薄層液基細胞學與DNA定量分析聯合檢測對肺癌的診斷價值

李啟生

(微山縣人民醫院 山東 濟寧 277600)

肺癌是一種呼吸系統常見疾病，發病率和致死率均較高，是威脅患者生命安全的主要惡性腫瘤。因此，及早發現、診斷和明確患者病理類型，對肺癌患者治療效果提升和預后改善具有重要意義。薄層液基細胞學(TCT)是臨床篩查肺癌等疾病的重要方法，具有操作簡便，準確度及特異度高等優勢，且給患者造成的創傷小，屬于微創檢測，但是容易出現漏診或誤診等情況[1]。液基細胞學檢查通常應用于宮頸癌等疾病篩查，現在該方法在細胞學診斷中也應用廣泛。DNA定量分析技術是一種新型的DNA含量測量技術，主要利用基因水平快速測量和自動分析細胞內DNA含量，也是診斷肺癌的重要手段，為了解這兩種檢測方式聯合應用于肺癌診斷的臨床效果，本文對其研究如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

納入2016年1月～2021年1月期間在我院接受治療的疑似肺癌患者130例，納入標準：(1)所有患者經胸部CT檢查發現肺部存在陰影；(2)存在咳痰、咳血等臨床癥狀，臨床判斷為疑似肺癌；(3)自愿參與研究并簽署同意書。排除標準：(1)近期服用抗生素治療者；(2)合并周圍神經病變；(3)合并心血管疾?。?4)合并惡性腫瘤；(5)肝腎等臟器功能不全或不配合者。其中男性76例，女性54例，年齡31～82歲，平均年齡(52.96±4.72)歲。病理檢查確診為陽性80例，陰性50例。

1.2方法

本研究所有患者均采集晨起痰液標本，對其進行TCT和DNA定量分析，(1)TCT檢測：采集痰液標本，將其保存于新柏液基細胞保存瓶中，靜置半小時后使用黏液消解劑對痰黏液進行消除，然后使用美國豪洛捷醫療公司生產的膜式TCT制片機進行薄層細胞學片制作，實施HE染色后，對其實施TCT檢測。(2)DNA定量分析：稱取0.9g的二硫蘇糖醇(DTT)固體粉末，將其加入到100毫升50%乙醇中，充分攪拌后配置成DTT溶解液，將其密封保存于4℃條件下。取適量痰液標本， 加入20ml的清洗液和和2～3滴DTT溶解液，振蕩10分鐘以促進黏液消化，操作完成后將痰液標本轉移至含有細胞保存液的試管中，以每分鐘2500轉的速度對標本進行離心處理，去除上清液后，若細胞層仍肉眼可見黏液或血可重復上述步驟，留下離心管尖底部細胞，轉移至細胞分散液中，將其制作成兩張薄層細胞片，經HE染色、Feulgen染色等處理后，應用DNA定量分析系統進行DNA倍體定量分析。

1.3觀察指標

由經驗豐富的病理科醫生進行TCT鏡下閱片與診斷。(1)TCT檢查根據痰細胞學診斷結果分為正常、異型、可疑惡性和惡性腫瘤，其中前兩者納入為陰性，后兩者確定為陽性。(2)DNA陰性：正常細胞的DNA指數(DI)為1；可疑惡性：有1～2個DI≥2.5的DNA倍體異常細胞；惡性：3個及以上DI≥2.5的DNA倍體異常細胞及出現異倍體峰。分析比較兩種檢查方法對肺癌患者的組織學類型檢出結果，并分析TCT與DNA定量單獨應用和聯合應用對肺癌的診斷效能。

1.4統計學方法

2 結果

2.1 TCT檢查對肺癌組織學類型的診斷結果

本研究130例經病理檢查確診為陽性80例，陰性50例，通過對其病理組織類型進行分析發現，TCT檢查對鱗癌的診斷準確率為66.67%，對腺癌的診斷準確率為63.16%，對小細胞癌診斷準確率53.85%，對大細胞癌和類癌的診斷準確率分別為42.86%和56.25%。詳見下表1。

表1 TCT檢查對肺癌組織學類型的診斷結果

2.2 DNA定量分析對肺癌組織學類型的診斷結果

DNA定量分析檢出正常21例，可疑惡性22例，惡性37例，其中鱗癌診斷準確率86.67%，腺癌準確率78.95%，小細胞癌、大細胞癌準確率分別為65.38%和71.42%，類癌準確率50.00%。見表2。

表2 DNA定量分析對肺癌組織學類型的診斷結果

2.3 TCT與DNA定量分析對肺癌的診斷效能

通過對130例患者的檢查結果進行分析發現，TCT單獨檢測真陽性45例，真陰性42例，DNA定量分析單獨應用的真陽性與真陰性數分別為59例和44例，而將兩者聯合應用后的真陽性和真陰性檢出數量均顯著增加。見表3。

表3 TCT與DNA定量分析單獨與聯合應用診斷效能

TCT與DNA定量分析聯合對肺癌的診斷靈敏度為92.50%，準確度為93.08%，陰性預測值88.68%，與單獨TCT和單獨DNA定量分析檢測結果比較，具有統計學差異(P<0.05)。見表4。

表4 不同檢查方法的診斷效能比較

3 討論

肺癌屬于臨床常見病，對于該疾病的具體發病機制目前尚無定論，分析其可能與遺傳、職業、空氣污染以及飲食等因素相關，患者臨床主要表現為咳嗽、呼吸困難以及胸痛等癥狀，影響患者的生活質量，若治療不及時容易導致上腔靜脈阻塞綜合征、骨轉移等情況出現，威脅患者生命安全[2]。由于該病早期臨床癥狀無特異性，部分患者確診時已達到中晚期，治療難度加大，具有較高死亡率。因此，及早發現和明確肺癌疾病性質，才能制定針對性治療方案，從而提升患者療效。常規細胞學檢驗在肺癌診斷中特異性較高，是臨床常用于診斷肺癌的檢驗方法之一，但該方法檢驗過程中極易受到多種因素的影響，導致其敏感性下降，一定程度上影響了診斷準確性。薄層液基細胞學是一種新興的細胞制片技術，常用于婦科腫瘤的早期篩查診斷，但近幾年該方法也逐漸應用于肺癌診斷中。

TCT檢測具有操作簡單、制片規范及制片效果好等特點，患者比較容易接受，且自帶標本制備和自動制片系統，不僅能大批量處理標本，提高普查效率，還能改變傳統檢驗中細胞形態改變、涂片太厚或背景污穢等問題，有助于進一步提高細胞學診斷準確性[3]。TCT檢測可在標本取出后直接將其浸入細胞保存液中，一方面可保留取樣器中的完整標本，避免有價值標本細胞死亡；另一方面也能避免普通標本制作時出現細胞過度干燥的情況，最大限度保護了細胞原有形態。TCT還能減少細菌涂抹面積，縮短臨床閱片時間，進而達到提高工作效率的目的，一定程度上避免過度疲勞而出現假陽性[4]。但是TCT檢查也存在一定不足，該方法主要根據細胞形態變化對病情做出病情，在痰標本中脫落癌細胞較少和細胞形態結構不典型的情況下，可影響診斷結果的準確性，容易導致疾病漏診或誤診。

DNA定量分析是對細胞DNA實施特異染色，然后應用全自動掃描系統對玻片上細胞核進行掃描，然后根據細胞核內DNA參數進行自動分類和技術，結合細胞DI判定檢測結果。采用該方法進行檢測，能夠使細胞學檢查從傳統的單一形態學檢查，進一步上升至分子水平的定量分析，能夠及早發現細胞內DNA含量的微小變化，從而及早預測患者癌癥風險。有研究報道，DNA定量分析通過利用自動掃描系統對各細胞的細胞核進行識別，能夠快速識別出標本中的癌變細胞，且能夠更為客觀地體現形態學特征，具有較TCT檢查更高的陽性檢出率，能夠為臨床疾病診斷與治療提供指導[5]。目前DNA定量分析已經在各類良惡性腫瘤的鑒別診斷中應用廣泛，如甲狀腺腫瘤、子宮頸癌、乳腺癌等疾病診斷中均可應用該方法，但關于該方法在肺癌診斷中的應用報道相對較少。本研究顯示，不論是TCT和DNA定量分析均可較好地判斷患者的病理組織類型，且TCT檢查與DNA定量分析聯合診斷的靈敏度、準確度、陰性預測值分別達到了92.50%、93.08%、88.68%，優于單獨TCT和DNA定量分析結果，說明將這兩種方法充分結合可顯著提升臨床對肺癌的診斷效果。

總而言之，在采集痰液標本進行肺癌診斷時，采用TCT聯合DNA定量分析能夠充分發揮這兩種檢查方法的優勢，減少人為干擾等因素的影響，確保檢測結果更為客觀和準確，具有較高的靈敏度和準確度，能夠為臨床肺癌診斷及預后評估提供重要依據。