納米給藥系統(tǒng)在幽門螺桿菌靶向治療中的研究進(jìn)展

嚴(yán)曉敏 王文俊 陳自強(qiáng) 胡慧玲 王戰(zhàn)國(guó)

摘要：幽門螺桿菌是一種定植于胃黏液層和胃黏膜表面的常見致病菌，全球感染率已超過50%。幽門螺桿菌感染與消化性潰瘍、慢性胃炎、胃癌等多種消化系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切的聯(lián)系，臨床以抗生素為主的聯(lián)合療法為常見。隨著抗生素的酸不穩(wěn)定及細(xì)菌耐藥性的不斷升高，幽門螺桿菌的根除率不斷下降，為藥物遞送提出了新的挑戰(zhàn)。納米給藥系統(tǒng)在提高藥物生物利用度、達(dá)到靶向、緩控釋遞藥等方面具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，為幽門螺桿菌感染治療帶來(lái)了機(jī)遇。本文分析了H. pylori的結(jié)構(gòu)特征與其定植、耐藥性的產(chǎn)生之間的聯(lián)系，并針對(duì)H. pylori特征結(jié)構(gòu)，歸納總結(jié)了納米給藥系統(tǒng)在幽門螺桿菌靶向治療中的研究進(jìn)展，以期為幽門螺桿菌的治療研究和制劑開發(fā)提供參考。

關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌；納米給藥系統(tǒng)；抗生素；靶向治療

中圖分類號(hào)：R943.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Research progress of nanoparticle delivery system

in targeted therapy of Helicobacter pylori

Yan Xiao-min1， Wang Wen-jun1， Chen Zi-qiang1， Hu Hui-ling1， and Wang Zhan-guo2

（1 Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine， Pharmacy College， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Ministry of Education， State Key Laboratory of Characteristic Chinese Medicine Resources in Southwest China， Chengdu 611137; 2 Collaborative Innovation Laboratory of Metabonomics， College of Medicine， Chengdu University， Standard Research

and Extension Base （Collaborative Innovation Center） of Qiang Medicine， Chengdu 610106）

Abstract Helicobacter pylori is a common pathogenic bacterium colonized in the gastric mucosal layer as well as at the gastric epithelial surface， with the global infection rate exceeded 50%. Helicobacter pylori infection is closely related to the occurrence and development of peptic ulcer， chronic gastritis， gastric cancer and other digestive system diseases. Antibiotic-based combination therapy is commonly used in clinical treatment. However， the eradication rate is gradually decreased due to the acid instability of antibiotics and the increasing drug resistance of bacteria， which brings new challenges for the drug delivery. Nanoparticle delivery system has the unique superiorities in improving bioavailability and targeted， sustained and controlled drug delivery， which bring an opportunity to the eradication of Helicobacter pylori. In this paper， the relationship between the structural characteristics of Helicobacter pylori and its colonization and resistance was analyzed. And according to the characteristic structure of Helicobacter pylori， the research progress of nanoparticle delivery system in the targeted therapy of Helicobacter pylori was summarized， so as to provide reference for the treatment research and preparation development of Helicobacter pylori.

Key words Helicobacter pylori; Nanoparticle delivery system; Antibiotic; Targeted therapy

1982年，澳大利亞學(xué)者M(jìn)arshall和Warren首次從慢性胃炎和胃潰瘍患者胃黏膜中分離并培養(yǎng)出了一種螺旋狀、多鞭毛和微嗜氧性的革蘭陰性細(xì)菌，即為幽門螺桿菌（H. pylori）。1994年，世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)將H. pylori列為Ⅰ類致癌物[1]。它是胃十二指腸疾病的主要病原體，與胃炎、消化性潰瘍和胃癌等疾病的發(fā)生發(fā)展具有密切的聯(lián)系，此外，缺鐵性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜和維生素B12缺乏、自身免疫性甲狀腺疾病和心肌梗死也被報(bào)道與幽門螺桿菌感染有關(guān)[2-3]。迄今為止，H. pylori的全球感染率已超過50%，而在中國(guó)，H. pylori的平均感染率也已經(jīng)達(dá)到56%，有的地區(qū)甚至逼近90%[4]。針對(duì)H. pylori感染，臨床主要通過質(zhì)子泵抑制劑 （PPI） 和抗生素進(jìn)行聯(lián)合治療，周期長(zhǎng)達(dá)兩周。然而研究數(shù)據(jù)顯示，經(jīng)14 d的三聯(lián)療法治療，H. pylori根除率僅為70%～80%[5]。一方面，抗生素的酸不穩(wěn)定性及胃黏液屏障的阻礙使抗生素有效殺菌濃度降低[6]；另一方面，高劑量抗生素對(duì)H. pylori特異性較差，療程長(zhǎng)，患者依從性差，常出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹脹及腸道菌群失調(diào)等副作用[7]。而更為重要的是，研究表明H. pylori通過多維度的定植機(jī)制對(duì)胃酸環(huán)境顯示出極強(qiáng)的適應(yīng)性，同時(shí)H. pylori易對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥性[8-9]。因此，如何提高抗生素對(duì)H. pylori的特異性清除并逆轉(zhuǎn)耐藥，為H. pylori感染的藥物治療提出了新的挑戰(zhàn)。

由于高比表面積和黏膜通透性等物理化學(xué)特質(zhì)，納米給藥系統(tǒng)在提高藥物生物利用度、實(shí)現(xiàn)靶向給藥、達(dá)到緩控釋以及降低藥物的毒副作用等方面有著獨(dú)特優(yōu)勢(shì)[10-11]。本文分析了H. pylori的結(jié)構(gòu)特征與其定植、耐藥性的產(chǎn)生之間的聯(lián)系，并針對(duì)H. pylori的特征結(jié)構(gòu)，歸納總結(jié)了納米給藥系統(tǒng)在H. pylori的靶向治療中的研究進(jìn)展，以期為H. pylori的治療及制劑研發(fā)提供參考。

1 基于H. pylori表面黏附因子的靶向策略

細(xì)菌病原體黏附到黏膜表面，避免由于自身的蠕動(dòng)排出機(jī)體，對(duì)H. pylori的定殖至關(guān)重要。研究發(fā)現(xiàn)H. pylori表面存在黏附素，其中以黏附素HpaA為代表，包括血型抗原結(jié)合型（BabA）、唾液酸結(jié)合型黏附素（SabA），他們能與胃黏膜上皮表達(dá)的Lewis抗原特異性結(jié)合，促進(jìn)H. pylori在胃黏膜的長(zhǎng)期根植[12-13]；除此之外，細(xì)胞毒素相關(guān)基因L（CagL）、黏附相關(guān)脂蛋白（AlpA/B）、中性粒細(xì)胞激活蛋白（NA）等黏附因子均能與上皮表面特異性受體結(jié)合而促進(jìn)H. pylori的黏附；相比之下，前炎性外膜蛋白A（OipA）、外膜蛋白B（HomB）和HopZ蛋白等，以及熱休克蛋白60（Hsp60）的黏附受體還未明確，這些黏附因子不僅是H. pylori根植在胃黏液深層的主要原因，也是抗生素遞送的常用靶點(diǎn)[14-16]（圖1和表1）。

Lin等[17]學(xué)者以巖藻糖為靶分子，通過識(shí)別H. pylori細(xì)胞壁表面的巖藻糖殘基而達(dá)到對(duì)H. pylori的特異性根除，激光共聚焦顯微鏡下觀察到該納米粒在H. pylori感染的上皮細(xì)胞系內(nèi)部產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光，證實(shí)了巖藻糖的修飾能夠?qū)崿F(xiàn)藥物的靶向遞送；體內(nèi)外抑菌實(shí)驗(yàn)均證實(shí)了巖藻糖偶連的納米粒的抑菌率顯著高于游離的小檗堿溶液（P<0.05），并能明顯降低胃組織中H. pylori的菌落數(shù)，有效減輕H. pylori感染引起的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)[17]。在靶向前提下，H. pylori的根除需要高濃度的藥物在胃黏膜內(nèi)維持更長(zhǎng)時(shí)間。果膠、醇溶蛋白等生物黏附載體能在實(shí)現(xiàn)特異性識(shí)別H. pylori的同時(shí)，使所載藥物達(dá)到“胃滯留”效果。Gottesmann等[18]基于果膠的生物黏附性能，及其能與菌膜表面的黏附素BabA等發(fā)生特異性結(jié)合等特質(zhì)，制備了果膠包衣的阿莫西林脂質(zhì)體。研究在熒光顯微鏡和共聚焦顯微鏡下均觀察到果膠包衣脂質(zhì)體與H. pylori的共定位，說(shuō)明兩者發(fā)生特異性結(jié)合；體外黏液結(jié)合試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該脂質(zhì)體與黏液蛋白結(jié)合后，粒徑均從160 nm左右增大至700 nm，電位減小約50%，且其與人源結(jié)腸癌細(xì)胞（HT29-MTX）分泌的黏液的相互作用表現(xiàn)出明顯的濃度依賴性，說(shuō)明果膠的包被能顯著提高該脂質(zhì)體的胃黏膜黏附性，這可能進(jìn)一步延長(zhǎng)藥物對(duì)H. pylori的靶向清除效能。此外，Umamaheshw等[19]基于醇溶蛋白優(yōu)良的胃腸黏附性，采用兩步碳二亞胺法分別制備了巖藻糖特異性（UEA-GNP）和甘露糖特異性凝集素結(jié)合的醇溶蛋白納米粒（Con A-GNP）。凝集實(shí)驗(yàn)表明里兩種凝集素納米粒均能與H. pylori發(fā)生強(qiáng)烈結(jié)合反應(yīng)，原位黏附試驗(yàn)證實(shí)了其顯著的胃黏附特性，發(fā)現(xiàn)UEA-GNP和Con A-GNP均能競(jìng)爭(zhēng)H. pylori在人胃細(xì)胞上的結(jié)合位點(diǎn)，減少H. pylori在胃部的定植，最終在12 h內(nèi)達(dá)到了100%的抑制率。

2 基于尿素通道蛋白UreI的靶向策略

H. pylori可以表達(dá)尿素通道蛋白UreI，當(dāng)幽門螺桿菌的外部pH降至弱酸時(shí)，UreI被激活，將環(huán)境中的尿素轉(zhuǎn)運(yùn)至胞內(nèi)，在尿素酶的作用下將尿素分解為CO2和NH3，NH3進(jìn)一步擴(kuò)散至胞外形成“氨云”，改變胃中的酸性環(huán)境，從而利于自身的定植及繁殖[20-22]（圖2）。利用H. pylori通道蛋白UreI與尿素的特異性結(jié)合，將尿素基團(tuán)偶連至藥物分子，是對(duì)H. pylori進(jìn)行靶向清除又一策略（圖1-Ⅱ）。

殼聚糖分子鏈上的-NH2和-OH賦予了其極強(qiáng)的化學(xué)可修飾性，是脲基偶連的常用位點(diǎn)；而其生物黏附性使殼聚糖納米粒作為藥物載體，能在實(shí)現(xiàn)靶向清除H. pylori的同時(shí)，達(dá)到胃滯留的目的。Jing等[23]采用離子凝膠法制備了脲基偶連的阿莫西林-殼聚糖納米粒（AMX -UCCs-2/NPs），以實(shí)現(xiàn)H. pylori的pH敏感化的靶向清除。結(jié)果表明環(huán)境pH降低時(shí)，大量的尿素通道蛋白UreI打開，導(dǎo)致H. pylori對(duì)脲基偶連納米粒的攝取增加（P<0.05），攝取量與尿素濃度呈負(fù)相關(guān)，且具有溫度依賴性，這可能源于37℃下UreI的活性最高；經(jīng)AMX -UCCs-2/NPs干預(yù)后，小鼠胃組織中的菌落數(shù)顯著降低（P<0.01），并能明顯降低白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等炎性因子表達(dá)水平，減輕H. pylori感染引起的胃組織損傷；活體成像下觀察到AMX -UCCs-2/NPs在小鼠胃內(nèi)滯留超過6 h [23]，這歸因于在胃酸環(huán)境下，殼聚糖表面攜帶的NH3+基團(tuán)能與黏蛋白形成氫鍵并產(chǎn)生靜電相互作用[24-26]。

此外，由于殼聚糖在酸性條件下的溶解限制，常通過衍生化改善，所得到的殼聚糖衍生物能在打破此應(yīng)用局限的同時(shí)，進(jìn)一步增強(qiáng)生物黏附性[27]。因此，通過脲基修飾后，進(jìn)一步延長(zhǎng)對(duì)H. pylori的靶向根除時(shí)間。Arif等[28]研究發(fā)現(xiàn)硫代化殼聚糖（Cys-CS）納米粒對(duì)H. pylori的生長(zhǎng)抑制率比殼聚糖納米粒高了近2倍，這歸因于Cys-CS在保留了殼聚糖生物黏附機(jī)制的同時(shí)，還能與黏蛋白之間形成二硫鍵，這進(jìn)一步強(qiáng)化了載藥納米粒的胃滯留效應(yīng)，從而提升抗菌藥效的發(fā)揮[28]。Cong等[29]學(xué)者選用羧甲基殼聚糖（CMCS）作為骨架材料，以硬脂酸（SA）進(jìn)行疏水改性，再通過NHS/EDC法進(jìn)行尿素枝接，得到羧甲基殼聚糖-硬脂酸-尿素（U-CMCS-g-S）共聚物，超聲處理后形成納米膠束（UCS-NMs）。研究在共聚焦顯微鏡下觀察到UCS-NMs與H. pylori的共定位，且其能在胃中滯留時(shí)間長(zhǎng)達(dá)24 h，相比游離的克拉霉素，UCS-NMs的抗菌效力顯著提升，濃度為24 μg/mL的UCS-NMs在30min內(nèi)即可殺滅92.0%以上的H. pylori。

3 基于生物膜的靶向策略

H. pylori在根植過程中不斷分泌一些蛋白質(zhì)、多糖等形成胞外基質(zhì)（EPS）將自身包裹其中，并在菌落表面形成一層膜狀物，即為生物膜[30]。生物膜不僅對(duì)H. pylori的增殖生長(zhǎng)起到保護(hù)作用，還能阻止抗生素的滲透，是造成H. pylori耐藥的重要原因[31-32]。選擇對(duì)H. pylori生物膜具有一定功能化的載體進(jìn)行納米給藥系統(tǒng)的開發(fā)，能進(jìn)一步提高抗生素對(duì)H. pylori的特異性根除，并逆轉(zhuǎn)耐藥（圖1-Ⅲ）。如鼠李糖脂（RHL）已被報(bào)道對(duì)H. pylori生物膜具有破壞作用，基于此，Li等[33]選擇RHL為納米粒的殼層材料對(duì)克拉霉素（CLR）納米粒進(jìn)行包封。研究結(jié)果顯示RHL作為殼層，在抑制生物膜形成、降低H. pylori生物膜生物量和活性、清除胞外基質(zhì)等方面發(fā)揮著重要作用，且這種特異性破壞作用與RHL濃度呈正相關(guān)；CLR經(jīng)RHL的包載后對(duì)生物膜內(nèi)的H. pylori最大清除率達(dá)到97%。

金屬納米粒的量子效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)和極大的表面積賦予了其突出的抗菌性能[34]；它們可通過與細(xì)菌細(xì)胞壁直接作用、誘導(dǎo)適應(yīng)性和先天免疫應(yīng)答、產(chǎn)生活性氧、抑制生物膜形成等逆轉(zhuǎn)耐藥[35-36]。其中，納米銀是根除H. pylori最常見的金屬納米形式[37]。Gurunathan等[38]以青蒿葉提取物為生物還原劑，合成了銀納米粒（AgNPs），并且考察了該銀納米粒的抗H. pylori活性及其對(duì)H. pylori生物膜形成的影響。研究發(fā)現(xiàn)AgNPs對(duì)H. pylori的殺滅作用呈劑量依賴性上升，用5 μg/mL AgNPs處理H. pylori，24 h后發(fā)現(xiàn)其生物膜活性下降90%～95%，研究提出這可能與AgNPs能有效提高活性氧（ROS）釋放誘導(dǎo)細(xì)菌細(xì)胞凋亡、抑制胞外多糖的產(chǎn)生有關(guān)[38]。但值得注意的是，金屬納米粒具有一定的肝腎毒性，而其對(duì)于胃細(xì)胞系的毒理研究還有待深入，因此，實(shí)際應(yīng)用中，還需進(jìn)一步考察其生物降解性并進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。

除此之外，有研究證明一些無(wú)機(jī)礦物也能與H. pylori分泌的EPS發(fā)生特異性相互作用，他們通過疏水、靜電、共價(jià)等分子間力作用實(shí)現(xiàn)靶向黏附，從而將藥物靶向遞送至H. pylori。Ping等[39]學(xué)者基于高度剝離蒙脫土（eMMT）對(duì)EPS的特異性識(shí)別和黏附，線性聚乙烯亞胺（lPEI）對(duì)脂多糖（LPS）的特異性溶解為依據(jù)，制備了負(fù)載甲硝唑（MTZ）的eMMT-lPEI納米粒（eMMT-lPEI/MTZ）。該納米粒首先通過對(duì)EPS的靶向識(shí)別而黏附于H. pylori，進(jìn)一步通過lPEI溶解菌膜并形成跨膜通道，將抗生素輸送到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)達(dá)到殺菌作用。掃描電鏡下幾乎觀察不到具有完整結(jié)構(gòu)的H. pylori，而eMMT-lPEI/MTZ的干預(yù)明顯減輕了H. pylori感染引起的胃組織損傷，使組織結(jié)構(gòu)與正常水平相當(dāng)。進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，相比游離的MTZ，eMMT-lPEI/MTZ更大程度降低了小鼠體內(nèi)的血清胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原Ⅱ和胃泌素17的濃度，進(jìn)而證實(shí)eMMT對(duì)EPS的靶向黏附以及l(fā)PEI鏈的對(duì)LPS的特異性溶解促進(jìn)了甲硝唑抗菌藥效的發(fā)揮。

4 基于細(xì)胞膜的靶向策略

H. pylori細(xì)胞膜是其攝取養(yǎng)分、排泄并進(jìn)行信息傳遞的重要結(jié)構(gòu)，直接破壞細(xì)胞膜能顯著提高藥物對(duì)H. pylori的靶向清除效力（圖1-Ⅳ）。脂質(zhì)體的磷脂雙分子層形成了單層或多層球形囊泡， 賦予了脂質(zhì)體對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜的天然親和性，能顯著改善藥物的組織分布，提高細(xì)胞內(nèi)抗菌活性，是此靶向策略下最常用納米載體形式[40-41]。Seabra等[42-43]以棕櫚酸甘油酯、辛酸/癸酸甘油酯、聚山梨酯60為原料，采用高剪切熱均質(zhì)超聲法制備了空白脂質(zhì)納米粒（NLC）并考察其抗H. pylori活性。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低中濃度的NLC均能在不影響其他受試菌（乳桿菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌）的生長(zhǎng)情況下，達(dá)到對(duì)H. pylori的100%清除。該研究團(tuán)隊(duì)采用相同的方法進(jìn)一步對(duì)二十二碳六烯酸（DHA）進(jìn)行載藥，其最小抑菌濃度僅為游離DHA的1/4；機(jī)制研究結(jié)果顯示，空白和載藥NLC均能通過與H. pylori菌膜結(jié)合，破壞其穩(wěn)定性，導(dǎo)致膜破裂及細(xì)胞質(zhì)滲漏，最終使細(xì)菌死亡。除了DHA，月桂酸、亞麻酸等游離脂肪酸也被證明相比抗生素，其誘導(dǎo)H. pylori產(chǎn)生耐藥性的頻率更低。Thamphiwatana等[44]學(xué)者研究制備了亞麻酸脂質(zhì)體（LipoLLA）用于H. pylori的感染治療，體外抗菌試驗(yàn)結(jié)果顯示，LipoLLA能在30 min內(nèi)殺滅99.9%的H. pylori；熒光顯微鏡的觀察揭示這種抗菌機(jī)制在于LipoLLA能與細(xì)菌膜發(fā)生融合，破壞其結(jié)構(gòu)完整性，這種高度破壞性機(jī)制能有效降低耐藥性發(fā)展的敏感性。經(jīng)該亞麻酸脂質(zhì)體干預(yù)后，小鼠胃組織中白細(xì)胞介素1β、白細(xì)胞介素6和腫瘤壞死因子α等炎性因子的表達(dá)水平均顯著降低（P<0.001），進(jìn)一步說(shuō)明LipoLLA在殺菌的同時(shí)也能改善H. pylori感染引起的炎癥反應(yīng)。

雖然脂質(zhì)納米粒具有低毒性、生物可降解性、生物相容性等優(yōu)勢(shì)，但其穩(wěn)定性和靶向選擇性能均需進(jìn)一步強(qiáng)化。因此，選擇細(xì)胞膜具有特異性的聚合物載體進(jìn)行靶向修飾，也是實(shí)現(xiàn)藥物對(duì)H. pylori靶向清除的有效方式。Chakraborti等[45]基于聚乙烯亞胺（PEI）的膜滲透性及其對(duì)革蘭陰性細(xì)菌外膜LPS的靶向性，采用濕化學(xué)法制備了ZnO-PEI納米粒。研究發(fā)現(xiàn)制備的ZnO-PEI納米粒能有效地內(nèi)化入H. pylori細(xì)胞中，同時(shí)產(chǎn)生大量的ROS，導(dǎo)致膜損傷和RNA降解，最終細(xì)菌膜形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榍蛐尾⑹Щ睿瑫r(shí)研究表明在毒理學(xué)安全濃度（20 mg/mL）下，ZnO-PEI納米粒與其他抗生素聯(lián)合使用，對(duì)H. pylori的根除具有顯著的協(xié)同效應(yīng)。

5 基于仿生膜的靶向策略

通過載體功能化修飾的納米給藥系統(tǒng)能使藥物與H. pylori表面的受體發(fā)生相互作用，以此達(dá)到靶向效果，然而這種靶向載體始終存在著生物相容性的問題[46]。近年來(lái)，“仿生納米粒”的出現(xiàn)為H. pylori的根除提供了更安全有效的靶向模式（圖1-Ⅴ）。這種納米粒由細(xì)胞膜、菌膜等的包被構(gòu)建仿生型納米遞藥系統(tǒng)，通過模擬內(nèi)源性物質(zhì)的生物學(xué)行為或復(fù)制病原體結(jié)構(gòu)功能而獲得對(duì)H. pylori的親和力，從而將藥物精準(zhǔn)靶向至病灶部位，且不易被免疫系統(tǒng)識(shí)別，延長(zhǎng)藥物的體循環(huán)時(shí)間[47-49]。Angsantikul等[50]通過提取胃上皮細(xì)胞膜（AGS），并采用超聲法將其包覆在負(fù)載CLR的PLGA聚合物核上，由此得到的仿生納米粒（AGS-NP）具有與源AGS細(xì)胞表面相同的抗原，能對(duì)H. pylori進(jìn)行靶向黏附。抗菌試驗(yàn)結(jié)果顯示游離CLR和非仿生納米粒均不能根除H. pylori，而AGS-NP的最小殺菌濃度（MBC）僅為4 μg/mL；口服6 d AGS-NP后，小鼠胃組織中的H. pylori含量降低了3.08個(gè)數(shù)量級(jí)，顯示出了突出的靶向清除優(yōu)勢(shì)。此外，阻止H. pylori與宿主結(jié)合，或者充當(dāng)H. pylori的黏附類似物，與細(xì)菌爭(zhēng)奪宿主上的結(jié)合位點(diǎn)，以避免細(xì)菌的黏附定植，并促進(jìn)免疫系統(tǒng)清除病原體，是從根源上達(dá)到殺菌作用的有效途徑[51-52]。基于此，Zhang等[53]學(xué)者采用納米沉淀法制備了PLGA納米粒，并選用H. pylori外膜囊泡（OMV）作為仿生膜來(lái)源，通過超聲作用融合到PLGA聚合物納米粒上，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)OMV包被的納米粒能與AGS細(xì)胞系發(fā)生特異性結(jié)合，顯著減少H. pylori在胃組織的定植量。此類抗黏附殺菌機(jī)制并不直接干擾細(xì)菌的殺滅周期，進(jìn)而避免了耐藥性的增強(qiáng)，與抗生素聯(lián)合已經(jīng)顯示出協(xié)同作用。

6 總結(jié)與展望

目前，H. pylori的臨床治療多以抗生素為主的聯(lián)合療法為常用，但均不可避免需要高頻率給藥，且特異性低，導(dǎo)致患者耐受性差、H. pylori的高耐藥性及低根除率等[54]。納米制劑的靶向治療被認(rèn)為是提高H. pylori根除率的有效方法，但其研究仍處于臨床前的探索階段，還未有相關(guān)制劑批準(zhǔn)上市。調(diào)查顯示，目前進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的納米制劑多用于腫瘤及傳染性疾病，且以脂質(zhì)體制劑為主[55-57]，僅有進(jìn)入臨床試驗(yàn)的納米銀制劑也多用于創(chuàng)面修復(fù)和感染性疾病的治療[58-62]。盡管如此，納米給藥系統(tǒng)在實(shí)現(xiàn)H. pylori靶向清除的應(yīng)用前景也不可忽視。

根據(jù)H. pylori的結(jié)構(gòu)特征，本文綜述了靶向根除H. pylori的策略，其中，基于H. pylori表面黏附因子、尿素通道蛋白UreI及生物膜的靶向策略，研究常采用特異性基團(tuán)對(duì)藥物載體進(jìn)行修飾，或選擇對(duì)H. pylori的結(jié)構(gòu)具有破壞作用的功能化載體，從而達(dá)到對(duì)H. pylori的主動(dòng)靶向。然而，可選擇的配體是有限的，這使得以上靶向策略的實(shí)際應(yīng)用受限；基于細(xì)胞膜的靶向策略以具有“膜親和力”的脂質(zhì)納米載體為常見，但其靶向效率和穩(wěn)定性是限制其應(yīng)用的主要因素；基于仿生膜的靶向策略一般通過細(xì)胞膜與細(xì)菌病原體的包被而獲取“天然靶向性”，其兼具納米體系與生物體系優(yōu)勢(shì)，能減少機(jī)體對(duì)載藥納米粒的排斥反應(yīng)，并降低毒副作用，是最安全有效的靶向模式，臨床應(yīng)用前景廣闊。但值得注意的是，仿生膜的供應(yīng)、提取方法以及仿生納米粒的制備技術(shù)、表征手段等仍需深入研究，但宿主與病原體的黏附而使感染加重是各類病原菌的共性之一，因此，仿生納米粒也為多種傳染性疾病的治療提供了新的參考[50]。總的來(lái)說(shuō)，盡管針對(duì)H. pylori治療的相關(guān)納米制劑仍處于臨床前研究階段，但實(shí)現(xiàn)臨床實(shí)踐的跨越是機(jī)遇也是挑戰(zhàn)，相信隨著納米制劑技術(shù)的不斷成熟、“產(chǎn)學(xué)研”結(jié)合的不斷深入以及臨床經(jīng)驗(yàn)的不斷積累，將有望實(shí)現(xiàn)基礎(chǔ)研究到產(chǎn)品化的過渡，開創(chuàng)納米給藥系統(tǒng)用于H. pylori靶向治療的新局面。

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