止痛、迅速消除紅腫、愈合快、不留疤痕、無毒副作用。

YE等[18]研究了熊果苷對LPS誘導(dǎo)的肺損傷的影響。研究通過建立LPS靜脈注射大鼠肺損傷模型發(fā)現(xiàn)，在LPS刺激后，血清和肺組織中的炎性細(xì)胞因子水平顯著升高，而熊果苷預(yù)處理降低了LPS誘導(dǎo)的MDA水平，增加了LPS誘導(dǎo)的SOD活性。研究表明，熊果苷可能是急性肺損傷的一種新的治療方法。

炎癥反應(yīng)過程中，細(xì)胞膜磷脂在磷脂酶A2的作用下釋放出花生四烯酸。花生四烯酸經(jīng)環(huán)氧化酶作用生成前列腺素和血栓素；經(jīng)脂氧化酶作用產(chǎn)生白三烯、脂氧素和羥基環(huán)氧素。為了研究熊果苷的抗炎作用及其作用機(jī)理，王佩等[19]經(jīng)試驗觀察到，熊果苷可減少炎癥組織前列腺素其納克級水平局部組織前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)水平，抑制大鼠腹腔巨噬細(xì)胞釋放白三烯B4 (leukotriene B4, LTB4)。試驗表明，熊果苷的抗炎效果可能與抑制炎癥介質(zhì)PGE2及LTB4的釋放有關(guān)(圖3)。

在此基礎(chǔ)上，KAJIWARA等[20]研究了熊果苷的聚合物，證明了由于聚合物酚基團(tuán)的鄰近效應(yīng)以及聚合物在培養(yǎng)板表面的濃度效應(yīng)，聚合物熊果苷比單分子熊果苷具有更高的抗菌活性。

JANA等[22]進(jìn)行了熊果苷與卡維地洛聯(lián)合用藥對嗜中性粒細(xì)胞作用的研究。研究表明，熊果苷與卡維地洛合用，可通過減少磷脂酶D、髓過氧化物酶、彈性酶活性、超氧化物和隨后衍生的活性氧(reactive oxygen species, ROS)的生成，達(dá)到減少組織損傷的目的。試驗表明，熊果苷能夠抑制炎癥的發(fā)生和發(fā)展，同時證實熊果苷和卡維地洛的聯(lián)合作用比單獨使用更有效。

圖3 膜磷脂生成的物質(zhì)及熊果苷作用示意圖Fig.3 Schematic diagram of substances produced by membrane phospholipids and effects of arbutin

3 鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘

咳、痰、喘是呼吸系統(tǒng)疾病常見的三大癥狀。慢性反復(fù)發(fā)作性咳嗽、咳痰或伴有喘息是氣管、支氣管黏膜及其周圍組織慢性非特異性炎癥的主要臨床表現(xiàn)。有研究表明，熊果苷灌胃可增加動物氣管分泌、延長氨水引咳潛伏期[15, 23-24]、減少咳嗽次數(shù)、明顯增多氣管酚紅排泌量[16]。

王亞芳等[25]采用引咳、祛痰、平喘動物實驗?zāi)Ｐ瓦M(jìn)行了藥效學(xué)實驗研究。小鼠氨水引咳時，50～200 mg/kg的熊果苷有較強(qiáng)的鎮(zhèn)咳作用，在相同劑量下50 mg/kg 的熊果苷與咳必清作用相當(dāng)；200 mg/kg的熊果苷對磷酸組織胺致豚鼠哮喘具有一定防治作用，可明顯延長豚鼠哮喘潛伏期；50～200 mg/kg的熊果苷可增加小鼠氣管中酚紅的排泌，尤以200 mg/kg祛痰作用最強(qiáng)；熊果苷能顯著地對抗磷酸組織胺引起的豚鼠離體氣管條收縮，20 mg/kg 的熊果苷與25 μg/mL 的異丙嗪作用相當(dāng)。上述藥效學(xué)實驗結(jié)果顯示，熊果苷具有一定的鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用[25]。

4 抗癌

手術(shù)或者外部放射治療一直是部分癌癥治療的主要手段，但其副作用較大。所以，中藥提取物治療腫瘤成為當(dāng)下研究的熱點。臨床已證實熊果苷在人體內(nèi)沒有明顯的毒副作用，而且HAJAR等[26]展示了熊果苷作為抗氧化劑對前列腺癌細(xì)胞的影響，發(fā)現(xiàn)熊果苷可顯著誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，為輔助治療前列腺癌開辟了新的前景。同時，也說明熊果苷具有抗腫瘤的潛在作用，可有效抑制部分癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移行為。

4.1 誘導(dǎo)線粒體斷裂

JIANG等[27]研究制備了乙酰化熊果苷。結(jié)果發(fā)現(xiàn)熊果苷和乙酰化熊果苷在B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞中均能顯著降低細(xì)胞活力，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致G1細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)線粒體斷裂。熊果苷和乙酰化熊果苷通過線粒體途徑對B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞發(fā)揮促凋亡作用。研究結(jié)果支持乙酰化熊果苷作為皮膚美白和黑色素瘤治療的一種新的潛在候選制劑。

4.2 干擾轉(zhuǎn)錄過程和阻止RNA合成

熊果苷可以作為天然分子結(jié)合受體與miRNA結(jié)合并參與其表達(dá)調(diào)控過程，影響細(xì)胞自身的增殖和凋亡行為。郭錦輝等[28]探討了熊果苷對膀胱癌EJ-1細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制研究。觀察不同質(zhì)量濃度及不同作用時間熊果苷對膀胱癌EJ-1細(xì)胞增殖能力的影響。研究發(fā)現(xiàn)，100 μg/mL熊果苷對膀胱癌EJ-1細(xì)胞增殖的抑制作用最佳，可干擾膀胱癌EJ-1細(xì)胞的周期進(jìn)展，且呈時間依賴性，可將細(xì)胞阻滯于G2/M期，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

為了進(jìn)一步研究其機(jī)制，郭錦輝等[28]觀察了熊果苷對膀胱癌EJ-1細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)、磷酸化ERK (p-ERK)、G1/S-特異性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、p21蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，作用24、48、72、96 h后，p-ERK蛋白表達(dá)水平均降低，呈逐漸下降后升高的趨勢；ERK蛋白表達(dá)水平均降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義；Cyclin D1蛋白表達(dá)水平均升高，呈逐漸升高后下降的趨勢；p21蛋白表達(dá)水平隨時間延長逐漸升高，于96 h差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果表明，熊果苷處理膀胱癌EJ-1細(xì)胞后可抑制ERK蛋白的磷酸化進(jìn)程，由于ERK通路是主要的促有絲分裂信號，因此，熊果苷對ERK信號通路途徑的滅活似乎對其抗增殖作用有直接的干擾，其具體作用環(huán)節(jié)還需進(jìn)一步研究；同時，熊果苷可通過上調(diào)p21基因抑制人膀胱癌EJ-1細(xì)胞的增殖[15]，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞周期相關(guān)蛋白ERK和p21蛋白的表達(dá)有關(guān)[28]。

4.3 干擾蛋白質(zhì)合成與功能

骨肉瘤(osteosarcoma, OS)也叫成骨肉瘤，是一種惡性腫瘤，它起源于長骨的遠(yuǎn)端，在20歲以下的青少年或兒童中最為常見[29]。目前的主要治療方法是手術(shù)切除和全身多藥化療，雖然系統(tǒng)治療在操作方面取得了巨大進(jìn)展，但是由于其急速和早期轉(zhuǎn)移的特性，OS患者的長期整體存活率仍然不高。

WANG等[29]調(diào)查了熊果苷是否影響OS細(xì)胞系的細(xì)胞增殖。測定所示，熊果苷以劑量和時間依賴的方式降低了OS細(xì)胞的生存能力。熊果苷降低了MTHFD1L蛋白質(zhì)的水平，MTHFD1L是 OS 細(xì)胞中miR-338-3p的直接靶向基因，miR-338-3p直接瞄準(zhǔn)并調(diào)控MTHFD1L的表達(dá)，即熊果苷可通過MTHFD1L對miR-338-3p的敲擊抑制OS細(xì)胞的入侵、遷移和增殖。AKT/mTOR 信號的異常活動在實體腫瘤中頻繁出現(xiàn)，它的激活顯著促進(jìn)了各種癌癥的發(fā)展，包括OS。熊果苷調(diào)解 OS 細(xì)胞中miR-338-3p/MTHFD1L軸調(diào)控作用的同時，抑制了OS中的AKT/mTOR信號。

在本次研究中證實，熊果苷通過調(diào)節(jié)miR-338-3p/MTHFD1L對OS的抗增殖和抗創(chuàng)特性影響，從而滅活了AKT/mTOR通路，停用了AKT/mTOR信號，阻礙了OS的發(fā)展。

蛋白激酶2(HIPK2)，參與調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的分化、增殖和凋亡。在癌癥中，HIPK2通常被認(rèn)為是潛在的腫瘤抑制因子。李佳等[30]的研究中，熊果苷呈濃度依賴性地上調(diào)胰腺癌細(xì)胞HIPK2的表達(dá)，且結(jié)果顯示，減少HIPK2能夠逆轉(zhuǎn)熊果苷對胰腺癌細(xì)胞生長抑制作用。HIPK2可能與心肌肌球蛋白結(jié)合蛋白C(cMyc)相互作用并使其磷酸化，從而導(dǎo)致其不穩(wěn)定。HIPK2通過調(diào)節(jié)cMyc的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)有氧糖酵解及相關(guān)蛋白乳酸脫氫酶A、己糖激酶2(HK-2)和葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)的表達(dá)，從而影響胰腺癌細(xì)胞的增殖、凋亡，選擇性地抑制胰腺癌細(xì)胞生長。

5 影響細(xì)胞功能

5.1 放射防護(hù)

游離輻射自由基與DNA的相互作用可引起DNA損傷，導(dǎo)致誘變和核囊形成。NADI等[31]研究了熊果苷的抗分裂活性，計算多染紅細(xì)胞與多染紅細(xì)胞加常染紅細(xì)胞的比例[PCE/(PCE+NCE)]，以顯示熊果苷的細(xì)胞增殖活性，進(jìn)而研究熊果苷對大鼠骨的保護(hù)作用。在放射前2 h和4 h，分別給予樣品不同劑量的熊果苷。計算每個樣品的微核頻率和PCE/(PCE+NCE)，檢驗對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果表明，與未給予藥物治療的樣品相比，熊果苷顯著降低了小鼠骨髓中微核多色紅細(xì)胞的頻率，增加了PCE/(PCE+NCE)。不同劑量的熊果苷對骨髓細(xì)胞均無毒，對大鼠骨具有明顯的保護(hù)作用，可抵抗射線照射引起的細(xì)胞殺傷作用。

之后，NADI等[32]通過測定血清堿性磷酸酶(alkaline phosphatse,ALP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性水平，在發(fā)現(xiàn)熊果苷有效降低大劑量X射線照射對小鼠全身組織影響的同時，證實50 mg/kg的熊果苷具有較高的放射防護(hù)效果。

5.2 冷凍保護(hù)

異體軟骨用于修復(fù)受損的關(guān)節(jié)軟骨，但其需要活的軟骨細(xì)胞。鑒于沒有一種保存方法能夠有效地滿足這一目的，所以ROSA等[33]希望研究出更有效的低溫保護(hù)劑(cryoprotectant, CPA)。他們研究了熊果苷單獨或與其他低濃度CPA聯(lián)合使用，對人關(guān)節(jié)軟骨低溫保護(hù)作用的效果。

研究通過人體脛骨平臺，研究熊果苷單獨或結(jié)合各種濃度二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)和甘油的治療效果。在凍融前后，評估軟骨細(xì)胞活力，以評估細(xì)胞膜完整性。研究發(fā)現(xiàn)，在熊果苷中加入DMSO和甘油后，不再增加軟骨細(xì)胞的生存能力，說明熊果苷是潛在的可替代DMSO和甘油在骨軟骨移植中的冷凍保護(hù)劑[33]，并且熊果苷是一種較DMSO和甘油更有效的骨軟骨移植冷凍保護(hù)劑。作為冷凍保護(hù)劑，熊果苷還可應(yīng)用于山羊精子的冷凍保護(hù)中[15, 34]。

5.3 增殖分化

MAN等[35]研究探討了熊果苷對小鼠成骨前體細(xì)胞(MC3T3 E1)體外增殖和分化的作用及其機(jī)制。試驗通過ALP染色，檢測I型膠原蛋白(COL1A1)、骨含伽馬羧酸蛋白(BGLAP)和Sp7轉(zhuǎn)錄因子(Sp7 mRNA)的表達(dá)水平，研究熊果苷對成骨分化的影響。通過逆轉(zhuǎn)錄、定量聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白質(zhì)印跡法分析了相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)和連環(huán)蛋白(catenin, cats)的mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示：熊果苷處理能顯著促進(jìn)MC3T3 E1細(xì)胞增殖，增加S期細(xì)胞比例；提高M(jìn)C3T3 E1細(xì)胞ALP活性和COL1A1、BGLAP、SP7 mRNA表達(dá)水平；顯著升高RUNX2、cats的mRNA和蛋白表達(dá)水平。研究結(jié)果表明熊果苷能夠促進(jìn)MC3T3 E1細(xì)胞的增殖和分化。

5.4 誘導(dǎo)凋亡自噬

LYU等[36]研究了熊果苷在高糖誘導(dǎo)的人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞(human kidnBJ proximal tubular epithelial cells,HK-2細(xì)胞)凋亡和自噬中的作用。采用葡萄糖和熊果苷處理HK-2細(xì)胞后，檢測細(xì)胞存活率及葡萄糖和熊果苷處理后HK-2細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白水平。研究了microRNA (miR-27a)在高糖和熊果苷共同處理的HK-2細(xì)胞中的表達(dá)。轉(zhuǎn)染miR-27a 抑制劑后，研究miR-27a對熊果苷影響細(xì)胞凋亡和自噬的影響，并檢測c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)和哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)通路。

研究結(jié)果表明，熊果苷可減輕高糖誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞的凋亡、自噬及調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白水平。在高糖和熊果苷共同處理的HK-2細(xì)胞中，隨著熊果苷濃度的增加，MiR-27a表達(dá)加速，抑制miR-27a可以明顯消除熊果苷在高糖誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞凋亡和自噬中的作用，并且熊果苷可以通過調(diào)控miR-27a阻斷JNK和mTOR通路。以上研究顯示，熊果苷通過調(diào)節(jié)miR-27a/JNK/mTOR軸，減輕了高糖誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞的凋亡和自噬，為熊果苷在糖尿病腎病中的應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。

5.5 增加細(xì)胞生存能力

SUBRAMANIAN等[37]研究了熊果苷對鹽酸異丙腎上腺素(isoprenaline, ISO)誘導(dǎo)的H9c2心原細(xì)胞毒性心臟保護(hù)作用的可能機(jī)制。研究結(jié)果表明，預(yù)給熊果苷能顯著改善異氧誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞線粒體膜電位的變化，明顯抑制異氧誘導(dǎo)的細(xì)胞形態(tài)毒性作用，恢復(fù)線粒體功能，并呈劑量依賴性地增加活細(xì)胞數(shù)量，保護(hù)細(xì)胞免受異氧誘導(dǎo)的損傷。

ZHAO等[38]研究發(fā)現(xiàn)在熊果苷和H2O2處理的細(xì)胞中，熊果苷可調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的microRNA-29a (miR-29a)表達(dá)增加，阻斷MEK/ERK和p38MAPK信號通路，通過促進(jìn)細(xì)胞活力、減少細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長相關(guān)因子蛋白水平，顯著減輕H2O2誘導(dǎo)的視神經(jīng)氧化損傷。

抗氧化劑能有效地對抗氧化應(yīng)激造成的損害。董欽等[39]采用體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行研究，結(jié)果表明，當(dāng)細(xì)胞被H2O2損傷時，熊果苷可以增加細(xì)胞生存能力，改善細(xì)胞能量代謝，使細(xì)胞免受ROS損害。報告證實，熊果苷可以抵御H2O2所致的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。

6 抗氧化

ZHOU等[40]研究了熊果苷對秀麗隱桿線蟲的影響，結(jié)果表明，優(yōu)選的最佳濃度熊果苷可以延長壽命，增強(qiáng)抗氧化能力。這些作用的潛在分子機(jī)制包括ROS水平降低、daf-16的核定位改善以及daf-16及其下游靶點表達(dá)上調(diào)。結(jié)果表明，熊果苷可以作為維持整體健康的抗氧化劑。

熊果苷作為抗氧化劑，可以降低氧化水平參數(shù)，包括脂質(zhì)過氧化標(biāo)記物、亞硝酸鹽、蛋白羰基和鐵還原抗氧化能力水平；提高SOD與谷胱甘肽過氧化物酶活力，減少氧化應(yīng)激和亞硝化應(yīng)激，同時降低MDA的含量；使ROS水平降低，增強(qiáng)抗氧化狀態(tài)。熊果苷的抗氧化作用可以應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)等，維護(hù)身體整體健康。

6.1 神經(jīng)系統(tǒng)

張永剛等[41]制成腦缺血再灌注損傷模型，檢測腦組織中SOD活性、MDA含量及谷胱甘肽過氧化物酶活性的變化。研究發(fā)現(xiàn)，熊果苷能顯著提高小鼠腦組織內(nèi)SOD與谷胱甘肽過氧化物酶活力，同時降低MDA的含量，降低組織內(nèi)脂質(zhì)過氧化水平。進(jìn)而說明，熊果苷能通過提高腦組織中內(nèi)源性的抗氧化體系來提高自身的抗氧化能力，對小鼠缺血再灌注腦損傷起到一定的保護(hù)作用[15]。

DASTAN等[42]根據(jù)天然產(chǎn)品對治療阿爾茨海默病有益的理論，研究了熊果苷對鏈脲佐菌素(streptozocin, STZ)誘導(dǎo)的大鼠神經(jīng)毒性的保護(hù)作用。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過腦室內(nèi)注射STZ可導(dǎo)致海馬組織的空間記憶損傷和氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平的升高；相反，STZ注射前給予熊果苷預(yù)處理可以改善空間記憶，減少氧化應(yīng)激和亞硝化應(yīng)激，血清和海馬組織中的MDA和亞硝酸鹽含量顯著下降。此外，在接受熊果苷的動物中，觀察到海馬組織的鐵還原抗氧化能力水平增加，但熊果苷在動物體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量沒有降低。研究結(jié)果表明，熊果苷對腦內(nèi)STZ誘導(dǎo)的記憶損傷和海馬組織氧化損傷具有一定的保護(hù)作用，熊果苷的神經(jīng)保護(hù)作用可能是通過其抗氧化和清除自由基的作用介導(dǎo)的。

DADGAR等[43]，根據(jù)熊果苷抗氧化和清除自由基的作用，研究了熊果苷對1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(pyridine,1,2,3,6-tetrahydro-1-methyl-4-phenylpyridine, MPTP)誘發(fā)帕金森病(parkinson′s disease, PD)動物模型的行為障礙、氧化應(yīng)激和亞硝化應(yīng)激的影響。結(jié)果顯示，熊果苷處理降低了PD小鼠氧化水平的參數(shù)，包括脂質(zhì)過氧化標(biāo)記物、亞硝酸鹽、蛋白羰基和鐵還原抗氧化能力水平。實驗表明，熊果苷治療改善了MPTP誘導(dǎo)的PD模型的運動功能，其可以減輕帕金森病動物模型的行為損傷和氧化應(yīng)激。

6.2 心血管系統(tǒng)

NALBAN等[44]研究了熊果苷對ISO誘導(dǎo)的小鼠心肌肥厚的影響。實驗將小鼠熊果苷預(yù)處理一周，ISO給予10 d后處死。測定血清中肌酸酐激酶和乳酸脫氫酶等心臟損傷標(biāo)志物濃度，發(fā)現(xiàn)熊果苷顯著地抑制了促炎細(xì)胞因子，并且增強(qiáng)了心肌抗氧化狀態(tài)。研究表明，熊果苷預(yù)處理對異氧誘導(dǎo)的小鼠心肌肥厚具有明顯的保護(hù)作用。因此，熊果苷可以作為潛在的藥物，干預(yù)治療心肌肥厚。

6.3 免疫系統(tǒng)

環(huán)孢素A(ciclosporin A, CsA)是一種有效的免疫抑制劑，具有治療和毒性作用，但CsA的使用受到其毒性的限制。一些研究者提出氧化應(yīng)激可能在CsA誘導(dǎo)的毒性中發(fā)揮重要作用，熊果苷具有抗氧化和清除自由基的能力，所以KHADIR等[45]研究探討了熊果苷對CsA治療大鼠血清脂質(zhì)過氧化和抗氧化能力的影響。研究控制不同的CsA及熊果苷的含量，測定血清脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，并測定血清總抗氧化能力，即血漿鐵還原能力。結(jié)果顯示，熊果苷對CsA誘導(dǎo)的毒性有保護(hù)作用，但高濃度熊果苷對CsA誘導(dǎo)的毒性有顯著的氧化和脂質(zhì)過氧化作用。

7 結(jié)語

熊果苷在祛除色素、抗氧化、抗炎、抗菌、鎮(zhèn)咳平喘、抗癌等方面具有優(yōu)異的性能，在其他方面也有其自身的特點，例如，能夠減少糞腸桿菌生物膜在導(dǎo)尿管表面的形成[46]、可抑制黃瓜角葉斑病且無細(xì)胞毒性更為安全[47-48]等。并且，在臨床中也有一定的應(yīng)用和人群研究。ANGELO等[49]評估了一種含有薯果苷、香豆素和熊果苷的名為Linfadren的產(chǎn)品以及復(fù)雜的減充血療法(complex decongestive therapy, CDT)對乳腺癌相關(guān)淋巴水腫(breast cancer-related lymphedema, BCRL)患者的療效和安全性。方法選取了50例BCRL門診患者(年齡28～71歲)作為研究對象，隨機(jī)接受CDT治療。結(jié)果證實，這種含有薯果苷、香豆素和熊果苷的產(chǎn)品聯(lián)合CDT是一種安全有效減少BCRL的治療方法，療效優(yōu)于單純CDT。

但需要注意的是，以上研究文獻(xiàn)在熊果苷的使用上，雖然沒有明確指出是哪一種熊果苷，但從實驗材料的來源分析，多為β-熊果苷。現(xiàn)有的化學(xué)合成法及通過植物資源提取或離體培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的也以β-熊果苷為主。同時，合成的β-熊果苷在化妝品行業(yè)應(yīng)用廣泛，但有研究認(rèn)為用量過大可能存在一定的安全隱患。

α-熊果苷是一種高價值糖苷，在化妝品和制藥行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景[50]。有實驗證實α-熊果苷比β-熊果苷對小鼠黑素瘤酪氨酸酶活性抑制更強(qiáng)效，且α-熊果苷具有更高的安全性[36,51]。但目前，α-熊果苷的獲取成本較高，常通過微生物轉(zhuǎn)化法和酶轉(zhuǎn)化法[52]定向合成，化學(xué)合成尚未能提供高效立體專一性的合成方法。并且，關(guān)于α-熊果苷藥理學(xué)研究的報道還十分少見。因此究竟 α-熊果苷和 β-熊果苷是否具有同等藥理作用，或是各有不同，需區(qū)別對待，這有待于藥理學(xué)工作者進(jìn)一步的研究。

熊果苷在化妝品、藥品的應(yīng)用方面發(fā)展迅速，但其應(yīng)用于食品中的安全性研究較為薄弱，食用時的限制性、品種來源的復(fù)雜性等問題都尚待解決。我國是藥食同源的發(fā)源地，隨著人們保健意識的增強(qiáng)，既能調(diào)整身體亞健康狀態(tài)又能增加食物風(fēng)味的藥食同源食品正迅速發(fā)展。我國具有得天獨厚的地理優(yōu)勢、資源優(yōu)勢、科研優(yōu)勢和人才優(yōu)勢，隨著研究的進(jìn)行，新劑型、新技術(shù)也將為熊果苷的制備、合成及在食品、保健品、藥品、化妝品中的應(yīng)用提供更廣闊的思路。