孤獨(dú)癥譜系障礙兒童血清激素水平對(duì)照研究

何偉軍 熊喜悅 婁明星 彭穎 王益超

湖南省婦幼保健院兒童康復(fù)科，長沙 410008

孤獨(dú)癥譜系障礙（autism spectrum disorder，ASD）是一組起病于兒童早期，以社交障礙、狹隘興趣與刻板行為為主要特征的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病［1］，嚴(yán)重影響患者的身心發(fā)育，至今尚無明顯有效針對(duì)性治療方法，是一個(gè)世界性難題。近十年ASD發(fā)病率增長迅速，美國疾病預(yù)防控制中心（CDC）2018年發(fā)布ASD患病率的最新統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)為1∕59［2］，國內(nèi)目前還沒有大型ASD流行病學(xué)研究，只有部分城市做了流行病學(xué)調(diào)查，患病率為（19.8～63.7）∕10 000［3-6］。ASD社會(huì)致殘率較高，給越來越多的ASD患者和家庭帶來巨大的經(jīng)濟(jì)壓力和精神負(fù)擔(dān)［7］。ASD發(fā)病具有明顯的性別差異，男女患病率為（3～4）∶1［8-9］。性別因素在ASD發(fā)病中的作用越來越受到研究者的注意。近幾年，國內(nèi)外學(xué)者開始研究激素與ASD發(fā)病之間的關(guān)系，已經(jīng)成為新的研究熱點(diǎn)［10-13］。本研究通過分析ASD患兒血清孕酮（progesterone，P）、睪 酮（testosterone，T）、促 黃 體 生 成 素（luteinizing hormone，LH）、卵 泡刺激素（follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH）、生長激素（growth hormone，GH）、皮質(zhì)醇激素（cortisol hormone，CORT）、促腎上腺皮質(zhì)激素（adrenocorticotropic hormone，ACTH）水平并與發(fā)育正常兒童進(jìn)行對(duì)照，旨在進(jìn)一步探討ASD兒童與正常發(fā)育兒童血清激素水平的差異，以期為ASD病因?qū)W以及發(fā)病機(jī)制研究和臨床康復(fù)提供新的思路和方向。

對(duì)象與方法

1、研究對(duì)象

1.1 、一般資料 隨機(jī)選取2018年6月至2020年12月期間湖南省婦幼保健院門診就診的ASD兒童120例為ASD組，其中男68例，女52例，月齡24～108個(gè)月。在幼兒園招募正常發(fā)育兒童120例為對(duì)照組，其中男68例，女52例，月齡24～109個(gè)月。兩組兒童月齡經(jīng)Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)，均不符合正態(tài)分布（P＜0.05），采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用中位數(shù)（第25百分位數(shù)，第75百分位數(shù)）表示，ASD組月齡為50（36，63）個(gè)月，對(duì)照組月齡為54（39，64）個(gè)月，兩組月齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=0.412，P=0.680）。所有入組ASD兒童內(nèi)分泌結(jié)果均為回顧性分析，并經(jīng)由研究單位的倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)豁免知情同意；對(duì)照組兒童均由監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書，并經(jīng)由研究單位的倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。倫理批件號(hào)：快202007號(hào)。

1.2 、ASD組納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)（1）符合美國《精神障礙診斷和統(tǒng)計(jì)手冊(cè)》（第五版）［14］ASD診斷標(biāo)準(zhǔn)，由具有10年以上臨床經(jīng)驗(yàn)的高級(jí)職稱醫(yī)生進(jìn)行診斷；（2）排除性腺相關(guān)疾病；（3）近6個(gè)月未服用過外源性激素藥物、抗癲癇藥物、抗精神病藥物等可能影響內(nèi)分泌水平的藥物［15］。

1.3 、對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)（1）知曉本研究內(nèi)容，簽署知情同意書；（2）青春前期非肥胖兒童［16］；（3）排除性腺相關(guān)疾病；（4）近6個(gè)月未服用過外源性激素藥物、抗癲癇藥物、抗精神病藥物等可能影響內(nèi)分泌水平的藥物［15］。

2、血清激素檢測(cè)方法

早晨8點(diǎn)抽取空腹外周靜脈血約2 ml，離心分離血清后保存于-80℃冰箱中待測(cè)。應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清P、T、LH、FSH、GH、CORT、ACTH水 平，檢 測(cè) 儀 器 為 羅 氏Cobas8000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀，檢測(cè)試劑盒由羅氏公司提供。具體操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。檢測(cè)指標(biāo)參考區(qū)間如下：P0.159～1.120 nmol∕L，T男孩0.087～27.760 nmol∕L、女孩0.087～1.530 nmol∕L，LH男孩0.3～2.8 IU∕L、女孩0.1～4.0 IU∕L，F(xiàn)SH男孩0.5～4.5 IU∕L、女孩0.4～6.9 IU∕L，GH男孩0.094～6.290μg∕L、女 孩0.120～7.790μg∕L、CORT 101.2～535.7 nmol∕L、ACTH 7.0～65.0 pg∕ml。

3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料經(jīng)Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)，兩組數(shù)據(jù)均不符合正態(tài)分布（P＜0.05），計(jì)量資料采用中位數(shù)（第25百分位數(shù)，第75百分位數(shù)）表示，采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1、ASD組與對(duì)照組血清激素水平比較

ASD組血清P、LH、CORT、ACTH水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），兩組T、FSH、GH水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表1。

表1 ASD組與對(duì)照組血清激素水平比較[M（P25，P75）]

2、ASD組不同性別患兒血清激素水平比較

ASD組女性患兒血清FSH、GH水平顯著高于男性患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），不同性別患兒血清P、T、LH、CORT、ACTH水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表2。

表2 不同性別ASD兒童血清激素水平比較[M（P25，P75）]

3、不同性別ASD組與對(duì)照組血清FSH和GH水平比較

不同性別ASD組與對(duì)照組血清FSH和GH水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表3。

表3 不同性別ASD組與對(duì)照組血清FSH和GH水平比較[M（P25，P75）]

討 論

目前ASD的病因以及發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，臨床研究顯示其發(fā)病可能與遺傳、環(huán)境等因素關(guān)系密切［17-21］，有研究顯示神經(jīng)內(nèi)分泌與ASD病因?qū)W有密切關(guān)系［22-25］。激素是由內(nèi)分泌腺或器官組織的內(nèi)分泌細(xì)胞合成和分泌的高效能生物活性物質(zhì)，是組成人體內(nèi)環(huán)境的重要物質(zhì)，不僅對(duì)維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)、調(diào)節(jié)新陳代謝、促進(jìn)生長發(fā)育、調(diào)節(jié)生殖等方面具有重要的作用［26］，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育同樣具有重要的調(diào)節(jié)作用［27］。有研究顯示T會(huì)對(duì)人類的攻擊性、社會(huì)交往、沖動(dòng)性等方面產(chǎn)生一定的影響［28］，雌激素能誘導(dǎo)神經(jīng)突觸的形成，促進(jìn)星狀膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育，對(duì)神經(jīng)元具有重要的保護(hù)作用［29-30］。同時(shí)，性激素還可以對(duì)多個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)控，雌激素可以與其核受體ER-α、ER-β結(jié)合形成異二聚體，這種二聚體作為轉(zhuǎn)錄因子與靶基因的雌激素反應(yīng)元件（ERE）結(jié)合，起到調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用［31］。同雌激素類似的原理，雄激素也可以與其受體（AR）結(jié)合形成雄激素-AR復(fù)合二聚體，這種二聚體作為轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子與靶基因的雄激素反應(yīng)元件（ARE）結(jié)合，起到調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用［32］。此外，有研究顯示ASD患兒存在易感基因甲基化異常［33-34］，甲基化水平升高容易導(dǎo)致基因表達(dá)功能的下降［35］，而性激素可以調(diào)節(jié)某些基因的甲基化狀態(tài)，進(jìn)而調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄水平［36］。

本研究發(fā)現(xiàn)ASD兒童血清P、LH分泌水平明顯高于對(duì)照兒童，與張英等［37］研究結(jié)果基本一致；除此之外，我們還發(fā)現(xiàn)ASD兒童血清CORT、ACTH分泌水平也明顯高于對(duì)照兒童，進(jìn)一步補(bǔ)充了ASD兒童內(nèi)分泌指標(biāo)臨床特點(diǎn)。由于ASD兒童具有顯著性別差異患病的特點(diǎn)，為排除性別因素對(duì)兩組兒童激素水平比較的影響，我們將ASD兒童按性別分類后比較各指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ASD兒童血清P、T、LH、CORT、ACTH與對(duì)照兒童沒有顯著差異，進(jìn)一步說明ASD兒童血清P、LH、CORT、ACTH水平升高并非由性別因素影響所致，很可能在ASD共病、伴隨癥狀甚至主病發(fā)病的過程中起到了關(guān)鍵作用，也可能與ASD眾多臨床亞型特點(diǎn)有相關(guān)性，其作用機(jī)制值得進(jìn)一步深入研究，可能為ASD早期篩查、減少誤診漏診［38］以及臨床康復(fù)提供新的思路和方向。利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突