邁瑞CAL-8000 血細胞分析流水線的性能驗證

張云霞，宗健敏

南京市職業病防治院 （江蘇南京 210042）

自動化流水線是近年來臨床檢驗醫學專業涌現的新技術，其應用極大地提高了檢驗工作的效率與質量。為了保證檢驗儀器正常、準確地出具檢驗報告，除需定期對檢驗儀器進行校準外，針對以下情況，還需對儀器進行性能驗證[1]：（1）使用新的檢測試劑或系統；（2）更換檢測試劑或系統；（3）檢測試劑或系統出現重大改變，如儀器故障維修后、試劑制備用原材料來源改變等。本實驗室于2020年12月新引進了一臺深圳邁瑞CAL-8000血細胞分析流水線，為保證出具檢驗結果的穩定性與可信性，現依照原中華人民共和國衛生部頒發的WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》行業標準，對流水線中BC-6800Plus1（以下簡稱P1）和BC-6800Plus2（以下簡稱P2）兩臺全自動血細胞分析儀的本底計數、攜帶污染率、批內精密度、日間精密度、線性范圍、正確度、不同吸樣模式的結果可比性、實驗室內結果的可比性、參考區間9個項目進行評價，評價內容包括白細胞（white blood cell，WBC）、紅細胞（red blood cell，RBC）、血紅蛋白（hemoglobin，HGB）、血細胞比容（haematocrit，HCT）、血小板（platelet，PLT）、平均紅細胞體積（mean corpuscular volume，MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC），現報道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本與試劑

取2021年1—2月本院患者的新鮮乙二胺四乙酸二鉀（ethylenediamine tetraacetic acid dipotassium salt，EDTA-K2）抗凝血及配套深圳邁瑞低、中值質控物（批號：MB0121AL，MB0121AN）。

1.2 儀器與試劑

深圳邁瑞BC-6800Plus全自動血細胞分析儀及配套試劑DS稀釋液（批號：2020111204），M-68P DR稀釋液（批號：2020110904），M-68P LH溶血劑（批號：2020110319），M-68P LN溶血劑（批號：2020111814），M-68P LD溶血劑（批號：2020110315），M-68P FN染色液（批號：2020120802），M-68P FD染色液（批號：2020120402），M-68P FR染色液（批號：2020120304）；日本SYSMEX XT-4000i血細胞分析儀及配套試劑PK-30L（批號：G0061），FFS-800A白細胞分類染色液（批號：A0020），SLS-220A血紅蛋白溶血素（批號：A0005），FFD-200A白細胞分類溶血素（批號：R0514），FBA-200A嗜堿性粒細胞溶血素（批號：R0506）；日本SYSMEX XT-4000i血細胞分析儀配套質控物（批號：03270810，03270811）。

1.3 各項目的驗證方法

1.3.1 本底計數

血細胞分析儀P1與P2正常開機進行自動沖洗維護后，以稀釋液作為空白樣本分別對P1與P2進行連續3次的空白計數，3次結果的最大值不應超過規定的判定標準，以此評價儀器開機的狀態是否可以正常進行樣本檢測。

1.3.2 攜帶污染率

取高濃度血液樣本，混合均勻后采用手動進樣模式連續測定3次，測定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液樣本，混合均勻后采用手動進樣模式連續測定3次，測定值分別為L1、L2、L3；按公式攜帶污染率（%）=（L1-L3）/（H3-L3）×100%計算攜帶污染率，要求各參數的攜帶污染率均在機型標示的范圍內（各參數的攜帶污染率均≤1.0%），若未達到要求，則不能繼續進行后續實驗，須售后服務工程師檢修合格后，方可重新進行實驗。

1.3.3 批內精密度

根據WS/T 406-2012文件，取低、中、高3個水平的新鮮血，連續重復測定11次，對后10次結果進行統計，計算變異系數（coefficient of variance，CV）。

1.3.4 日間精密度

分別對2021年1—2月P1和P2兩臺儀器的各20份低值質控結果和中值質控結果進行分析，以CV作為評價指標。

1.3.5 線性范圍

取1份接近預期上限的高值全血樣本（H），分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例進行稀釋，對每個稀釋度重復測定3次，計算平均值；將實測值與理論值作比較（偏離應＜10%），得到y=ax+ b，驗證線性范圍。

1.3.6 正確度

根據WS/T 406-2012文件，至少使用10份檢測結果在參考區間內的新鮮血樣本，對每份樣本重復檢測2次，計算20次及以上檢測結果的平均值，并以本實驗室內部規范操作檢測系統（使用配套試劑、用配套校準物定期進行儀器校準、儀器性能良好、規范地開展室內質量控制、參加室間質量評價成績優良、檢測程序規范、人員經過良好培訓的檢測系統）SYSMEX XT-4000i 為靶機，所測定平均值為標準，計算偏倚。

1.3.7 不同吸樣模式的結果可比性

取5份臨床樣本，分別以自動全血模式和開放全血模式對其進行檢測，即每份樣本均檢測2次，并分別計算兩種模式下檢測結果平均值間的相對偏差。

1.3.8 實驗室內結果的可比性

準備20份新鮮血樣本，濃度應符合WS/T 406-2012規定，并確保整個實驗在樣本老化前完成；在基準儀器和比對儀器上對以上樣本進行檢測，以基準儀器的測定結果為標準，計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合要求的比例為≥80%。

1.3.9 參考區間

分別收集20份健康男性和20份健康女性的樣本，連續上機進行測定，測定后所有參數中超出參考區間范圍的個數應不超過2個。

1.4 統計學處理

采用Microsoft Office Excel 2007對數據進行處理分析。

2 結果

2.1 本底計數

兩臺儀器各參數的本底計數均在判定標準范圍內，滿足判定標準，見表1。

表1 本底計數驗證結果

2.2 批內精密度

兩臺儀器各參數低、中、高值的CV均滿足判定標準，見表2。

表2 批內精密度驗證結果

2.3 攜帶污染率

兩臺儀器各參數的攜帶污染率均在機型規定的范圍內，見表3。

表3 攜帶污染率驗證結果

2.4 日間精密度

分別對兩臺儀器各20份的低值質控結果和中值質控結果進行記錄總結，發現其CV均在規定的范圍內，見表4。

表4 日間精密度驗證結果

2.5 線性范圍

根據WS/T 406-2012規定，線性范圍驗證中a應在（1±0.05）范圍內，r2應≥0.950，本次實驗發現，P1和P2兩臺儀器的a及r2均在WS/T 406-2012規定的范圍內，兩臺儀器的線性范圍驗證通過，見表5。

表5 線性范圍驗證結果

2.6 正確度

P1和P2兩臺儀器與靶機SYSMEX XT-4000i 的偏倚均在規定的范圍內，驗證參數均合格，見表6。范圍的樣本份數均在要求的≥80%范圍內，驗證合格，見表8。

表6 正確度驗證結果

表8 實驗室內結果的可比性驗證結果

2.7 不同吸樣模式的結果可比性

兩臺儀器不同模式下吸樣結果的相對偏差均在規定的范圍內，驗證合格，見表7。

表7 不同吸樣模式的結果可比性驗證結果

2.8 實驗室內結果的可比性

以SYSMEX XT-4000i 為基準儀器測定20份樣本，計算P1和P2兩臺儀器與基準儀器的相對偏差，各參數相對偏差所要求符合的范圍為：WBC ≤7.5%，RBC ≤3.0%，HGB ≤3.5%，HCT ≤3.5%，MCV ≤3.5%，MCH ≤3.5%，MCHC ≤3.5%，PLT ≤12.5%。本次實驗發現，符合相對偏差規定

2.9 參考區間

驗證P1和P2兩臺儀器所有提供參考范圍的報告參數，發現所有參數中超出參考區間范圍的個數均不超過2個，驗證通過，見表9。

表9 參考區間驗證結果

3 討論

邁瑞BC-6800Plus 全自動血細胞分析儀通過采用半導體激光散射結合熒光染色技術的多維分析技術（SF-Cube 2.0）[2]，以及白系WNB 和紅系ERP雙通道進行檢測[3]，檢測速度可高達400次/h，遠遠高于實驗室現有的SYSMEX XT-4000i 100次/h[4]，極大地提高了血細胞檢測的工作效率。在PLT 檢測方面，邁瑞BC-6800Plus 全自動血細胞分析儀不僅可通過RET 通道解決EDTA 依賴性PLT 聚集帶來的假性PLT 減少，還可通過高效熒光染料、反射光抑制技術與硅光電信增管的結合，提高PLT 的分辨檢出率[5-6]，避免了RBC 碎片、小RBC、WBC碎片對PLT 結果的影響。有研究表明，邁瑞BC 系列血細胞分析儀在網織紅細胞檢測方面，為貧血的分類提供了必要的臨床參考[7]。對于瘧原蟲的檢測，邁瑞BC 系列血細胞分析儀均優于其他同類品牌，在瘧疾流行學調查中有較高的應用價值[8-9]。在邁瑞BC 系列血細胞分析儀提供的散點圖與形態學信息界面，我們可直觀地看到異常細胞提示信息，在臨床血液病患者中有較高的應用價值[10-11]。

通過本次性能驗證，我們發現兩臺BC-6800Plus 全自動血細胞分析儀的本底計數（P1、P2的本底計數均為0）符合要求；攜帶污染率（P1、P2的攜帶污染率均低于要求的1.0%），符合要求；批內精密度（各參數P1批內CV% 0～2.93，P2批內CV% 0.08～3.42）均滿足各參數的判定標準；日間精密度（各參數P1批間CV% 0.63～4.15，P2批間CV% 0.61～3.98）均滿足各參數的判定標準；線性范圍驗證中各參數（WBC 中值、WBC 高值、RBC、HGB、HCT、PLT 中值、PLT 高值）的a均在規定的（1±0.05）范圍內，r2均＞0.950，可報告范圍寬；正確度（各參數P1偏倚CV% -1.27～5.86，P2偏倚CV% -1.89～4.85）均在規定的偏倚范圍內；自動進樣與開放進樣結果的可比性（各參數P1相對偏差% 0.29～4.10，P2相對偏差% 0.12～2.40）均低于行業標準規定的相對偏差要求；實驗室內結果的可比性（P1、P2各參數滿足相對偏差要求的樣本份數為17～20）符合相對偏差規定范圍的樣本份數均在要求的≥80%范圍內；兩臺儀器均滿足參考區間的R 為0.90～1.00，符合所要求的R ≥0.90。總之，各項結果均顯示兩臺儀器符合臨床應用要求。

綜上所述，本實驗室新引進的邁瑞CAL-8000血細胞分析流水線的各項指標均符合相關標準，在檢測速度與線性寬度等方面優于文獻[12-15]報道的同類其他品牌，更好地保證了檢測質量，滿足了臨床需求，同時縮短了檢測時間，提高了工作效率。