譚 瓊 熊群英
(廣東江門中醫藥職業學院,廣東 江門 529000)
在醫學檢驗領域中,醫學檢驗專業染色主要涉及菌膜片和血涂片兩方面染色。主要以革蘭染色法和瑞氏染色法為主。革蘭染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色方法,1884年由丹麥醫師Gram創立[1]。瑞氏染色法是血液學中廣泛使用的一種鑒別染色方法。
現階段,高職院校及大多數醫學院校和醫院檢驗科用于瑞氏染色法和革蘭染色法等染色試驗的染色架是比較簡陋的傳統染色架和水池式染色架[2]。
傳統的染色架主要為水缸染色,用一個內嵌式玻片的玻片架,把所有玻片全部嵌入玻片架,一并放入染色缸中進行染色[3]。針對此種染色方法,既不便于獨立完成實驗,也不便于觀察染色過程中血膜片或者菌膜片效果控制實驗室染色過程。并且多片同缸共同染色存在嚴重的交叉污染,容易造成血膜或者菌膜脫落,不利于染色工作人員或學生把控,易造成試驗失敗。
水池式染色架是選用兩根鐵條直接架于水池上方,構成實驗染色需求,以完成染色。廢液也是經水池直接流入下水道,甚至有廢液及染色液沿著鐵條流入實驗桌面,既不方便操作,也容易污染環境,甚至存在生物安全隱患。在學校實訓課堂上使用時,學生人數較多,不方便多人操作,同時也容易讓實驗玻片掉落水池,造成實驗失敗,不利于學生獨立完成操作訓練。
在醫學檢驗實驗教學中,我們實驗所設計的染色有革蘭染色、瑞氏染色、蘇木素染色和抗酸染色。所使用的標本有血液、痰液以及活體細菌。“醫學檢驗”作為一門實踐性非常高的課程,必須理論與實踐相結合,才能促使學生在學習中實現教學目標,對學生進行有針對性的引導,學生的自主意識、創新意識及生物安全意識才能逐步提高。
在實驗教學中,主要按照新課程改革要求,團隊合作共同完成實驗,以實現共同的目標,同時實現學生個人的價值。但是使用傳統染色架和水池式染色架進行實驗,我們發現,更多的學生只能在旁邊觀望,并不能滿足其動手實操的需求,只有小部分學生能完成實驗目標,從實驗布置到實驗結果分析,充分實現理論與實踐相結合。
在實驗教學過程中,有些學生在使用染色架時,安全意識不高,傳統染色架和水池式染色架在學生眼里只是一個架子,由于可以自由移動,學生出現用手摸架子,提著染色架子走,甚至把水池式染色架直接拿起來等現象。
根據現階段高校實驗室現狀及調研結果,為了提高教學效果,提高實驗結果的成功率,減少生物安全因素,首先我們對染色架進行改良。結構上突出為下沉內陷,底部為網狀式結構,上方設有把手,前后設有卡位,左上為染色液放置裝置。底部下方為漏斗裝置,可進行拆分。材質上采用不銹鋼添加美國杜邦防腐材料,實現耐酸、耐堿、耐腐蝕等保護目的[4,5]。
2.1.1 第一部分:染色裝置下沉式網狀漏斗卡位結構
該裝置設計了水槽固定卡位,置片桿下方設置了網格,可以安全放置染色玻片,上方有把手,下方還設計了漏斗,可拆分使用,在染色裝置左方還設置染色液裝置,用于染色液的放置。以上改良解決傳統染色掉片問題,更能滿足一些基層小型實驗室,同時亦可滿足學生多人操作,解決現階段實驗室擁擠的問題和實驗室無水池無法染色或標本交叉污染的問題,同時在美觀設計上,符合實驗室管理及生物安全管理標準。
2.1.2 第二部分:染色裝置廢液收集裝置
在設計上采用了漏斗型設計及下沉水池設計,針對染色過程中產生的廢液進行收集處理。漏斗便于收集廢液,下沉便于廢液融入水池廢液系統,不污染實驗桌面。染色后的廢液集中流入廢液系統后可統一妥善處理。而對于沒有廢液系統的實驗室可在下水管道安置廢液桶收集廢液,統一處理廢液,減少生物安全隱患。
2.1.3 第三部分:染色裝置材料質保部分
在染色裝置的材料上,采用不銹鋼打造,同時加入美國杜邦防腐材料,可實現耐腐蝕10年以上。可抵御37%鹽酸、98%硫酸、65%硝酸、次氯酸鈉水溶液(12%活性氯)、30%過氧化氫、50%鉻酸、乙酸、四氯化硅等270多種化學品的長期腐蝕[6]。減少在染色過程中生物試劑對染色架的腐蝕損壞,為染色過程中成片的質量進行有效控制,滿足實驗室生物安全管理要求。
醫學檢驗實驗室應該根據實驗室實施的標準制定相對應的生物手冊,制定新改良染色架操作手冊、各類相關染色操作SOP及注意事項,并定期對學生進行宣教,把相對應的染色納入實驗考核。這些不僅能使學生更加清楚地了解生物安全知識,還能讓學生樹立生物安全防范意識,為學生后續踏入社會奠定一定的知識基礎,還能促使學生標準化、規范化地完成實驗工作,提高實驗結果的準確性,確保實驗過程更加順利。
針對醫學檢驗學生在實驗教學過程,合理分配,安排學生有序完成實驗。針對學生實操染色過程中,重新安排小組共同完成實驗,并收集學生對改良染色架使用意見。針對現階段學生分組管理是否合理恰當進行意見統計,以便后續調整并進行合理化管理。此過程不僅能調動學生積極參與,還提高學生的合作性及創造性,并確保實驗順利進行。
在進行醫學檢驗染色架改良前,我們收集并整理醫院的數據及學生的意見、實驗教師及科任教師的意見,共同探討,以教師引導學生共同參與完成此染色裝置改良。在這過程中學生的參與性和積極性有所提高,同時增強了創作意識。整個改良過程氣氛活躍、操作有序。
通過對染色架三部分進行改良,解決醫學檢驗染色過程中生物安全、廢液收集、生物污染、材料腐蝕等問題,對實驗過程的人員合理化分工、學生合理化安排,確保了實驗零交叉污染,避免廢液飛濺污染實驗桌等情況。提高了實驗結果的可靠性,促使學生在實驗過程中操作更便捷,減少了學生實驗過程頻繁走動、聚集等現象,減少了生物安全隱患的發生,極大地提高了實驗教學質量。
應用了改良后染色架,學生實驗課逐漸變得有秩序,學生的規范化操作、生物安全意識得到了進一步提升。在實驗過程中,養成了垃圾分類、廢液收集處理、儀器設備保養等實驗安全管理意識。不僅提升了學生主人翁心態,而且還培養學生養成了良好的習慣,在新冠肺炎疫情背景下,生物安全意識的提高更有利于學生畢業后就業,提高學生的就業成功率。
染色架在醫學檢驗實驗改革的技術獨特之處與其先進性、科學性密不可分。不僅滿足現醫學院校實驗教學的需求,方便教師示教、學生動手操作,減少生物安全隱患,也可供醫院一些日常染色項目的使用及參考。在進行多張玻片同時染色時,方便操作人員觀察染色效果的變化情況以及控制脫色時間,可避免假陰、陽性結果的出現,提高檢驗結果的準確率。解決了現階段高校實驗教學的難題。
改良后染色架不僅適用于醫學院校的教學,還適用于醫院檢驗科、血液檢驗科的工作,疾控中心的工作,第三方檢驗機構等。方便臨床工作,減少生物安全危害,確保實驗順利開展。