中草藥益生菌復合物對雞免疫能力的影響

陳瀟飛，譚德俊，林先明，李 蓉，謝駿輝，艾倫強，王國貴，馬 進，向極釬，朱云芬

（1.恩施土家族苗族自治州農業科學院，湖北恩施 445000；2.湖北省農業科學院中藥材研究所，湖北恩施 445000）

抗生素在養殖過程中起到重要的作用，可以有效防治病菌感染，對微生物病原菌有高效的抑制作用［1］。養殖過程中抗生素被濫用的情況較為常見，較多的抗生素被用來促進飼料轉化率的提升，致使畜禽產品中抗生素含量超標，危害人類健康。從2020 年1 月1 日起，國家明令禁止在飼料中添加抗生素，對于動物性食品安全的改善起到關鍵的推進作用。國內畜禽養殖抗生素替代品的研究處于初步階段，尋求能控制成本、效果穩定、易于實施的替代抗生素新品，是畜牧從業者所關注的問題。中國傳統的中草藥在提升免疫、抗病殺菌等方面有著獨到的作用。中草藥具有減少病菌耐藥性、改善腸道菌群的特點［2，3］。作為天然植物源藥用資源，中草藥有效含量較低、作用機制復雜，制約著中草藥在無抗養殖中的研究應用。益生菌對于改善腸道菌群，提高微生物菌群多樣性，增強畜禽抗病能力也較為顯著［4］。本研究利用中草藥和益生菌在提升動物機體免疫方面的獨特優勢，結合不同的調控機制，對景陽雞實施無抗干涉試驗，為應用中草藥益生菌復合物促進動物機體免疫能力的提升提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

枯草芽孢桿菌（1010CFU/100g）由恩施清江生物工程有限公司提供，土霉素和試驗所需的中草藥由湖北元昌藥業有限公司提供。

景陽雞由湖北恩施建始縣景陽雞保種場提供，雞大小一致，30 日齡，共計180 羽。

1.2 試驗方法

試驗分為3 組，每組60 羽，分別為空白對照組、抗生素組和中草藥益生菌復合組（中益組）。中草藥、益生菌復合比例分組見表1。飼養方式為平養，飼養至180 日齡，每組隨機挑取6 羽，使用肝素鈉抗凝真空采血管頸靜脈采血，隨后進行血常規測定，同時分離出血清，進行免疫球蛋白G（IgG）、白細胞介素1（IL-1）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）等抗炎因子測定；采集胸腺、脾臟、法氏囊進行器官免疫指數測定。器官免疫指數為免疫器官的重量占體重的比例［5］。試驗期間所有試驗雞苗做好程序免疫，并進行系統飼養記錄。

表1 各組添加成分及比例

1.3 數據分析

采用SPSS18.0 軟件進行One-way ANOVA 顯著性分析，采用LSD 法進行多重比較。統計結果采用“平均值±標準差”（Mean±SD）的形式表示，以P<0.05 作為差異顯著性判斷標準，P<0.01 作為差異極顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 組間成活率的比較

根據飼養記錄，飼養180 d 后成活率如圖1 所示，中益組88.33%>抗生素組83.33%>空白對照組78.33%。

圖1 組間成活率的比較

2.2 器官免疫指數的比較

中草藥益生菌復合物對景陽雞免疫器官的發育起一定作用（表2），主要表現在法氏囊指數上，中益組和抗生素組法氏囊指數均高于對照組，中益組與抗生素組無顯著性差異（P>0.05）；在脾臟指數上，中益組與對照組存在顯著性差異（P<0.05）；三者在胸腺指數上無顯著性差異（P>0.05）。

表2 各組免疫器官的重量及免疫指數

2.3 血常規指標的比較

血常規指標見表3，中益組、抗生素組與對照組間白細胞數無明顯差異（P>0.05）；中益組、抗生素組均與對照組紅細胞數存在顯著差異（P<0.05）；中益組與抗生素組、對照組血紅蛋白差異顯著（P<0.05）；三者間血小板數無顯著性差異（P>0.05）。

表3 各組血常規指標測定結果

2.4 抗炎因子及抗氧化性能的比較

抗炎因子及抗氧化性能的比較見表4，組間差異極顯著（P<0.01），抗炎因子檢測結果顯示，中益組含量均顯著高于抗生素組（P<0.01）。圖2 直觀地顯示出該種差異。

圖2 IgG、IL-1、SOD、GSH-px 含量測定結果

表4 各組血清抗炎因子測定結果 （單位：μg/mL）

3 小結與討論

中草藥益生菌復合物作為飼料添加劑應用在景陽雞無抗養殖中，能不同程度地提高景陽雞成活率，促進免疫器官發育，增強其抗炎和抗氧化能力，可以全面提升景陽雞的免疫能力。

3.1 中草藥益生菌復合物對景陽雞成活率的影響

中草藥提高動物機體抗病能力的研究較多，其作用機理主要集中在抗病毒、殺菌、增強自身體液免疫和細胞免疫［6］，直接反映的結果就是動物成活率的提高。益生菌對改善動物腸道健康，提升動物免疫能力效果較為顯著。本研究中，飼喂中草藥益生菌復合組景陽雞的成活率高于抗生素組和對照組，吳詩樵等［7］在對揚州鵝飼喂研究中使用中草藥飼料添加劑，顯著提高了揚州鵝的成活率，本研究的結果與之相符。中草藥益生菌的配合組方在本試驗中對提升景陽雞的成活效果顯著。

3.2 中草藥益生菌復合物對景陽雞器官免疫指數的影響

脾臟是最大的外周免疫器官，當動物機體發生免疫應答時，能夠參與吞噬病原菌，同時脾臟還是體液免疫和細胞免疫的應答場所［8］。胸腺和法氏囊是重要的中樞免疫器官，而法氏囊屬于禽類特有器官，能夠分化產生淋巴細胞［9，10］。脾臟、胸腺和法氏囊的發育狀況能夠直接反映出動物機體免疫狀況，免疫器官指數的高低決定了淋巴細胞的增值能力，機體免疫功能在一定范圍內與器官指數呈正相關［11］。本研究中，中益組法氏囊指數高于對照組，與抗生素組相當（P<0.05），表明中草藥和益生菌復合能夠誘導禽類法氏囊發育，增強景陽雞的免疫能力。

3.3 中草藥益生菌復合物對景陽雞血常規指標的影響

血常規指標反映了血液中細胞水平的變化。當抗原入侵后，抗原通過組織黏膜表面的M 細胞以胞飲方式進入細胞后對紅細胞進行分解破壞，致使紅細胞數量減少［12］，機體發生免疫應答，刺激白細胞數急劇增多，吞噬病原菌維護機體的免疫平衡。趙德建［13］在研究小鼠沙門氏菌攻毒試驗中發現，攻毒后小鼠紅細胞數減少，白細胞數增多，進行中藥復方干涉后，紅細胞數量逐漸恢復。這與本試驗結果相似，景陽雞疫苗免疫后發生炎癥反應，白細胞數增多，通過中草藥益生菌調節，細胞免疫應答，抑制抗原激增，防止紅細胞數下降。

3.4 中草藥益生菌復合物對景陽雞抗炎因子及酶活性的影響

機體在代謝過程中會生成多種自由基，誘發脂質過氧化反應，致使細胞發生氧化應激損傷［14］。而動物機體內存在的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶可以清除體內過多的自由基，維持自由基代謝平衡，修復氧化損傷。免疫球蛋白是受抗原刺激后由B 細胞分泌的能與對應抗原結合的球蛋白，是參與體液調節的重要成分［15］。白細胞介素1 參與免疫調節，刺激T 細胞活化促進B 細胞增殖并促使抗體產生，反映了機體的抗炎能力［16］。研究顯示，中益組IgG、IL-1、SOD、GSH-px 含量均極顯著高于對照組和抗生素組（P<0.01）。研究表明，添加中草藥和益生菌的復合物后，景陽雞的抗氧化能力顯著增強，體液免疫水平顯著升高，機體抗炎能力得到明顯加強。