南京地區(qū)體檢人群胃蛋白酶原表達(dá)水平和意義

劉艷秋 ,陳家慧 ,王瓊瓊 ,何 萍 ,王 坤 ,立 彥△

1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院/南京市第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科,江蘇南京 210006;2.深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司,廣東深圳 518000

胃癌屬于最常見(jiàn)的癌癥之一,是導(dǎo)致全球癌癥死亡的主要因素[1]。胃癌的發(fā)病率在東亞居首位,其次是中歐、東歐和南美地區(qū),在北美和非洲地區(qū)則較低[2-3]。胃癌以Correa級(jí)聯(lián)的漸進(jìn)方式發(fā)展。此過(guò)程由幽門螺桿菌引發(fā),首先發(fā)生慢性活動(dòng)性胃炎,然后發(fā)展為慢性萎縮性胃炎、腸化生和發(fā)育異常,最后發(fā)展成浸潤(rùn)性癌[4-5]。因此,確定萎縮性胃炎作為胃癌癌前病變的危險(xiǎn)因子,對(duì)于預(yù)防胃癌至關(guān)重要。在健康人群的研究中,采用非侵入性標(biāo)志物來(lái)識(shí)別有風(fēng)險(xiǎn)的患者是一種方便且有效的方法。目前,最常用的是胃蛋白酶原(PG)Ⅰ和PGⅡ。PG 分泌到胃腔中并且可以在血清中發(fā)現(xiàn),是胃黏膜終末分化的特定產(chǎn)物。隨著胃炎嚴(yán)重程度的增加,血清PGⅠ和PGⅡ水平升高,但是當(dāng)萎縮性改變發(fā)生在胃體時(shí),PGⅠ水平和PGⅠ/PGⅡ(PGR)降低。因此這些標(biāo)志物可以預(yù)測(cè)萎縮性胃炎、腸上皮化生和胃癌[6]。由于PG 水平會(huì)受到地域差異、飲食習(xí)慣及性別和年齡等因素的影響,不同地區(qū)的參考值范圍可能出現(xiàn)差異,所以不同地區(qū)建立獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室參考范圍具有重要的意義。本研究采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光法,對(duì)南京部分健康體檢人群血清PG 水平進(jìn)行檢測(cè),就PGⅠ、PGⅡ及PGR在不同性別和年齡段的表達(dá)水平進(jìn)行分析,為臨床進(jìn)一步研究提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年6月3日至2020年8月10日在南京市第一醫(yī)院體檢的4 192例健康者為研究對(duì)象。其中男2 519例,年齡20～92歲;女1 636例,年齡19～90歲。按照世界衛(wèi)生組織年齡劃分標(biāo)準(zhǔn),分為以下3個(gè)年齡段:19～<45歲、45～<60歲、60～90歲。排除標(biāo)準(zhǔn):患有急性或慢性感染、胃潰瘍、惡性腫瘤、胃炎、心血管疾病、肝臟疾病、肺部疾病、腎臟疾病或內(nèi)分泌疾病者。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與處理 所有體檢人群清晨空腹采集5.0 mL靜脈血至采血管中。室溫靜置后,離心、分離血清,2～8 ℃貯存或直接上機(jī)檢測(cè)。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查 血清PGⅠ、PGⅡ檢測(cè)采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光法,在南京市第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科的新產(chǎn)業(yè)生物公司MAGLUMI?X8儀器上進(jìn)行檢測(cè),試劑由新產(chǎn)業(yè)生物公司提供。PGⅠ試劑批號(hào)(09518090501、0951900101、0951900201、0951900301);PGⅡ試劑批號(hào)(0961900301、0961900201、0961900101、0961800101)。

1.2.3 參考區(qū)間的建立 依據(jù)CLSI C28-A3文件標(biāo)準(zhǔn)建立PG的參考區(qū)間。PGⅠ水平用第2.5個(gè)百分位數(shù)(P2.5)和第97.5個(gè)百分位數(shù)(P97.5)分別表示參考范圍的下限和上限;PGⅡ水平用第97.5個(gè)百分位數(shù)(P97.5)表示參考范圍的上限;PGR 用第2.5個(gè)百分位數(shù)(P2.5)表示參考范圍的下限。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用Kolmogorov-Smirnov法進(jìn)行正態(tài)性分析,非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用M(P2.5,P97.5)表示,組間比較Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。以P<0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PGⅠ、PGⅡ、PGR 在不同性別中的比較 男性PGⅠ、PGⅡ水平均高于女性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),女性PRG 高于男性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 不同性別血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 比較[M(P2.5,P97.5)]

2.2 PGⅠ、PGⅡ、PGR 在不同年齡段的差異比較 結(jié)果顯示,PGⅠ、PGⅡ水平隨著年齡的增加而增加(P<0.01),不受性別差異的影響;而PGR 則相反,隨著年齡的增加而降低。見(jiàn)表2。

表2 不同性別、年齡組血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 比較[M(P2.5,P97.5)]

2.3 不同性別、年齡組血清PGⅠ水平及PGⅡ、PGR的參考范圍 結(jié)果顯示,不同性別年齡組血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的參考范圍不同,見(jiàn)表3。

表3 不同性別、年齡組血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 參考范圍

續(xù)表3 不同性別、年齡組血清PGⅠ、PGⅡ水平、PGR 參考范圍

3 討論

胃癌是全球常見(jiàn)的惡性腫瘤,發(fā)病率和病死率均較高。由于其預(yù)后較差,晚期胃癌患者術(shù)后生存率低,對(duì)人類的健康造成了嚴(yán)重的威脅[7]。早期胃癌的臨床癥狀一般表現(xiàn)為非特異性或癥狀較輕,因此,僅通過(guò)臨床表現(xiàn)直接做出診斷難度較大,待患者就診時(shí),病變往往已處于中晚期。降低胃癌病死率的核心在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。目前,臨床上使用的早期胃癌篩查方法主要包括胃鏡活組織檢查和X 線鋇餐檢查,雖然診斷準(zhǔn)確率較高,但疼痛程度較大,因此不宜用于疾病篩查[8]。

天冬氨酸蛋白酶類是一種可由胃黏膜分泌的水解酶,其構(gòu)成了人PG的主要成分。一般由Ⅰ型(PGⅠ)和Ⅱ型(PGⅡ)兩種類型組成。PG 水平可直接反映胃黏膜的功能狀態(tài)與形態(tài),與胃部疾病的分類密切相關(guān)。PGⅠ水平降低與萎縮性胃炎的嚴(yán)重程度相關(guān),同時(shí)PGⅡ水平升高,PGR 也會(huì)降低[9-10]。此外,當(dāng)PGR 下降時(shí),胃癌的風(fēng)險(xiǎn)急劇上升[11]。基于以上病理學(xué)基礎(chǔ),部分研究充分肯定了PG 檢測(cè)在胃癌大規(guī)模篩查中的價(jià)值,并已在一些高流行地區(qū)成功實(shí)施了該檢測(cè),如東亞的日本和韓國(guó),相比之下,中國(guó)仍缺乏具體的胃癌篩查計(jì)劃[12]。萎縮性胃炎是公認(rèn)的腸型胃癌前體,通過(guò)檢測(cè)PGⅠ和PGR 診斷萎縮性胃炎具有重要的臨床意義。研究表明,不同的國(guó)家、地區(qū),性別、年齡、飲食習(xí)慣的差異,以及不同幽門螺桿菌的感染水平,其血清PG 水平都存在一定差異[13-14]。目前,PG的檢測(cè)方法較多,包括直接化學(xué)發(fā)光法、免疫熒光法、流式熒光法、免疫比濁法、放射免疫分析法等,由于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法不同,PG 水平也不同[15-16]。

本研究采用全自動(dòng)直接化學(xué)發(fā)光法對(duì)南京地區(qū)部分健康體檢人群PG的水平進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,男性PGⅠ、PGⅡ水平高于女性,而女性PGR 則高于男性,跟男女性在胃癌發(fā)病率上的差異相似,男性的PG水平可能受到生活習(xí)慣較差、飲食不規(guī)律、工作壓力大的影響,普遍比女性要高。同時(shí),隨著體檢人群年齡的增長(zhǎng),無(wú)論男性女性,PGⅠ、PGⅡ均出現(xiàn)上升趨勢(shì),而PGR 則呈現(xiàn)下降趨勢(shì),這與國(guó)內(nèi)外部分報(bào)道結(jié)果一致[17-18],原因可能為 PGⅠ的分泌部位主要在胃底主細(xì)胞和頸黏液細(xì)胞,而PGⅡ的分泌部位更廣泛,十二指腸、幽門等部位均可分泌,是整個(gè)胃部(即胃竇和胃體)炎癥的標(biāo)志物[19]。隨著年齡增長(zhǎng),健康人患慢性胃炎、萎縮性胃竇炎等胃部疾病的風(fēng)險(xiǎn)和發(fā)病率都有所上升,此時(shí) PGⅠ相應(yīng)升高,而PGⅡ的升高幅度更大,導(dǎo)致PGR 下降。同時(shí),幽門螺桿菌作為胃癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一,也能夠通過(guò)刺激胃竇內(nèi)的G 細(xì)胞增加胃泌素水平,進(jìn)而直接刺激PGⅠ和PGⅡ的合成與分泌。然而,隨著疾病的進(jìn)展,胃體細(xì)胞逐漸丟失,導(dǎo)致PGⅠ水平下降,而PGⅡ水平較高或保持穩(wěn)定,PGR 進(jìn)一步下降[20]。

本研究結(jié)果顯示,按照性別和年齡對(duì)PGⅠ和PGⅡ參考范圍進(jìn)行分析,在19～<45、45～<60、60～90歲這3個(gè)年齡段,男性PGⅠ參考范圍分別為60.26～153.04、54.33～190.10、40.86～219.87 μg/L,PGⅡ參考范圍分別為≤18.95、≤21.42、≤24.44 μg/L,PGR 參考范圍分別為≥6.23、≥5.31、≥5.02;女性PGⅠ參考范圍分別為52.95～143.44、51.21～148.91、41.82～226.34 μg/L,PGⅡ參考范圍分別≤18.29、≤19.45、≤23.59 μg/L,PGR 參考范圍分別為≥6.07、≥5.32、≥4.69。本研究結(jié)果與國(guó)外的研究結(jié)果有一定差異[21],可能與地區(qū)、檢測(cè)方法和樣本量不同有關(guān)。

本研究從健康體檢人群中抽取標(biāo)本,旨在探討性別與年齡這兩個(gè)影響因素對(duì)于PG 參考范圍的影響及不同水平的臨床意義。但種族、體表面積、吸煙、飲酒習(xí)慣、胃酸抑制史、幽門螺桿菌治療史等因素沒(méi)有排除。因此,進(jìn)一步的研究旨在探索PG 在胃部疾病不同病變程度上的變化情況,幽門螺桿菌陽(yáng)性對(duì)PG 水平的影響,以及PG 與幽門螺桿菌聯(lián)合檢測(cè)在胃癌風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)中的價(jià)值。同時(shí)本研究通過(guò)對(duì)南京地區(qū)健康體檢人群的PG 參考范圍進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)和國(guó)內(nèi)外的相關(guān)研究結(jié)果中存在一定差異的,說(shuō)明建立本地區(qū)不同檢測(cè)方法下的參考范圍具有極大的必要性。