類風濕關節炎患者外周血及關節滑液miR-146a、基質金屬蛋白酶的水平與疾病活動度的相關性

楊年安

類風濕關節炎是臨床常見的一類疾病，患者普遍表現出慢性、炎性滑膜炎的癥狀體征，可導致關節功能的障礙及畸形的發生，嚴重影響患者的生活能力及質量。臨床中與類風濕關節相關的研究中，關于疾病相關的血液及關節滑液指標的表達變化研究均可見[1-2]。其中miR及基質金屬蛋白酶指標均是在本病研究中并不常見的指標，但是也是研究差異與爭議較為突出的指標[3-4]。因此對類風濕關節炎患者進行上述指標表達的變化研究需求較高，有助于疾病的有效診斷及治療措施的針對性制定。本研究就類風濕關節炎患者外周血及關節滑液miR-146a及基質金屬蛋白酶與疾病活動度的相關性進行探究與觀察，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月-2020年3月湖北民族大學附屬民大醫院的80例類風濕關節炎患者為觀察組，同時期的80例關節損傷患者為對照組。對照組納入標準：20～75歲；關節損傷。對照組排除標準：合并其他損傷；合并感染；妊娠及哺乳期女性；合并心、腦、腎、肺等疾病；合并代謝性疾病。觀察組納入標準：20～75歲；類風濕關節炎。觀察組排除標準：合并關節損傷及其他關節疾病；合并感染；妊娠及哺乳期女性；合并心、腦、腎、肺等疾病；合并代謝性疾病。對照組中男20例，女60例；年齡26～71歲，平均（46.3±7.2）歲。觀察組中男19例，女61例；年齡25～72歲，平均（46.6±7.1）歲；病程20～95個月，平均（61.3±8.1）個月；疾病活動度[依據28個關節疾病活動度評分（DAS28）評定]：緩解18例，輕度活動25例，中度活動22例，重度活動15例。兩組性別、年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05），有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。患者對研究知情同意。

1.2 方法

采集兩組晨起空腹肘靜脈血，將采集的4.0 ml血標本在采集后的0.5 h內送檢，采集兩組術中關節滑液或穿刺抽取關節滑液，采集后即刻送檢，采用實時熒光定量PCR法對miR-146a進行檢測；采用酶聯免疫法進行外周血及關節滑液基質金屬蛋白酶（MMP-2及MMP-3）的檢測。由兩名經驗豐富的檢驗科工作人員嚴格按照相關標準進行操作檢測。然后統計及比較兩組的上述檢測指標，并比較觀察組中不同疾病活動度的檢測結果，采用Spearman秩相關分析外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3與類風濕關節炎疾病活動度的關系。

1.3 統計學處理

本研究中的數據采用軟件SPSS 23.0分析，計數資料采用率（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，進行t檢驗，重復測量的計量資料進行方差分析，關系分析采用Spearman秩相關分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較

觀察組的外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

表1 兩組外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較（±s）

表1 兩組外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較（±s）

miR-146a MMP-2（μg/L） MMP-3（μg/L） miR-146a MMP-2（μg/L） MMP-3（μg/L）對照組（n=80） 1.02±0.13 2.63±0.51 1.26±0.12 1.39±0.20 106.31±15.36 30.36±5.16觀察組（n=80） 1.95±0.26 90.63±11.36 5.63±0.60 2.63±0.31 1 261.31±123.69 260.76±28.76 t值 28.615 69.216 63.879 30.063 82.883 70.527 P值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001組別 外周血 關節滑液

2.2 觀察組不同疾病活動度患者外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較

觀察組不同疾病活動度患者外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較，差異有統計學意義（P<0.05），主要表現為重度活動患者的檢測水平顯著高于緩解、輕度活動及中度活動者，中度活動者顯著高于緩解及輕度活動者，輕度活動者顯著高于緩解者，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

表2 觀察組不同疾病活動度患者外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較（±s）

表2 觀察組不同疾病活動度患者外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3比較（±s）

*與緩解、輕度活動及中度活動比較，P<0.05；#與緩解及輕度活動比較，P<0.05；△與緩解比較，P<0.05。

miR-146a MMP-2（μg/L） MMP-3（μg/L） miR-146a MMP-2（μg/L） MMP-3（μg/L）緩解（n=18） 1.19±0.16 10.22±2.21 2.20±0.26 1.80±0.26 220.63±19.98 110.31±20.16輕度活動（n=25） 1.80±0.25△ 56.96±8.39△ 3.98±0.56△ 2.35±0.29△ 986.77±69.76△ 238.97±26.36△中度活動（n=22） 2.03±0.28# 130.31±12.89# 6.36±0.66# 2.98±0.33# 1 699.63±130.63# 306.76±29.91#重度活動（n=15） 2.93±0.31* 185.05±20.03* 11.39±1.06* 3.58±0.50* 2 323.71±166.76* 409.79±36.99*F值 131.085 729.116 595.866 86.550 136.805 328.797 P值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001疾病活動度 外周血 關節滑液

2.3 外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3與類風濕關節炎疾病活動度的關系

Spearman秩相關分析顯示，外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3與類風濕關節炎疾病活動度均呈正相關（P<0.05），見表3。

表3 外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3與類風濕關節炎疾病活動度的關系

3 討論

類風濕關節炎患者的關節不適感、畸形及功能障礙等均表現突出，對患者的健康狀態危害極大。臨床中關于類風濕關節炎的各方面研究中，關節滑液及血液中疾病相關指標的變化與疾病的關系研究是重點，尤其是關節滑液中疾病相關指標的表達更有助于反應病灶局部的變化情況[5-6]。臨床中與類風濕關節炎相關的研究指標眾多，miR類指標是常見研究指標之一，其中的miR-146a作為在免疫調節中研究較多的指標，而類風濕關節炎作為自身免疫性疾病，此類指標在本病患者中的研究意義相對較高[7-8]。另外，基質金屬蛋白酶作為細胞外基質降解的重要指標，其在關節軟骨退行性病變中起著降解的作用，而MMP-2及MMP-3作為在類風濕性關節炎中研究較多的指標，其與疾病活動度的關系研究卻極為匱乏，導致其在類風濕關節炎患者中的檢測價值仍有待進一步深入探究[9-10]。

本研究就類風濕關節炎外周血及關節滑液miR-146a及基質金屬蛋白酶的變化情況進行探究，結果顯示，類風濕關節炎患者的外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3顯著高于關節損傷者，且不同疾病活動度類風濕關節炎者的檢測結果差異有統計學意義（P<0.05），而Spearman秩相關分析進一步肯定了上述研究指標與類風濕關節炎疾病活動度的關系。分析原因，類風濕關節炎患者的免疫失衡情況相對突出，與miR-146a表達的失衡有一定關系[11-12]。而隨著關節嚴重程度的加重，其被釋放入血及關節滑液中的情況越為嚴重，因此其表達水平也相對越高[13-15]。

綜上所述，本研究認為類風濕關節炎患者的外周血及關節滑液miR-146a、MMP-2及MMP-3均呈現高表達，且與疾病活動度密切相關，因此在類風濕關節炎患者中的檢測價值較高。