江 敏,梁 彬,朱 波
肺炎支原體肺炎患者通常會呈現發熱、咳嗽等流感樣癥狀,不易與其他病毒感染區分,通常需要肺炎支原體培養和抗體效價檢測來輔助診斷[1]。近年研究發現,在支原體感染早期,中性粒細胞膜表面CD64表達水平會增加,可作為診斷感染的可靠、敏感指標[2]。另有研究發現,機體受到細菌、病毒刺激時,CD64表達水平會顯著升高[3]。外界病原微生物入侵時會激發炎癥反應,外周血中性粒細胞升高,淋巴細胞數量相對減少,但中性粒細胞數量、淋巴細胞數量不穩定,容易受外界因素干擾。血中性粒細胞與淋巴細胞比值(NLR)是臨床常用于反映機體炎癥的指標[4]。溫曉濱等[5]研究發現,肺炎支原體抗體效價與肺炎支原體肺炎嚴重程度有密切關系,肺炎支原體感染后,患兒全身炎癥反應嚴重,肺炎支原體抗體效價升高。本文通過觀察肺炎支原體肺炎患兒外周血CD64指數、NLR水平,探討CD64指數、NLR與血清抗體效價的相關性。
1.1研究對象 選取2017年12月—2019年12月于本院確診并治療的疑似肺炎支原體肺炎患兒164例,將血清肺炎支原體抗體效價>1︰80的122例作為觀察組;同期選取本院體檢健康兒童130例作為對照組。觀察組納入標準:符合肺炎支原體肺炎診斷標準[6];未采取抗菌藥物治療;病例資料完整。排除標準:伴先天免疫系統疾病者;入組前使用過糖皮質激素或免疫調節劑治療者;嚴重心、肝、腎及凝血功能障礙者;合并惡性腫瘤者。2組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。
1.2研究方法
1.2.1樣品采集及保存:觀察組于入院后清晨、對照組于體檢時抽取空腹外周靜脈血5 ml,2 ml用于檢測CD64指數,2 ml用于檢測淋巴細胞計數及肺炎支原體抗體,1 ml離心取上清待測。
1.2.2CD64指數檢測:取流式專用管,每管加入5 μl鼠抗人CD64抗體及50 μl外周血標本,震蕩混勻,室溫避光30 min,再加入稀釋好的溶血素2 ml,10 min后1500 r/min離心5 min,棄上清,加入0.5 ml PBS液混勻,后用FACS Calibur流式細胞儀檢測。
1.2.3NLR檢測:使用Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀檢測中性粒細胞和淋巴細胞絕對值并計算NLR,NLR=中性粒細胞/淋巴細胞。
1.2.4肺炎支原體抗體測定:采用特異性免疫凝集試驗檢測患兒外周血肺炎支原體抗體,效價>1︰80為陽性。觀察組再據血清肺炎支原體抗體效價范圍分為1︰80亞組、1︰160亞組、1︰320亞組、1︰640亞組、1︰1280亞組。

2.1觀察組與對照組血清CD64指數、NLR水平比較 觀察組CD64指數、NLR水平均高于對照組(P<0.01)。見表1。

表1 觀察組與對照組CD64指數、NLR水平比較
2.2不同肺炎支原體抗體效價患兒血清CD64指數、NLR水平比較 與1︰80亞組比較,1︰160、1︰320、1︰640、1︰1280 亞組CD64指數升高,與1︰160亞組比較,1︰640、1︰1280亞組CD64指數升高(P<0.05);與1︰80亞組比較,1︰160、1︰320、1︰640、1︰1280亞組NLR升高(P<0.05)。見表2。

表2 不同肺炎支原體抗體效價患兒血清CD64指數、NLR水平比較
2.3肺炎支原體肺炎患兒血清CD64指數、NLR水平與血清肺炎支原體抗體效價的相關性 肺炎支原體肺炎患兒CD64指數、NLR均與血清肺炎支原體抗體效價呈正相關(r=0.380、0.457,P<0.05)。
肺炎支原體感染致機體多臟器功能損傷的機制尚未完全清楚,考慮可能與感染后免疫異常相關[7]。研究認為,肺炎支原體肺炎發展為難治性肺炎支原體肺炎可導致機體體液免疫功能紊亂,免疫反應與炎癥反應越強烈[8]。
中性粒細胞是宿主防御微生物入侵的主要參與者,且在先天免疫反應中起主要作用。嗜中性粒細胞有雙重作用,除具有抗菌功能外,當其失調及過度活躍時還可以導致嚴重炎癥或組織損傷[9]。CD64是一種主要表達于中性粒細胞的跨膜免疫球蛋白受體,是連接體液免疫和細胞免疫的橋梁[10]。NLR是外周血中性粒細胞與淋巴細胞絕對值之比,可反映全身炎癥反應及免疫平衡情況[11]。本研究顯示,觀察組CD64指數、NLR水平較對照組升高,提示肺炎支原體感染患兒中性粒細胞因對抗炎癥反應升高,使得中性粒細胞表面CD64指數升高;而淋巴細胞的防御作用使得其大量消減,又使NLR升高。CD64指數及NLR升高說明肺炎支原體感染患兒正處于免疫防御狀態,免疫細胞活化、增殖。
許瑾[12]認為,血清抗體效價高的肺炎支原體感染患兒以下呼吸道感染為主且感染癥狀較重,發熱時間較長,并發癥發生率均明顯升高;間隔2周抗體效價的變化情況可用來確定感染所處的臨床階段,抗體效價越高,新近感染的可能性越大。本研究結果顯示,不同抗體效價亞組CD64指數、NLR有所不同,肺炎支原體肺炎患兒血清CD64指數、NLR均與血清肺炎支原體抗體效價呈正相關,提示血清抗體效價高的患兒病情嚴重,炎癥反應劇烈。
綜上,肺炎支原體肺炎患兒血清CD64指數及NLR水平升高,且與血清抗體效價有一定相關性,三者可作為判斷病情程度的有效指標。