一例人間炭疽病例的溯源調(diào)查及處置

鄭澤紅，楊小剛，楊天烈，任 俊

（漢中市南鄭區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心，陜西漢中 723100）

炭疽（anthrax） 是由炭疽桿菌（Bacillus anthracis）引起的一種急性、熱性、敗血性人獸共患傳染病，牛、馬、羊、驢等草食動物對其最易感[1]。炭疽桿菌的芽孢抵抗力很強(qiáng)，在外界土壤及草原上可存活數(shù)十年。炭疽為一種自然疫源性疾病，呈地方性流行，有一定的季節(jié)性，多發(fā)生在雨水多、洪水泛濫的季節(jié)[2]。近年來，我國多地有人感染的報告，主要為通過皮膚接觸感染的皮膚炭疽（cutaneous anthrax）[3]。

2021 年6 月20 日，陜西省漢中市南鄭區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局接到同級衛(wèi)健部門通報，漢中市中心醫(yī)院收治的一名長期從事牛羊屠宰的武某被確診患有皮膚炭疽。該患者6 月9 日手腕出現(xiàn)皮膚丘疹，后在小診所就醫(yī)，不但沒有效果，病情反而逐漸嚴(yán)重；6月20 日在漢中市中心醫(yī)院被確診為炭疽，并在醫(yī)院隔離治療。南鄭區(qū)疾病預(yù)防控制中心采集患者最近一次宰殺牛場所環(huán)境、屠宰用具棉拭子以及所剩牛肉樣品，送陜西省疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行炭疽核酸檢測，結(jié)果呈陽性。為查清該病例的病原來源以及病原污染面和畜間發(fā)病情況，根據(jù)疫情處置分工，南鄭區(qū)動物疾病預(yù)防控制中心組織相關(guān)專業(yè)人員立即對屠宰和養(yǎng)殖環(huán)節(jié)進(jìn)行溯源，開展畜間緊急流行病學(xué)調(diào)查及后期處置工作。

1 材料及方法

1.1 病例定義

1.1.1 可疑病例 全區(qū)1 個月內(nèi)（5 月10 日—6月9 日）突發(fā)不明原因死亡或出現(xiàn)炭疽癥狀的易感動物。

1.1.2 確診病例 對可疑病例采集血液送市動物疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行炭疽桿菌核酸檢測，經(jīng)PCR 檢測為陽性的即為確診病例。

1.2 調(diào)查對象

根據(jù)炭疽潛伏期（牛20 d，人最長12 d）倒推，設(shè)定患者發(fā)病（6 月9 日）前30 d 為調(diào)查時間段。重點調(diào)查該時間段內(nèi)與患者牛羊屠宰有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的養(yǎng)殖場和屠宰場，同時排查全區(qū)其他飼養(yǎng)炭疽桿菌易感動物的場戶。

1.3 調(diào)查內(nèi)容與方法

通過現(xiàn)場調(diào)查、座談，與屠宰場主及從業(yè)人員了解宰殺牛的來源，與養(yǎng)殖場相關(guān)人員了解牛飼養(yǎng)、發(fā)病、死亡、引種、免疫以及周邊牛羊養(yǎng)殖情況；查閱炭疽歷史發(fā)病原始資料，實地察看牛放牧地的山川、河流、地貌變化等情況。

1.4 抽樣檢測

1.4.1 樣品采集 采集被宰殺牛只污染的環(huán)境樣本，以及患者發(fā)病前30 d 到過的養(yǎng)牛場戶的圈舍、料槽、飼料、糞便及運輸車輛棉拭子樣本；對這些養(yǎng)牛戶所有存欄牛進(jìn)行耳靜脈采血，并將全血樣本送市級實驗室檢測。

1.4.2 檢測方法 根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《炭疽防治技術(shù)規(guī)范》中分子生物學(xué)診斷方法——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR），按照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《動物炭疽診斷技術(shù)》（NY/T 561—2015）[4]進(jìn)行實驗室操作和結(jié)果判定。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用Office Excel 2013 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總，使用Google 軟件繪制調(diào)查地理位置圖。

2 結(jié)果

2.1 現(xiàn)場調(diào)查

2.1.1 患者發(fā)病前家畜屠宰情況 患者武某為職業(yè)屠宰人員，專門負(fù)責(zé)為南鄭區(qū)及周邊縣區(qū)牛羊肉銷售攤點代殺牛羊，無固定屠宰場所；在漢中市中心醫(yī)院確診前1 個月內(nèi)，分別于5 月21 日、5 月25 日、6 月7 日、6 月10 日，在南鄭區(qū)為3 個養(yǎng)殖場戶及相鄰縣1 個養(yǎng)殖場戶宰殺牛4 頭。被宰殺的牛用車輛運輸至縣城張某屠宰點分割后，在農(nóng)貿(mào)市場門店銷售，每頭銷售時間為3～7 d 不等。

2.1.2 屠宰點情況 張某屠宰分割點位于距離南鄭區(qū)中心城區(qū)1 km 處，租用農(nóng)戶房屋4 間共100 m2用于居住和牛肉分割，其中操作間30 m2、儲藏間15 m2。6 月19 日南鄭區(qū)疾病預(yù)防控制中心工作人員對該屠宰點操作間、銷售攤點環(huán)境及所剩牛肉采樣，送省級疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行炭疽桿菌核酸檢測，結(jié)果操作間的掛牛鉤涂抹拭子和門店內(nèi)未銷售完的牛肉樣品呈陽性。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門隨即對屠宰點內(nèi)冷藏的至少200 kg 過往煉制牛油和產(chǎn)品進(jìn)行封存，責(zé)令該屠宰點停業(yè)。經(jīng)查，該屠宰場點無相關(guān)資質(zhì)，宰殺的牛也未申報檢疫。

2.1.3 溯源情況 以患者患病前1 個月內(nèi)的宰牛活動軌跡，分別走訪調(diào)查了熊某、王某、譚某等5戶牛養(yǎng)殖戶。這5 戶養(yǎng)殖戶共存欄牛69 頭，其中黃牛67 頭、水牛2 頭，主要為當(dāng)?shù)匕蜕脚Ｅc西門塔爾牛，以舍飼為主，僅王某飼養(yǎng)的4 頭牛為散養(yǎng)放牧。譚某自述5 月21 日飼養(yǎng)的1 頭帶犢母牛因產(chǎn)犢2 個月后發(fā)燒不食被淘汰，由患者宰殺，然后通過汽車運輸至屠宰點進(jìn)行宰殺分割銷售，現(xiàn)場檢查該母牛所產(chǎn)牛犢健康，無異常。6 月28 日王某自述，其自家1 頭放牧牛走失，2 d 后被找到時發(fā)現(xiàn)牛臥地不起，于是低價賣給熊某，由患者武某在河道內(nèi)宰殺放血，然后轉(zhuǎn)手賣給張某，并用汽車運輸至熊某家養(yǎng)殖場外一空地剝皮分割（圖1）。在調(diào)查走訪時還發(fā)現(xiàn)，王某家牛放牧區(qū)比較偏僻，四周山林茂密（圖2），10 d 前因連續(xù)下雨發(fā)生了洪水，河道多處損毀，多處有塌方。其余兩戶2 頭被宰殺的牛沒有患病銷售情況。這5 戶養(yǎng)殖戶近半年來均未有從外地調(diào)入活牛的經(jīng)歷，也未進(jìn)行炭疽疫苗免疫，周邊其他養(yǎng)殖場戶沒有牛發(fā)病死亡情況。

2.1.4 臨床檢查 對5 戶養(yǎng)殖戶存欄的69 頭牛進(jìn)行臨床健康檢查，未發(fā)現(xiàn)異常情況，牛群臨床健康。

2.1.5 飼料及飲水 舍飼牛以自配料為主，粗飼料酒糟來源于本地，經(jīng)詢問沒有添加骨肉粉的情況，人畜共用水源為地下水。

2.1.6 運輸車輛情況 張某聯(lián)系好需要宰殺的牛后，由患者武某就近放血剝皮，經(jīng)汽車運輸?shù)綇埬惩涝c進(jìn)行分割，運輸車輛平常基本不消毒。

2.1.7 人員感染情況 除患者武某發(fā)病住院外，經(jīng)衛(wèi)健部門健康監(jiān)測，未發(fā)現(xiàn)與武某密切接觸者和相關(guān)養(yǎng)殖場從業(yè)人員有感染的情況。

2.1.8 重點區(qū)域排查情況 對王某養(yǎng)牛圈舍周邊3 km 的區(qū)域重點開展調(diào)查，詳細(xì)了解易感家畜感染發(fā)病及異常發(fā)病情況，未發(fā)現(xiàn)其他家畜患病死亡；對全區(qū)22 個鎮(zhèn)（街道辦）緊急摸底排查，共排查牛羊養(yǎng)殖戶2 886 戶，牛38 640 頭、羊13 487 只，未發(fā)現(xiàn)炭疽可疑病例。

2.2 實驗室檢測

2.2.1 第一次檢測 6 月21 日，根據(jù)患者武某發(fā)病時間和調(diào)查情況，鎖定熊某、王某養(yǎng)牛場戶為重點調(diào)查對象，隨即省市疫情處置專家在熊某家養(yǎng)殖場外牛剝皮處的膠皮地面、周邊土壤，及其養(yǎng)牛場的地面、食槽、粉料、酒糟、運輸車輛，采樣14份進(jìn)行核酸檢測；6 月25 日，檢測證實1 份膠皮地面和2 份周圍土壤樣品為陽性。

2.2.2 第二次檢測 6 月25—27 日，南鄭區(qū)畜牧中心再次到熊某家開展調(diào)查。經(jīng)當(dāng)?shù)毓膊块T配合，熊某確認(rèn)宰殺牛為6 月7 日購自本區(qū)王某所養(yǎng)的病牛。隨后采樣人員到王某養(yǎng)牛場圈舍內(nèi)采集環(huán)境樣本24 份，采集熊某牛剝皮點環(huán)境樣本8 份、運輸患病牛車輛環(huán)境樣本5 份；同時，考慮到患者武某發(fā)病前后可能在宰殺過程中污染環(huán)境，還對武某1個月來宰殺活動相關(guān)的其余3 戶養(yǎng)殖場，采集場地、圈舍環(huán)境樣品85 份。所有樣品送漢中市動物疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行實驗室檢測。6月30日檢測證實，熊某剝皮點和運輸車輛駕駛室3 個樣本為陽性以及5 個養(yǎng)殖場戶圈舍內(nèi)環(huán)境均為陰性。

2.2.3 第三次檢測 因王某、熊某養(yǎng)殖圈舍內(nèi)未檢測出炭疽病原，為查找炭疽來源，理清病原傳播途徑，7 月5 日，對南鄭區(qū)其他4 戶存欄的50 頭牛采集血液，送漢中市動物疾病預(yù)防控制中心檢測，結(jié)果全部為陰性。

2.2.4 第四次檢測 在7 月3 日完成全面消毒及染疫產(chǎn)品無害化處理后，為檢驗評價消毒效果，在炭疽檢測陽性區(qū)域共采樣19 份，送漢中市動物疾病預(yù)防控制中心檢測，結(jié)果全部為陰性。

3 疫情處置

疫情發(fā)生后，按照區(qū)政府疫情處置方案，衛(wèi)健、農(nóng)業(yè)農(nóng)村、市場監(jiān)管等部門及鎮(zhèn)辦，按照各自職責(zé)分工，緊急開展流行病學(xué)調(diào)查、從業(yè)人員健康監(jiān)測、產(chǎn)品召回、環(huán)境消殺以及產(chǎn)品無害化處理等工作。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門立即對全區(qū)牛飼養(yǎng)及從業(yè)人員情況等開展摸底調(diào)查，了解近期全區(qū)牛羊異常死亡情況，在搞好日常監(jiān)測、流調(diào)溯源的同時，及時查封扣押屠宰場點儲存的牛肉及副產(chǎn)品，對有關(guān)人員涉嫌違犯動物防疫法的行為及時函告區(qū)農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊進(jìn)行立案查處，對圈存牛限制移動，加大疫情監(jiān)測，對環(huán)境及污染區(qū)域采取嚴(yán)格的消毒措施，防止因滅源不徹底而形成永久疫源地。

3.1 環(huán)境消毒

對養(yǎng)牛場及屠宰場所地面、墻壁清除雜物后，首日用5%戊二醛進(jìn)行全面消毒，1 d 后用火焰滅菌器對地面、墻壁、金屬欄進(jìn)行火焰滅菌，2 d 后用10%氫氧化鈉溶液進(jìn)行全面消毒，3 d 后再用20%的漂白粉進(jìn)行噴霧消毒。對檢測出土壤陽性的區(qū)域首日用5%戊二醛全面消毒，2 d 后用10%氫氧化鈉溶液進(jìn)行浸潤消毒，3 d 后再用20%的漂白粉溶液進(jìn)行浸潤消毒。

3.2 器具消毒

對器具首次用5%戊二醛浸泡24 h，次日晾干后再用10%漂白粉噴霧或擦拭，冰柜斷電除冰后用5%戊二醛全面消毒，次日再用10%漂白粉噴霧或擦拭，對無利用價值的進(jìn)行焚燒處理。

3.3 污染產(chǎn)品處理

對檢出的陽性牛肉及可能污染的其他產(chǎn)品，連同清除的雜物，就近進(jìn)行焚燒碳化處理。

3.4 疫情終結(jié)

終末消毒后，對重點區(qū)域采集環(huán)境樣本送檢，結(jié)果全部為陰性，截至7月25日（采血送檢后20日）未出現(xiàn)新病例，經(jīng)報請區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門，解除養(yǎng)殖場動物移動限制措施。

4 討論

4.1 病原來源推測

通過詢問當(dāng)年動物疫病普查人員和查閱歷史資料獲知，南鄭區(qū)曾在20 世紀(jì)50、70 年代出現(xiàn)過牛炭疽零星病例，其中包括王某所在的鄉(xiāng)。結(jié)合2021 年5—6 月南鄭區(qū)降雨量特別多，王某養(yǎng)牛場附近連續(xù)多次發(fā)生過山洪，綜合歷史資料、調(diào)查結(jié)果以及實驗室檢測結(jié)果，認(rèn)為本次武某感染的炭疽桿菌可能來源于王某飼養(yǎng)的牛。洪水將過往炭疽病原帶出，污染水、草，王某飼養(yǎng)的牛在放牧過程中通過采食而感染。患病牛放牧在外，發(fā)病急，未和同圈牛接觸，所以在圈舍環(huán)境和同圈牛中未有炭疽病原檢出，其他養(yǎng)牛戶以舍飼為主，因而圈舍內(nèi)環(huán)境及圈存牛也未檢出炭疽病原。熊某養(yǎng)殖場外剝皮點環(huán)境及張某屠宰間環(huán)境及工具，以及運輸車輛、地面檢出炭疽陽性，推測均為患者武某屠宰王某病牛造成的病原污染。

4.2 疫情處置建議

4.2.1 強(qiáng)化部門協(xié)作 炭疽作為人獸共患的烈性傳染病，涉及公共衛(wèi)生安全，社會關(guān)注度高。因此在政府的統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)下，應(yīng)建立各部門分工協(xié)作機(jī)制，發(fā)現(xiàn)疫情時要按照防治技術(shù)規(guī)范要求，相關(guān)部門各司其職，果斷采取處置措施，及時處置疫情、輿情，及時互通信息，做到應(yīng)急處置到位。

4.2.2 積極開展溯源調(diào)查 針對衛(wèi)健部門反饋的人感染病例，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門應(yīng)與衛(wèi)健部門聯(lián)合開展溯源調(diào)查，以養(yǎng)殖場為重點，根據(jù)《炭疽防治技術(shù)規(guī)范》和動物發(fā)病情況，采取后續(xù)處理措施。

4.2.3 科學(xué)消毒 根據(jù)《炭疽防治技術(shù)規(guī)范》中的消毒劑使用要求進(jìn)行科學(xué)消毒，通過實驗室檢測驗證其滅菌效果，確保完全殺滅炭疽及其芽孢。

4.2.4 加強(qiáng)屠宰管理 漢中市作為陜西省生豬主產(chǎn)區(qū)，牲畜屠宰管理以生豬為主，全市布局有22個備案的生豬定點屠宰場，而牛羊肉消費季節(jié)性較明顯，冬季消費量較大，其他季節(jié)較少，政府未規(guī)劃建立牛羊定點屠宰場所，相關(guān)部門難以對其進(jìn)行有效監(jiān)管。因此，建議當(dāng)?shù)卣霸缫?guī)劃，把牛羊納入定點屠宰范圍，規(guī)范牛羊屠宰行為，同時執(zhí)法部門要加大對經(jīng)營、屠宰、運輸病死畜禽行為的查處力度，防止病害肉流入市場，確保動物源性食品安全。

4.2.5 強(qiáng)化從業(yè)人員健康宣傳 加強(qiáng)牛羊養(yǎng)殖及屠宰人員的人獸共患病防控知識宣傳，指導(dǎo)其做好牛羊多發(fā)病的日常免疫工作，做好個人防護(hù)，不從疫區(qū)引進(jìn)家畜，不收購、運輸、屠宰病死畜，每年主動接受農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門的“兩病”普查，對檢出的陽性畜及時撲殺并做好無害化處理。