失眠患者烏梅丸加減方口服后睡眠質量及腸道菌群變化

朱曉松，彭善鑫，左志文，孫志清，李玲，卓鳳娟

1 山東大學附屬臨沂市人民醫院醫院感染管理部，山東 臨沂 276000；2 山東大學附屬臨沂市人民醫院中醫科

失眠是一種常見的睡眠障礙疾病，臨床表現為入睡困難、睡眠質量下降、睡眠時間減少以及記憶力、注意力下降等，其發病率較高［1］。隨著人們生活節奏的加快和工作壓力的增加，失眠不再僅僅發生于成年人，青少年失眠的比例也越來越高［2］。長期失眠容易誘發抑郁、焦慮等情緒，還會導致免疫力減退、認知能力下降，嚴重影響患者的身心健康［3］。目前臨床治療失眠的常用藥物為鎮靜催眠類藥物，雖然可以有效治療失眠，但會導致頭暈、嗜睡、停藥戒斷反應等［4］。因此，臨床上亟需尋找安全、有效的失眠治療藥物。烏梅丸源自《傷寒論》，是寒熱錯雜、上寒下熱、厥陰證、失眠的常用方劑［5］。陸紅梅等［6］發現，烏梅丸能溫補肝陽、清虛熱，用于治療失眠療效顯著。也有研究表明，失眠與腸道菌群紊亂密切相關［7］。本研究觀察了烏梅丸加減方口服治療失眠的臨床療效，同時探討其對患者腸道菌群的影響。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2020 年1 月—6 月臨沂市人民醫院就診的失眠患者12 例，均符合《中國成人失眠診斷與治療指南》［8］中失眠的診斷標準和《中醫內科常見病診療指南（中醫病癥部分）》［9］中不寐（厥陰證）的診斷標準。排除標準：①合并血液病、糖尿病、腎功能衰竭、心力衰竭、感染性疾病者；②伴有重大軀體疾病者；③行放、化療者；④近2 周內服用過菌群調節劑、抗生素、免疫調節劑和糖皮質激素者。12例患者中男3 例、女9 例，年齡（44.3 ± 7.2）歲。本研究通過臨沂市人民醫院醫學倫理委員會批準（批準號：YX15001），研究對象均簽署知情同意書。

1.2 治療方法 患者入組后口服烏梅丸加減方，方藥組成：烏梅30 g，附子6 g，細辛6 g，桂枝6 g，花椒4 g，干姜6 g，當歸10 g，黨參10 g，黃連10 g，黃柏6 g，麥冬30g。所有中藥來自臨沂市人民醫院中藥房，水煎200 mL，每日1付，療程1周。

1.3 療效相關指標觀察方法

1.3.1 睡眠質量 采用匹茲堡睡眠質量評估量表（PSQI）評價患者治療前后的睡眠質量，該量表包括睡眠質量、睡眠時間、入睡時間、睡眠障礙、睡眠效率、催眠藥物、功能障礙共7 個方面，每個方面計0～3 分，共21 分，分數越高提示睡眠質量越差。

1.3.2 臨床療效 利用PSQI療效指數標準評價臨床療效，療效指數≥75%為痊愈、50%～＜75%為顯效、25%～＜50%為有效、＜25%為無效，以痊愈、顯效、有效的例數計算總有效率。

1.3.3 中醫癥候積分 參照《中醫內科常見病診療指南（中醫病癥部分）》［10］制定中醫證候積分量表，患者治療前后分別對不寐主證和次證進行中醫證候評分，按照每種證候輕、中、重級別分別計1、2、3 分，分數越高提示臨床癥狀越明顯。

1.4 腸道菌群豐度檢測方法 采用高通量測序法。收集患者治療前后的新鮮糞便，挑取內層糞便，每份標本重量至少1 g，標本采集后立即冷凍，送高通量測序服務公司（蘇州金唯智生物科技有限公司）進行檢測。對糞便樣本基因組DNA 進行提取與質檢，隨后進行16S rDNA 可變區擴增與測序文庫構建，最后行高通量測序。記錄α 多樣性相關指標（ACE 指數、Chao1 指數、Shannon 指數、Simpson指數）及門水平、屬水平上的腸道菌群豐度。ACE和Chao1 屬于豐度指數，數值越大說明群落豐富度越高；Shannon 指數是群落多樣性指數，數值越大說明群落多樣性越高；Simpson 指數與上述指數意義相反。

1.5 統計學方法 采用SPSS18.0 統計軟件。計量資料采用偏度—峰度正態性檢驗，呈正態分布以±s表示，結果比較采用t檢驗；非正態分布以M（P25，P75）表示，結果比較采用秩和檢驗。計數資料以n（%）表示，結果比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 患者治療前后PSQI 評分比較 與治療前比較，患者治療后PSQI中睡眠質量、睡眠時間、入睡時間、睡眠障礙、睡眠效率、催眠藥物評分及總分均降低（P均＜0.05），而功能障礙評分無明顯變化（P＞0.05）。見表1。

表1 患者治療前后PSQI各方面評分及總分比較（分，±s）

表1 患者治療前后PSQI各方面評分及總分比較（分，±s）

注：與治療前比較，*P＜0.05。

觀察時間治療前治療后n 12 12睡眠質量2.33±0.49 1.25±0.62*睡眠時間2.25±0.45 1.17±0.39*入睡時間2.33±0.49 0.92±0.51*睡眠障礙2.42±0.51 1.42±0.53*睡眠效率2.17±0.72 1.00±0.60*催眠藥物1.33±0.49 0.50±0.52*功能障礙1.50±0.67 0.75±0.62總分14.33±1.07 7.00±1.81*

2.2 臨床療效評價結果 患者治療后痊愈1例、顯效7例、有效3例、無效1例，總有效率91.67%（11/12）。

2.3 患者治療前后中醫證候積分比較 患者治療前后中醫證候積分分別為（18.17±2.66）、（12.08±2.57）分，二者比較P＜0.05。

2.4 患者治療前后腸道菌群豐度比較

2.4.1 α 多樣性相關指標 見表2。

表2 患者治療前后α多樣性相關指標比較（±s）

表2 患者治療前后α多樣性相關指標比較（±s）

注：與治療前比較，*P＜0.05。

觀察時間治療前治療后n 12 12 ACE指數112.02±21.75 129.05±11.94*Chao1指數106.16±19.81 122.48±14.88*Shannon指數3.91±0.54 4.21±0.58 Simpson指數0.91±0.04 0.83±0.06*

2.4.2 門水平腸道菌群豐度 見表3、OSID 碼圖1。

表3 患者治療前后門水平腸道菌群豐度比較［%，±s/M（P25，P75）］

表3 患者治療前后門水平腸道菌群豐度比較［%，±s/M（P25，P75）］

注：與治療前比較，*P＜0.05。

觀察時間治療前治療后n 12 12厚壁菌門30.97±10.73 41.85±10.41*擬桿菌門56.55±12.30 46.82±15.33*變形菌門4.84± 3.06 12.77±10.27*放線菌門3.19（1.45，10.95）0.14（0.04，2.29）梭桿菌門0（0，2.59）0（0，0.15）藍菌門0（0，0.01）0疣微菌門0（0，0.01）0軟壁菌門0（0，0.03）0迷蹤菌門0 0

2.4.3 屬水平腸道菌群豐度 共檢測出113 個菌屬，其中普雷沃菌屬、擬桿菌屬、巨單胞菌屬、糞桿菌屬、雙歧桿菌屬和毛螺菌屬為高豐度物種。與治療前比較，患者治療后擬桿菌屬和糞桿菌屬菌群豐度均下降，普雷沃菌屬、巨單胞菌屬、雙歧桿菌屬和毛螺菌屬菌群豐度均升高（P均＜0.05）。見表4、OSID碼圖2。

表4 患者治療前后屬水平腸道菌群豐度比較（%，±s）

表4 患者治療前后屬水平腸道菌群豐度比較（%，±s）

注：與治療前比較，*P＜0.05。

觀察時間治療前治療后n 12 12普雷沃菌屬9.79± 6.34 24.33±12.29*擬桿菌屬34.62±16.85 17.16±10.78*巨單胞菌屬6.32±4.11 16.52±8.37*糞桿菌屬15.25±6.27 5.44±3.20*雙歧桿菌屬3.07±3.77 10.61±5.63*毛螺菌屬2.56±2.45 6.57±5.17*

3 討論

長期失眠嚴重影響著患者的身心健康，因此需及時采取措施來改善患者的睡眠質量，進而提高其生活質量。中醫將失眠歸為“不寐”范疇，中醫學家發現厥陰論在失眠治療過程中療效顯著，厥陰失眠的發病機制為腎陽不足、肝失條達、郁而化熱、上擾心神［10］。烏梅丸是《傷寒論》中的厥陰病代表方，其用藥以溫腎、達肝、瀉心為主，兼調中焦脾胃，治療失眠效果顯著［11］。烏梅丸加減方包括烏梅、干姜、細辛、黃柏、花椒、附子、黃連、黨參、當歸、桂枝、麥冬共十一味藥，其中細辛以及干姜、附子等溫下驅寒，黨參和當歸益氣養血，以辛甘之品以助復陽，清中焦之火有黃連；全方酸苦辛甘藥味俱全，寒溫之功兼用，下溫肝腎，上清郁熱，兼溫中土。本研究結果顯示，患者經烏梅丸加減方治療后PSQI 評分和中醫證候積分均得到明顯改善，總有效率為91.67%，說明烏梅丸加減方可有效改善失眠患者的睡眠質量。

腸道菌群是維持人體生理功能的重要組成部分，不僅可以影響腸道生理，還可以影響中樞神經系統。研究發現，腸道菌群可能是睡眠機制的關鍵調節者［12］。睡眠障礙可影響腸道菌群晝夜節律，從而改變腸道菌群豐度，導致菌群失調［13］。《素問·逆調論篇》中提到“胃不和則臥不安”，胃腸道功能紊亂會影響腦功能，導致失眠的發生，這也說明中醫學早已認識到胃腸道功能與睡眠障礙之間的密切關系。研究表明，烏梅丸可通過改善腸道菌群紊亂治療2 型糖尿病和潰瘍性結腸炎［14］。本研究結果顯示，失眠患者經烏梅丸加減方治療后ACE 指數、Chao1 指數均增高，Simpson 指數降低，說明烏梅丸加減方可升高失眠患者的腸道菌群豐度和多樣性。

腸道菌群組成復雜，主要包括厚壁菌門和擬桿菌門，占整個菌群的95%以上，此外還包括變形菌門、放線菌門、梭桿菌門和疣微菌門等，它們在維護腸道功能方面發揮著重要作用［16］。正常情況下，腸道菌群之間保持著平衡，對腸道黏膜免疫功能有重要作用。當菌群之間的平衡受到破壞，會導致有害菌增多，腸道屏障功能破壞、通透性增加，進而損傷機體免疫功能，更易發生疾病［7］。本研究結果顯示，失眠患者烏梅丸加減方治療后擬桿菌門、放線菌門、擬桿菌屬和糞桿菌屬菌群豐度顯著下降，而厚壁菌門、變形菌門、普雷沃菌屬、巨單胞菌屬、雙歧桿菌屬和毛螺菌屬菌群豐度顯著升高，說明烏梅丸加減方有效調整了失眠患者的腸道菌群結構。

綜上所述，烏梅丸加減方可顯著提高失眠患者的睡眠質量，改善失眠癥狀，其作用機制可能與改善腸道菌群豐度和多樣性有關，但腸道菌群參與改善睡眠的具體通路及機制仍需大量研究加以證實。