猴頭菇菌株菌絲生長特性及栽培研究

蘇文英紀(jì)偉劉曉梅蘇文凈梁長東秦裕營任立凱

(1.連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，江蘇 連云港 222006；2.江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，江蘇 連云港 222000)

猴頭菇(Hericium erinaceus)是我國著名的食藥用菌，因子實(shí)體布滿針狀肉刺，形似猴頭而出名，分類地位隸屬于擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、傘菌綱(Agaricomycete)、多孔菌目(Polyporales)、齒菌科(Hydnaceae)、猴頭菌屬(He ricium)，是著名的食藥用菌,其在自然界分布廣泛，主要分布于歐洲、亞洲及北美等地[1]。在我國，主要分布在天山、阿爾泰山、大興安嶺，在黑龍江、湖北、四川、河北、河南、內(nèi)蒙古等地區(qū)也有生長，其中，黑龍江海林市被稱為“猴頭菇之鄉(xiāng)”。猴頭菇作為著名的藥食兼用菌在我國有著悠久的歷史，《本草綱目》、《飲膳正要》對(duì)其藥用價(jià)值有明確記載：性平，味甘，利五臟，助消化[2]。研究發(fā)現(xiàn)，猴頭菇菌絲體和子實(shí)體中含有諸多活性成分，如多糖、蛋白、酚類、萜類、多肽、脂肪酸等化合物[3]，具有抗腫瘤[4]、抗氧化[5]、降血糖[6]、保護(hù)胃黏膜[7]等生理功效。猴頭菇的菌絲及子實(shí)體均可入藥，能提高人體免疫力，對(duì)慢性胃炎、消化不良、胃潰瘍、食管癌、胃癌、十二指腸癌等各種消化系統(tǒng)疾病有較好的療效。猴頭菇屬于腐生型食用菌,我國1959年人工栽培研究成功，到目前猴頭菇已是我國重要的栽培食用菌。隨著人們生活水平及對(duì)猴頭菇保健功效認(rèn)知的提高，猴頭菇的市場(chǎng)需求量逐漸增加，在1979年，我國的猴頭菇產(chǎn)量就己經(jīng)位居世界之首，產(chǎn)品暢銷全國，并遠(yuǎn)銷美國、日本、新加坡等地[8]。

連云港市土地肥沃，農(nóng)業(yè)資源豐富，其中食用菌產(chǎn)業(yè)的聚集度、規(guī)模和鮮菇日產(chǎn)量在全國處于領(lǐng)先水平。近年來，連云港市高度重視食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展，將其作為優(yōu)化產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)、促進(jìn)農(nóng)民增收的重要抓手，積極引導(dǎo)，重點(diǎn)扶持，食用菌產(chǎn)業(yè)已經(jīng)成為連云港市主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)之一。但目前連云港食用菌產(chǎn)業(yè)面臨的一個(gè)重大問題為產(chǎn)品同質(zhì)化嚴(yán)重。杏鮑菇、金針菇、雙孢蘑菇是產(chǎn)能最大、工廠化栽培水平最高的3種菇類。在連云港全市食用菌企業(yè)及合作社中，杏鮑菇企業(yè)占80%以上，導(dǎo)致各企業(yè)相互壓價(jià)，同時(shí)也影響了連云港食用菌在全國市場(chǎng)的競(jìng)爭力[9]。因此，根據(jù)目前市場(chǎng)供求關(guān)系，適度引進(jìn)發(fā)展珍稀名貴食用菌，如猴頭菇、羊肚菌、大球蓋菇等，增加珍稀類食用菌產(chǎn)品市場(chǎng)供應(yīng)，對(duì)豐富連云港地區(qū)食用菌種植資源，提高連云港地區(qū)食用菌產(chǎn)業(yè)應(yīng)對(duì)風(fēng)險(xiǎn)能力，穩(wěn)定農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有重要意義。本研究通過平板培養(yǎng)法、菌絲爬料試驗(yàn)及栽培試驗(yàn)對(duì)14株供試猴頭菇栽培菌株的菌絲生長特性及子實(shí)體農(nóng)藝性狀進(jìn)行研究，以期篩選出適合本地栽培的優(yōu)良菌種，為連云港市食用菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供優(yōu)良菌種資源。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試猴頭菇材料來源見表1，14株猴頭菇菌株目前保藏于連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院。

表1 猴頭菇供試材料

1.2 培養(yǎng)基配方

1.2.1 MYG固體培養(yǎng)基

麥芽糖10g，葡萄糖及酵母浸粉各5g，瓊脂粉15g，pH值自然，加水定容至1L，121℃高壓滅菌30min。

1.2.2 MYG液體培養(yǎng)基

麥芽糖10g，葡萄糖及酵母浸粉各5g，pH值自然，加水定容至1L，每500mL搖瓶分裝液體培養(yǎng)基200mL，121℃高壓滅菌30min。

1.2.3 菌絲爬料培養(yǎng)基

木屑40%、棉籽殼40%、麥麩18%、蔗糖1%、石膏粉1%。

1.2.4 猴頭菇栽培基質(zhì)

同菌絲爬料培養(yǎng)基。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菌絲生長特性測(cè)定

將14株猴頭菇菌株分別轉(zhuǎn)接至MYG固體培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng)7～10d。用直徑8mm的打孔器在活化后的菌種菌落邊緣取接種塊分別接種在90mm平板中央，每個(gè)菌種5個(gè)重復(fù)，接種后置于培養(yǎng)箱中25℃黑暗培養(yǎng)。當(dāng)菌絲長至培養(yǎng)皿邊緣時(shí)，在平板背面以接種點(diǎn)為中心采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，觀察并記錄菌絲顏色、菌絲均勻度、密度等長勢(shì)情況，計(jì)算菌絲生長速率。

1.3.2 菌絲爬料速率比較

將猴頭菇栽培料拌勻后裝入尺寸20mm×200mm試管中，每管裝料高度為160mm，用封口膜將試管封好后121℃高壓滅菌2h。每個(gè)試管分別均勻接種1塊直徑16mm的菌塊，試驗(yàn)設(shè)5組重復(fù)，放于25℃培養(yǎng)，記錄供試菌株爬料情況，并計(jì)算菌絲生長速率。

1.3.3 菌絲長勢(shì)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

菌絲長勢(shì)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，5分：菌絲長勢(shì)濃密，均勻；4分：菌絲長勢(shì)濃密，較均勻；3分：菌絲長勢(shì)較濃密，較均勻；2分：菌絲長勢(shì)較稀疏，較均勻；1分：菌絲長勢(shì)稀疏，不均勻。

1.3.4 菌絲生長指數(shù)[10]

菌絲生長指數(shù)的計(jì)算公式：

I=N×V

(1)

式中，N表示菌落長勢(shì)評(píng)分；V表示菌絲生長速率，cm·d-1。

1.3.5 栽培試驗(yàn)

猴頭菇栽培基質(zhì)按照栽培種的配方配制，將配制好的栽培料裝入尺寸為17.5cm×35cm的聚丙烯塑料袋中。每袋干重約0.45kg，裝袋后套緊頸圈，使料面緊貼栽培袋，每個(gè)菌株接種50袋，裝袋完畢后置于高壓滅菌鍋中121℃滅菌2h。滅菌結(jié)束后，將菌包推入冷卻室冷卻，冷卻后在超凈工作臺(tái)下將培養(yǎng)好的液體培養(yǎng)基接至栽培袋中，放入培養(yǎng)室23～25℃黑暗培養(yǎng)。控制培養(yǎng)室相對(duì)濕度在65%以下，CO2濃度低于4‰。菌絲長滿后，將菌袋移入出菇房，去掉蓋子，調(diào)整出菇房溫度至15～17℃，相對(duì)濕度95%；原基形成后，控制出菇房溫度至14～15℃，相對(duì)濕度為90%～95%，保持CO2濃度0.08%以下，每天光照5h，強(qiáng)度50～100lx；菌刺形成后，出菇房溫度調(diào)整至12～14℃，濕度降低到85%～90%，CO2濃度低于0.08%，強(qiáng)度50～100lx；菌絲滿袋10d左右即可采收第1潮菇。詳細(xì)出菇管理辦法參照李玉等[11]。采收后，觀察并記錄子實(shí)體形狀、顏色及產(chǎn)量等農(nóng)藝學(xué)性狀，并計(jì)算生物學(xué)效率。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2021及SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同猴頭菇菌株菌絲生長情況

14株供試猴頭菌株菌絲生長情況見表2。不同品種猴頭菇菌絲在培養(yǎng)平板上的菌絲生長速率、菌絲密度不同，綜合發(fā)現(xiàn)4號(hào)“920”及10號(hào)“大猴頭”的菌絲生長速度最快，為0.594cm·d-1，其次為14號(hào)“猴王”，為0.558cm·d-1；11號(hào)菌株“猴頭49”在培養(yǎng)平板上生長速率較慢，為0.355cm·d-1。各菌株的菌落顏色可分白色、淡黃和黃褐色3類，其中，2號(hào)“4916”及13號(hào)“猴頭6號(hào)”的菌落顏色為黃褐色，9號(hào)“常山猴頭”、11號(hào)“猴頭49”及12號(hào)“京3”的菌落顏色為淡黃色，其他菌株的菌落顏色為白色。各菌株的菌絲密度差異也較為顯著，其中3號(hào)“4903”、4號(hào)“920”及14號(hào)“猴王”的菌絲濃密且均勻，11號(hào)“猴頭49”及13號(hào)“猴頭6號(hào)”的菌絲較為稀疏且不均勻。

14株供試菌株平板培養(yǎng)菌絲生長指數(shù)見圖1。4號(hào)“920”菌絲生長指數(shù)最高，為2.97，14號(hào)“猴王”次之，為2.79，10號(hào)“大猴頭”雖然菌絲生長速度較快，但因?yàn)榫z不夠濃密，菌絲長勢(shì)評(píng)分只有4分，生長指數(shù)為2.37。11號(hào)“猴頭49”生長指數(shù)最低，僅為0.36。

表2 供試菌株菌絲生長情況

圖1 供試菌株菌絲生長指數(shù)

2.2 不同猴頭菇菌株菌絲爬料速率比較

菌絲爬料試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，14株猴頭菇菌株在栽培基質(zhì)上的吃料速率各不相同，見表3，通過分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，各猴頭菇菌株的菌絲滿袋時(shí)間為39.6～52.4d，其中，3號(hào)“4903”菌株滿袋時(shí)間最短，吃料速率最快，為0.404cm·d-1；其次為4號(hào)“920”、10號(hào)“大猴頭”、12號(hào)“京3”、11號(hào)“猴頭49”，吃料速率在0.400～0.403cm·d-1；6號(hào)“Xy-1”菌絲滿袋時(shí)間最長，為52.4d，吃料速率僅為0.308cm·d-1。

2.3 不同猴頭菇菌株出菇試驗(yàn)結(jié)果

出菇試驗(yàn)結(jié)果見表4。從表4可知，14株供試菌

表3 供試菌株在栽培基質(zhì)中的生長差異

株子實(shí)體顏色均為白色。除1號(hào)“長刺”、7號(hào)“猴1119”、8號(hào)“BJ-5”及13號(hào)“猴頭6號(hào)”子實(shí)體較為松散，呈花椰型外，其他菌株的菇型均為緊實(shí)或較緊實(shí)；4號(hào)“920”、9號(hào)“常山猴頭”、10號(hào)“大猴頭”及14號(hào)“猴王”的子實(shí)體個(gè)體較大，其中，“常山猴頭”菌株的平均單菇產(chǎn)量為202g，生物轉(zhuǎn)化率為44.8%；“大猴頭”的菌刺粗且短，菇體緊實(shí)，平均單菇產(chǎn)量為188g，生物轉(zhuǎn)化率為41.7%。此外，在子實(shí)體形成過程中，發(fā)現(xiàn)各個(gè)菌株原基形成的時(shí)間也各不相同，其中“4903”從接種到原基形成僅需21d，除4號(hào)“920”、5號(hào)“魯猴1號(hào)”、7號(hào)“猴1119”、12號(hào)“京3”及13號(hào)“猴頭6號(hào)”這6株菌株原基形成較晚外，其余菌株原基形成均在23～25d。

表4 供試菌株栽培特性比較

3 討論

菌絲的生長特性是食用菌菌種評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)之一，菌絲潔白濃密、生長勢(shì)強(qiáng)、生長速度快是食用菌獲得高產(chǎn)的基礎(chǔ)，因此對(duì)食用菌菌絲生長特性評(píng)價(jià)對(duì)篩選優(yōu)良食用菌品種具有重要意義[12,13]。通過對(duì)14個(gè)猴頭菇菌株進(jìn)行菌絲培養(yǎng)試驗(yàn)及爬料試驗(yàn)表明，菌株“920”及“大猴頭”在PDA培養(yǎng)基上菌絲生長速度最快，“猴頭49”菌絲生長速率最慢，而在爬料試驗(yàn)中菌株“920”、“大猴頭”、“4903”及“猴頭49”速度相對(duì)較快，差異不顯著。有研究表明，菌絲生長速率的快慢和菌絲生長勢(shì)的強(qiáng)弱間無直接關(guān)系[14]。在本試驗(yàn)中，菌絲生長速率最快的為“920”和“大猴頭”，但“920”菌絲長勢(shì)評(píng)分為5分，“大猴頭”只有4分；“4903”菌絲長勢(shì)評(píng)分為5分，但其菌絲生長速率相對(duì)較慢，僅為0.395cm·d-1。

雖然菌絲生長特性的強(qiáng)弱可以衡量一個(gè)菌株的好壞，但還應(yīng)考慮生育期長短、原基形成時(shí)間、子實(shí)體的產(chǎn)量、性狀和生物學(xué)效率等因素。權(quán)新華[15]等研究表明，猴頭菇菌絲生長速度與產(chǎn)量之間不具有相關(guān)性，菌絲生長速度較慢的菌株，產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率最高。本研究中，“常山猴頭”菌絲生長速率不是最快的，但其產(chǎn)量最高；“920”菌絲生長速率最快，但其產(chǎn)量不是最高的；“4903”原基形成最早，但其菌絲生長速度中等，單菇產(chǎn)量較低。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，優(yōu)良菌株的篩選需綜合考慮菌株的各個(gè)性狀。本研究通過綜合比較14株猴頭菇菌株的菌絲生長特性及栽培性狀發(fā)現(xiàn)，菌株“920”、“大猴頭”、“常山猴頭”及“猴王”這4株菌株明顯優(yōu)于其他菌株，可作為優(yōu)良猴頭菇品種進(jìn)行推廣栽培。