探究在精斑混合檢材中應用X-STR檢驗方法

馮旭明

關鍵詞：精斑混合檢材;X-STR;檢驗

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）10--01

X染色體長約153Mb，其中的編碼基因約為1100個，屬于中等大小的亞中著絲粒染色體，在人體內的所有基因組中占比約為5%[1]。由于X染色體的遺傳方式較為特殊，所以其STR的基因座又有伴性遺傳的特點。在法醫學檢驗中，針對親緣關系的鑒定案件，可以應用X-STR檢驗法。

1 資料

某強奸案偵破過程中，收集物證包括了被害女性的陰道拭子、乳頭拭子、指甲拭子、內褲（已剪為前、中、后三段），同時提供了被害女性和男性嫌疑人甲、乙、丙、丁的血樣，已知乙和丁是堂兄弟，現要求鑒定物證中是否含有甲、乙、丙、丁四人的精斑。

2 材料和方法

選用材料包括了PowerPlex 21試劑盒、GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統27Y試劑盒、SureID? PathFinder擴增熒光檢測試劑盒、GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統17X試劑盒，采用二步提取法在精斑混合檢材中提取DNA。

3 結果

通過對各個物證檢材應用PSA試劑檢測，得知乳頭拭子、指甲拭子的結果為陰性，陰道拭子、內褲三段的結果為陽性。同時，在陰道拭子中并沒有檢測到男性個體的DNA，檢測結果提示內褲三段均含有多個男性DNA。其中，內褲前段至少含有2名男性DNA，內褲中段及后段至少含有3名男性DNA。由于乙和丁在身份鑒定中存在27Y的單倍型一樣的情況，為了能正確區分乙和丁嫌疑人，對內褲三段分別展開進一步檢測。

檢測得知，在36個Y-STR分型結果中，內褲前段獲得了相對完整的單倍型，內褲中段和內褲后段均獲得了多個單倍型。在DYS549和DYS527a/b上，乙的單倍型為13和20，24，在DYS549和DYS527a/b上，丁的單倍型為12和20，23，兩者單倍型存在差異，原因可能是DYS549和DYS527a/b的單倍型組合中，含有四個嫌疑人的單倍型。

檢測得知，在17個X-STR的分型結果中，分別在內褲三段中觀察到至少2個及其以上的單倍型。其中，GATA172D05和DXS10134上可以觀察到4個單倍型，結果和4個嫌疑人的單倍型吻合。

4 討論

針對X-STR方法的使用通常遵循相應的規律，在遺傳學參數等研究中十分常見。起初，X-STR檢測方法是一代測序，如Argus X-12。由于國內針對X-STR核心基因座位點還沒有明確，所以X-STR基因座位點存在一定差異[2]。當前，在法醫學工作中，X-STR位點逐步被廣泛應用，且在特殊的親緣關系鑒別中發揮重要價值。例如，女兒的基因中有來自父親身體中的X染色體，所以可以用于鑒別父女關系。又如，孩子父親的染色體會從祖母身體中隨機遺傳一條，所以應用X-STR檢驗法又能明確祖母和孫女之間的關系。應用X-STR檢驗法還可以輔助分析姑-侄、姨-外甥、舅-外甥等關系。

在本次研究中，通過分別檢測內褲三段，結果顯示內褲上有2名及以上的男性個體DNA。在檢測的過程中，因為嫌疑人乙和丁在前期的調查中已知二者之間是堂兄弟，所以如果單純的采用Y-STR檢驗法，單倍型結果并不能夠準確的判斷出結果。通過近年來對Y-STR的研究結果得知，針對存在父系親屬關系的個體，應用高突變Y-STR能夠有效區分鑒別[3]。所以在本次檢測中，選用含有高突變的Y-STR基因座，能夠得知乙和丁的DNA僅在DYS527a/b和DYS549的基因座中存在差異。在DYS549和DYS527a/b上，乙的單倍型為13和20，24，在DYS549和DYS527a/b上，丁的單倍型為12和20，23。將內褲后段STR基因座的單倍型組合和混合檢測36個Y-STR構成的單倍型檢測結果進行比較，在內褲三段中，并不能夠明確排除含有乙和丁的DNA。同時，DYS527a/b又屬于兩拷貝STR基因座，單純的依據其結果并不能夠明確判斷出精斑混合檢材中的個體數量。而應用高突變Y-STR，就能夠對精斑混合檢材中的男性DNA進行檢測，輔助獲得較為準確的個體數量。采用X-STR檢驗法，判斷不同的單倍型，進而輔助檢測精斑混合檢材中的男性個體數量[4]。檢測結果顯示，乙和丁的17個X-STR基因座有11個等位基因存在差異，再結合Y-STR的檢測結果進行分析，推測出內褲三段中至少含有4名男性個體的DNA。

X染色體由于其具有特殊的遺傳方式，所以在法醫學檢驗中凸顯了X-STR檢驗方法的重要價值，是對其他遺傳標記的補充。雖然國內已有大量學者在該方面做出了研究成果，但是這方面的數據依然存在很大空白，且現有的研究結果帶有明顯的地域性。同時，國內還未完善X-STR的使用指導，所以實際使用過程中依然存在一定的使用隱患。在未來的發展中，需要結合實際應用情況，構建標準的使用指導，并在現有的基礎上明確核心基因座，優化其兼容性，以此在保證該方法高靈敏度的同時，還能快速準確的得出結果。

綜上，針對精斑混合檢材在實際的檢測中，可以將Y-STR和X-STR檢驗法一起使用，檢測過程更快速、檢測結果更準確。

參考文獻：

[1] 余政梁，張建，尚蕾，等. X染色體遺傳標記在法醫遺傳學中的研究和應用[J].分子影像學雜志，2018，41（1）：127-129.

[2]林添春，楊幸怡，熊晨，等.19個X-STR熒光復合擴增體系的法醫學應用評估[J].新醫學，2021，52（11）：846-851.

[3]牛青山，杜馨雨，宋志豪.X-STR基因座遺傳標記的研究進展[J].中國刑警學院學報，2020（2）：106-113.

[4]張璐，丁梅，龐灝，等.四類遺傳標記的檢測用于混合精斑的個人識別[J].中國法醫學雜志，2017，32（6）：627-630.