新生兒ABO溶血病檢測結果分析及臨床意義

黃凱遠

摘要：目的：分析新生兒ABO溶血病（ABO-HDN）檢測結果并探討其臨床意義。方法：選取2018年1月至2019年12月我院收治的479例疑似新生兒ABO溶血病患兒開展研究，研究對象為O型母親所生產的A型或B型嬰兒，所有患兒均進行新生兒溶血三項試驗檢測，并對檢測結果展開分析。結果：女嬰ABO-HDN陽性確診率為70.00%，略高于男嬰63.44%，差異無統計學意義（χ2=2.239，P>0.05）;0～3d日齡的嬰兒ABO-HDN陽性率為70.68%，明顯高于4～7d （58.18%）及>7d（ 35.71%）的嬰兒，差異有統計學意義（χ2=22.831，P<0.05）;母嬰血型為O-A組合的嬰兒ABO-HDN陽性率為75.93%，顯著高于O-B組合嬰兒58.17%，差異有統計學意義（χ2=16.696，P<0.05）;抗體釋放試驗陽性率為91.62%高于血清游離抗體試驗79.48%，差異有統計學意義（χ2=20.620，P<0.05）。結論：ABO-HDN陽性檢出率與新生兒日齡、母嬰血型組合及試驗方法等因素密切相關，針對上述因素，孕期積極開展預防措施，可對丈夫為A型、B型或AB型的O型孕婦進行產前血清學檢測等方式排查，盡可能減少ABO-HDN患兒的出生。產后也應及早對新生兒行HDN檢測，早發現早治療，以降低疾病對患兒的危害性。

關鍵詞：新生兒ABO溶血病;血型;日齡;性別

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）03--01

新生兒溶血病（HDN），是指母胎血型不合所致的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。胎兒遺傳自父親的血型抗原為母親所缺乏，當胎兒紅細胞進入母體后，刺激母體產生相應的免疫性IgG類抗體，這類抗體可通過胎盤進入胎兒血液循環并附著于胎兒紅細胞表面，產生抗原抗體反應，導致紅細胞被破壞，引發同種免疫性溶血;其中以ABO血型系統的血型不合引發的HDN較為常見[1]。新生兒溶血三項試驗，即直接抗人球蛋白試驗（DAT）、紅細胞致敏抗體釋放試驗與血清游離抗體試驗;其檢測結果可作為臨床診斷新生兒溶血病的重要指標，同時可為后續治療方案的制定提供一定參考依據[2]。本研究對我院479例新生兒ABO溶血病檢測結果進行分析，深入探討其臨床意義，內容如下。

1.資料與方法

1.1一般資料

選取2018年1月至2019年12月我院479例疑似新生兒ABO溶血病患兒為觀察對象。男女比例為279：200，日齡為0～30d，其中0～3天 382例，4～7天 55例，>7天42例。

1.2方法

（1）標本采集：取受檢者靜脈血2ml，血標本用EDTA抗凝，標明患者信息，送檢。（2）儀器：長春博研提供的TD-3A血型血清學離心機、FYQ型免疫微柱孵育器。（3）試劑有：長春博迅提供的抗人球蛋白檢測卡、新生兒ABO.RhD血型檢測卡、酸釋放試劑;長春博德提供的抗體篩檢紅細胞和上海血液提供的ABO血型反定紅細胞（4）標本處理：血標本用離心機以3000r/min的轉速離心3min后吸取上層血漿做游離抗體試驗;再用生理鹽水洗滌紅細胞四次，最后一次，小心去除上清液，用1支試管留部分上清液做對照試驗;取部分紅細胞定血型;至少保留洗滌后壓積紅細胞1ml做抗體釋放試驗。（5）測定：按照操作規程，借助新生兒ABO、RhD血型檢測卡進行ABO、RhD血型鑒定;新生兒溶血病三項試驗，采用微柱凝膠免疫凝集法進行檢測。（6）注意事項：儀器設備定期校準、做好日常保養及維護，確保儀器在穩定條件下使用，實驗過程嚴格按照SOP操作，并按要求做好質量控制，確保結果可靠。

1.3結果判定

陽性：細胞在凝膠表面凝集成一條紅線或散布在凝膠中;陰性：細胞沉積在管底。雙相：既有陽性結果，同時也有陰性結果。溶血：紅細胞溶解，作為陽性結果對待。若抗體釋放試驗結果為陽性或者直抗與游離試驗同時為陽性時即可判定為ABO-HDN;直抗或游離試驗單個陽性時則判定為可疑;三項試驗結果均為陰性時判定為血清學試驗未能證實由血型抗體引起HDN[3]。

1.4數據處理

運用統計軟件SPSS 21.0，[n（%）]表示計數資料、行χ2檢驗，P<0.05為差異有意義。

2.結果

2.1不同性別嬰兒ABO-HDN陽性率

本組479例患兒檢測結果中陰性133例，可疑29例、確診陽性317例，總確診率為66.18%。女嬰ABO-HDN陽性確診率略高于男嬰（70.00%vs63.44%），差異無統計學意義（P>0.05），詳見表1：

2.2不同日齡嬰兒ABO-HDN陽性率

0～3d日齡的嬰兒ABO-HDN陽性檢出率為70.68%，與4～7d（58.18%）及>7d（35.71%）的嬰兒相比，差異有統計學意義（P<0.05），詳見表2：

2.3不同血型嬰兒ABO-HDN陽性率

母嬰血型為O-A組合的嬰兒ABO-HDN陽性率為75.93%，顯著高于O-B組合嬰兒58.17%（P<0.05），詳見表3：

2.4 ABO-HDN不同試驗陽性率

游離抗體試驗陽性率為（79.48%）低于抗體釋放試驗（91.62%），其中母嬰血型為O-A組合的嬰兒釋放試驗陽性率（75.93%）明顯高于游離試驗（60.65%）（P<0.05）;O-B組合的嬰兒這兩項試驗結果比較，差異無統計學意義（P>0.05），詳見表4：

3.討論

ABO-HDN主要指母親體內免疫性IgG-抗A（B）抗體經過胎盤進入胎兒血液循環，導致胎兒紅細胞致敏或被破壞，引發溶血[4]。本病始于胎兒時期，可引起胎兒出現水腫、貧血等情況，嚴重者甚至發生宮內死亡;患兒出生后可有黃疸、貧血、肝脾腫大等癥狀，若治療不及時病程逐漸加重可致核黃疸，并繼發出現哭納差、驚厥、嗜睡、肌張力減低等神經智能方面諸多不良癥狀，甚至可致新生兒死亡，嚴重危害新生兒身心健康。故積極開展新生兒溶血三項試驗并分析檢測結果十分必要。

（1）不同性別嬰兒ABO-HDN發生情況，本研究指出，女嬰ABO-HDN陽性確診率略高于男嬰（70.00%vs63.44%），差異無統計學意義，這與尹明偉、陳學軍、曾智[5]等學者報道中女嬰確診率（74.18%）顯著高于男嬰（66.34%），P<0.001的結果不一致。但由于該影響因素相關回顧性分析研究結論相對較少，結果缺乏一定驗證，故目前臨床并未將性別納入ABO-HDN的發病影響因素。

（2）不同日齡嬰兒ABO-HDN檢出情況，0～3d日齡的嬰兒ABO-HDN陽性檢出率明顯高于4～7d及>7d的嬰兒，差異有統計學意義，這表示在溶血早期實行溶血三項檢查對HDN具有更高的靈敏度，及早為新生兒開展新生兒溶血三項試驗可減少漏檢情況的發生。分析原因可能隨著病程的進展，患兒體內已致敏的紅細胞逐漸被破壞而呈下降趨勢，此時機體游離IgG抗體含量也可隨著時間的延長逐漸被消耗而明顯減少，且大多以抗原抗體復合物形式存在，不具備反應原性，從而影響疾病的檢出。臨床也有報道指出，新生兒日齡為ABO-HDN檢出率的獨立因素，且陽性率可隨著日齡的增長而呈下降趨勢[6]。故臨床醫師針對疑似ABO-HDN的患兒應盡早抽取血樣送檢，以提高陽性檢出率，避免延誤治療時機。

（3）不同血型嬰兒ABO-HDN檢出情況，母嬰血型組合為O-A的嬰兒ABO-HDN陽性檢出率顯著高于O-B組合的嬰兒，差異有統計學意義，考慮可能與胎兒紅細胞上A抗原結合位點多于B抗原結合位點有關，且與B型抗原相比，A型抗原的免疫原性更強，其更容易與IgG抗體發生結合，從而誘導機體發生免疫應答。

（4）ABO-HDN不同試驗陽性檢出率，臨床研究發現，溶血三項試驗可對新生兒溶血病的病情嚴重程度起到良好的提示作用[7]。本研究中，釋放試驗陽性檢出率顯著高于游離試驗，且 A型嬰兒比B型嬰兒更為顯著，差異有統計學意義，這與吳淑華、苗銳[8]等人研究中提出的HDA檢測中釋放試驗陽性率最高（可達56.13%）的結論相一致;充分說明釋放試驗在ABO-HDN臨床診斷中具有更高的價值，進一步表明A型紅細胞更容易與血漿中的特異性抗體結合。釋放試驗與紅細胞直接抗球蛋白試驗均用于檢測患兒紅細胞是否因母體IgG類血型抗體滲入而出現致敏現象。但就試驗靈敏度和準確度而言，何柏霖[9]的研究中也指出釋放試驗的靈敏度和準確度均比直抗試驗高，因為釋放試驗使用的是濃集紅細胞，濃度是直抗試驗的數百乃至上千倍，釋放后收集到的抗體濃度自然也會高很多，故釋放試驗靈敏度高且特異性較強，是臨床目前判斷新生兒是否發生HDN的重要指標。此外，游離試驗主要用于測定患兒血清內是否存在游離的血型抗體，若游離與釋放試驗結果均為陽性說明患兒不僅紅細胞上有抗體吸附，且血清中也存在諸多游離抗體，提示其病情較為嚴重，抗體有繼續致敏紅細胞的可能;治療后若游離試驗結果顯示轉為陰性，則說明血清內無游離抗體，提示患兒預后良好。但游離試驗用于癥狀相對較輕的HDN患兒診斷中靈敏度較低，故其陽性檢出情況不及釋放試驗。

綜上所述，新生兒溶血三項試驗在ABO-HDN臨床診斷中發揮重要作用，醫師應對血清學檢測開展的必要性具有充分認知，從而對可疑標本及時送檢;早期開展新生兒溶血三項試驗可一定程度上規避漏診現象，以免影響后續治療。臨床針對夫婦血型不合的孕婦加強產前血清學檢測，可降低ABO-HDN患兒出生率;針對母嬰血型組合為O-A、O-B的新生兒及早開展ABO-HDN干預措施，對改善其生存質量具有重要意義。

參考文獻：

[1]肖成，譚建玲，李江，等. 新生兒ABO溶血病與血液檢測指標相關性的分析[J]. 昆明醫科大學學報，2020，41（4）：117-120.

[2]陳卓瑤，鄧秋連，黃映紅，等. 溶血三項檢測血清總膽紅素及IgG抗體效價與新生兒ABO溶血病的關系探討[J]. 新疆醫科大學學報，2020，43（8）：1069-1072.

[3]蔡大鳳，榮成智，秦雪，等. 新生兒溶血病患兒的實驗結果及相關因素分析[J]. 檢驗醫學與臨床，2020，17（14）：2000-2003.

[4]楊蛟，努爾亞·熱加甫，阿依加馬力·木合臺爾. 血型、血清檢測與高膽紅素血癥患兒ABO新生兒溶血病的相關性研究[J]. 貴州醫藥，2019，43（4）：628-629.

[5]尹明偉，陳學軍，曾智，等. 母嬰ABO血型不相合的高膽紅素血癥患兒新生兒溶血病確診率的影響因素分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2020，41（6）：663-666，670.

[6]郭秋，畢昊，張然迪，等. 新生兒溶血3項檢測結果及臨床意義分析[J]. 臨床血液學雜志，2020，33（4）：253-255.

[7]徐文瑩，任新雯，井忠翠，等. ABO新生兒溶血病患兒溶血三項試驗和就診日齡與血清總膽紅素水平的關系研究[J]. 臨床輸血與檢驗，2021，23（3）：306-309.

[8]吳淑華，苗銳. 150例高膽紅素血癥新生兒溶血三項檢測及相關影響因素分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2019，40（9）：1134-1137.

[9]何柏霖. 2208例疑似新生兒溶血病血清學檢測結果分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2020，41（2）：217-220.

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